目的:本文旨在研究Tfh細(xì)胞（follicular T helper cell,Tfh cell）及白細(xì)胞介素-21（Interleukin-21,IL-21）在潰瘍性結(jié)腸炎（ulcerative colitis,UC）發(fā)病過程中的作用,以及兩者在炎癥微環(huán)境中的相互影響。方法:實(shí)驗(yàn)選用C57BL/6J的野生型（WT）與IL-21基因敲除（IL-21KO）小鼠,利用DSS誘導(dǎo)潰瘍性結(jié)腸炎的發(fā)生。WT小鼠分為A1組（口服生理鹽水）、A2組（口服3%DSS水）、A3組（口服3%DSS水+腹腔注射anti-IL-21）A4組（口服3%DSS水+腹腔注射Ig G）A5組（口服3%DSS水+腹腔注射生理鹽水）,IL-21KO小鼠分為B1組（口服生理鹽水）和B2組（口服3%DSS水）。每組6只。將WT小鼠造模成功后的結(jié)腸組織提取淋巴細(xì)胞予以培養(yǎng),分為C1組、C2組、C3組.分別在培養(yǎng)液中加入Ig G、anti-IL-21和IL-21。流式細(xì)胞技術(shù)和PCR檢測對比A1組、A2組、B1組、B2組小鼠結(jié)腸組織中的Tfh細(xì)胞比例以及Tfh細(xì)胞相關(guān)性因子CXCR5、PD-1、CD40L、ICOS和Bcl-6的... 

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

(A).HE染色后對比兩者結(jié)腸組織中的炎癥程度，WT小鼠炎癥程度更強(qiáng)

果 濾泡輔助性 T 細(xì)胞和白細(xì)胞介素-21 對小鼠潰瘍性結(jié)腸炎的影響含量[16]。利用流式細(xì)胞分析發(fā)現(xiàn)，WT 小鼠經(jīng) DSS 誘導(dǎo)后，結(jié)腸組織中 T含量明顯高于未經(jīng) DSS 誘導(dǎo)的對照組（P<0.001），但在 IL-21KO 小鼠中發(fā)DSS 前后 Tfh 細(xì)胞含量無明顯差別 (P=0.08)，且在服藥前后，WT 小鼠結(jié)腸Tfh 細(xì)胞比例均高于 IL-21KO 小鼠 (圖 2. A)。為了檢測在潰瘍性結(jié)腸炎形成過程中，IL-21 是否能調(diào)節(jié) Tfh 細(xì)胞的表達(dá)，WT 和 IL-21KO 小鼠經(jīng) DSS 誘導(dǎo)前后的結(jié)腸組織標(biāo)本予以處理，提取 Tfh 細(xì)分子的 RNA，比較它們的含量。研究中發(fā)現(xiàn)， WT 小鼠在經(jīng) DSS 誘導(dǎo)后，-1(P=0.162) (圖 2. B)，其余的 Tfh 細(xì)胞相關(guān)性分子,如 ICOS、CXCR5、CD40-6 的表達(dá)量明顯高于誘導(dǎo)前(P<0.05) (圖 2. C,D,E,F)。而 IL-21KO 小鼠經(jīng) DSS 除了 CXCR5 的 RNA 表達(dá)量高于誘導(dǎo)前(P=0.007)(圖 2. E)，其余的 Tfh 細(xì)胞子 RNA 表達(dá)量與誘導(dǎo)前無明顯差別(P>0.05)(圖 2. B,C,D,E)。

白細(xì)胞介素-21 對小鼠潰瘍性結(jié)腸炎的影響研究 鼠體內(nèi)的 IL-21，可降低 DSS 誘導(dǎo)形成的潰瘍制 Tfh 細(xì)胞的增殖。斷 WT 小鼠中的 IL-21，可改善 DSS 誘導(dǎo)形成的潰瘍fh 細(xì)胞的增殖，我們將接受 DSS 誘導(dǎo)的 WT 小鼠分 anti-IL-21，一組每周 2 次注射 IgG, 一組每周 2 次后，取三組小鼠的結(jié)腸組織，對比 Tfh 細(xì)胞比例，無明顯差別，但兩者的 Tfh 細(xì)胞比例均高于 anti-IL05）（圖 3.A）。分析三組小鼠結(jié)腸組織中的炎癥程。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]輔助性T細(xì)胞17相關(guān)細(xì)胞因子與結(jié)腸癌的研究進(jìn)展[J]. 沈成龍,何宋兵,趙華,汪良.  醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報. 2013(04)
[2]CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在骨髓造血系統(tǒng)疾病中的研究進(jìn)展[J]. 劉增慧,李勇華,肖揚(yáng).  醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報. 2011(01)



本文編號：3652677