病毒、酒精、肝毒性藥物等因素所致的慢性肝損害,均會(huì)產(chǎn)生肝纖維化,進(jìn)而發(fā)展為肝硬化,目前尚無(wú)有效的根治辦法。我國(guó)罹患慢性肝損害的人數(shù)眾多,尋找有效的抗肝纖維化方法,阻止肝硬化的進(jìn)展,是亟待解決的問(wèn)題。結(jié)締組織生長(zhǎng)因子（CTGF）作為促肝纖維化的主要細(xì)胞因子,在肝纖維化的機(jī)制中發(fā)揮重要作用。CTGF主要通過(guò)介導(dǎo)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（TGF-β）活化肝星狀細(xì)胞（HSC）,導(dǎo)致細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）過(guò)度積聚,從而導(dǎo)致肝纖維化。HSC活化是肝纖維化發(fā)生、發(fā)展的中心環(huán)節(jié),CTGF在HSC中的高表達(dá)是HSC活化不可或缺的條件,因此,抑制CTGF在HSC中的表達(dá),就有可能阻止HSC的激活,進(jìn)而阻止肝纖維化的進(jìn)程。RNA干擾（RNA interference,RNAi）是生物體內(nèi)一種序列特異性轉(zhuǎn)錄后基因沉默（PTGS）,慢病毒載體是常用的介導(dǎo)RNAi的病毒載體之一,既可感染分裂期細(xì)胞又可以感染非分裂期細(xì)胞,不易誘發(fā)宿主免疫反應(yīng),能高效地感染靶細(xì)胞,表達(dá)的持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng),是基因沉默的有效工具。本研究選擇HSC為靶細(xì)胞,以CTGF為切入點(diǎn),應(yīng)用慢病毒載體介導(dǎo)的RNAi技術(shù),沉默CTGF基因功能,探討其在HSC活化中... 

【文章頁(yè)數(shù)】：80 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
縮略語(yǔ)表
中文摘要
英文摘要
前言
文獻(xiàn)回顧
實(shí)驗(yàn)一 包含目的基因的RNAi慢病毒載體轉(zhuǎn)移質(zhì)粒的構(gòu)建及鑒定
    1 材料
    2 方法
    3 結(jié)果
    4 討論
實(shí)驗(yàn)二 RNAi 慢病毒載體的包裝及篩選
    1 材料
    2 方法
    3 結(jié)果
    4 討論
實(shí)驗(yàn)三 慢病毒載體介導(dǎo)的CTGF 基因沉默效應(yīng)及其對(duì)下游基因表達(dá)的影響
    1 材料
    2 方法
    3 結(jié)果
    4 討論
實(shí)驗(yàn)四 CTGF 基因沉默與HSC 增殖、活化的關(guān)系
    1 材料
    2 方法
    3 結(jié)果
    4 討論
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)歷及發(fā)表論文
致謝



本文編號(hào)：3657174