背景肝纖維化是慢性肝臟疾病必經(jīng)的病理過程,其涉及細胞及分子事件眾多。近年來研究證明肝纖維化為一動態(tài)過程,經(jīng)合理治療后可以逆轉。目前研究已經(jīng)證明氧化應激及肝星狀細胞（hepatic stellate cell,HSCs）的活化在肝纖維化形成發(fā)展過程中發(fā)揮著重要的作用。褪黑素（N-乙酰-5-甲氧色氨酸,melatonin）為腦內松果腺體分泌的具有強大抗氧化能力的一種激素。研究證明褪黑素能改善多種急性及慢性肝臟損傷。前期研究結果顯示褪黑素對肝纖維化具有一定的改善作用,且抗纖維化作用與其抗氧化作用相關。HSCs的活化在肝纖維化過程中發(fā)揮著關鍵性的作用,其中轉化生長因子β1（transforming growth factorβ1,TGF-β1）是刺激HSCs活化的最重要的細胞因子。而TGF-β1主要通過細胞內Smad蛋白發(fā)揮其促進肝纖維化的作用。研究證明抑制TGF-β1/Smad信號通路可改善肝纖維化。褪黑素抗纖維化的機制目前仍未完全清楚,本文旨在四氯化碳（carbon tetrachloride,CCl4）誘導的肝纖維化模型基礎上進一步證明褪黑素對肝纖維化的保護作用,并探討褪黑素抗纖維化作用... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學安徽省

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學位級別】：碩士

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中文摘要
Abstract
1.前言
2.材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 實驗動物
        2.1.2 實驗藥物及試劑
        2.1.3 部分實驗試劑配制
        2.1.4 實驗儀器及設備
    2.2 實驗方法
        2.2.1 實驗性CCl_4肝纖維化大鼠模型的建立
        2.2.2 大鼠血清肝功能檢測
        2.2.3 大鼠肝臟病理檢查
            2.2.3.1 肝臟組織固定、包埋切片、脫蠟至水
            2.2.3.2 HE染色
            2.2.3.3 VG染色
            2.2.3.4 肝組織病理染色結果分析
        2.2.4 肝組織Hyp含量的測定
        2.2.5 肝組織MDA含量、GPx酶活力測定
            2.2.5.1 肝臟勻漿的制備
            2.2.5.2 蛋白濃度的測定（考馬斯亮蘭法）
            2.2.5.3 MDA含量測定（TBA法）
            2.2.5.4 GPx酶活力測定
        2.2.6 免疫組化測定肝TGF-β1/Smad通路表達
            2.2.6.1 TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2/3 免疫組化染色方法
            2.2.6.2 免疫組化結果評估
        2.2.7 Western Blotting測定肝TGF-β1/Smad通路表達
            2.2.7.1 提取肝組織總蛋白
            2.2.7.2 BCA法測定蛋白濃度
            2.2.7.3 定蛋白濃度、變性
            2.2.7.4 SDS-PAGE凝膠電泳分離蛋白
            2.2.7.5 檢測目的蛋白（ECL發(fā)光法）
        2.2.8 統(tǒng)計學分析
3.結果
    3.1 大鼠血清肝功能指標測定結果
    3.2 大鼠肝臟病理檢查結果
    3.3 大鼠肝組織Hyp的含量測定結果
    3.4 大鼠肝組織勻漿MDA含量及GPx活性測定結果
    3.5 免疫組化法測定肝組織TGF-β1/Smad通路表達結果
    3.6 Western Blotting測定肝組織TGF-β1/Smad通路表達結果
4. 討論
    4.1 CCl_4肝纖維化大鼠模型的建立
    4.2 氧化應激與肝纖維化的關系
    4.3 褪黑素抗纖維化與氧化應激的關系
    4.4 TGF-β1/Smad通路與肝纖維化的關系
    4.5 氧化應激與TGF-β1/Smad信號通路的關系
    4.6 褪黑素抗纖維化與TGF-β1/Smad通路的關系
5.結論
參考文獻
附錄 個人簡歷
致謝
綜述
    參考文獻


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3602324