背景肝纖維化是慢性肝臟疾病必經(jīng)的病理過(guò)程,其涉及細(xì)胞及分子事件眾多。近年來(lái)研究證明肝纖維化為一動(dòng)態(tài)過(guò)程,經(jīng)合理治療后可以逆轉(zhuǎn)。目前研究已經(jīng)證明氧化應(yīng)激及肝星狀細(xì)胞（hepatic stellate cell,HSCs）的活化在肝纖維化形成發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用。褪黑素（N-乙酰-5-甲氧色氨酸,melatonin）為腦內(nèi)松果腺體分泌的具有強(qiáng)大抗氧化能力的一種激素。研究證明褪黑素能改善多種急性及慢性肝臟損傷。前期研究結(jié)果顯示褪黑素對(duì)肝纖維化具有一定的改善作用,且抗纖維化作用與其抗氧化作用相關(guān)。HSCs的活化在肝纖維化過(guò)程中發(fā)揮著關(guān)鍵性的作用,其中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（transforming growth factorβ1,TGF-β1）是刺激HSCs活化的最重要的細(xì)胞因子。而TGF-β1主要通過(guò)細(xì)胞內(nèi)Smad蛋白發(fā)揮其促進(jìn)肝纖維化的作用。研究證明抑制TGF-β1/Smad信號(hào)通路可改善肝纖維化。褪黑素抗纖維化的機(jī)制目前仍未完全清楚,本文旨在四氯化碳（carbon tetrachloride,CCl4）誘導(dǎo)的肝纖維化模型基礎(chǔ)上進(jìn)一步證明褪黑素對(duì)肝纖維化的保護(hù)作用,并探討褪黑素抗纖維化作用... 

【文章來(lái)源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁(yè)數(shù)】：72 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
英文縮寫(xiě)詞匯表
中文摘要
Abstract
1.前言
2.材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)藥物及試劑
        2.1.3 部分實(shí)驗(yàn)試劑配制
        2.1.4 實(shí)驗(yàn)儀器及設(shè)備
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)性CCl_4肝纖維化大鼠模型的建立
        2.2.2 大鼠血清肝功能檢測(cè)
        2.2.3 大鼠肝臟病理檢查
            2.2.3.1 肝臟組織固定、包埋切片、脫蠟至水
            2.2.3.2 HE染色
            2.2.3.3 VG染色
            2.2.3.4 肝組織病理染色結(jié)果分析
        2.2.4 肝組織Hyp含量的測(cè)定
        2.2.5 肝組織MDA含量、GPx酶活力測(cè)定
            2.2.5.1 肝臟勻漿的制備
            2.2.5.2 蛋白濃度的測(cè)定（考馬斯亮蘭法）
            2.2.5.3 MDA含量測(cè)定（TBA法）
            2.2.5.4 GPx酶活力測(cè)定
        2.2.6 免疫組化測(cè)定肝TGF-β1/Smad通路表達(dá)
            2.2.6.1 TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2/3 免疫組化染色方法
            2.2.6.2 免疫組化結(jié)果評(píng)估
        2.2.7 Western Blotting測(cè)定肝TGF-β1/Smad通路表達(dá)
            2.2.7.1 提取肝組織總蛋白
            2.2.7.2 BCA法測(cè)定蛋白濃度
            2.2.7.3 定蛋白濃度、變性
            2.2.7.4 SDS-PAGE凝膠電泳分離蛋白
            2.2.7.5 檢測(cè)目的蛋白（ECL發(fā)光法）
        2.2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3.結(jié)果
    3.1 大鼠血清肝功能指標(biāo)測(cè)定結(jié)果
    3.2 大鼠肝臟病理檢查結(jié)果
    3.3 大鼠肝組織Hyp的含量測(cè)定結(jié)果
    3.4 大鼠肝組織勻漿MDA含量及GPx活性測(cè)定結(jié)果
    3.5 免疫組化法測(cè)定肝組織TGF-β1/Smad通路表達(dá)結(jié)果
    3.6 Western Blotting測(cè)定肝組織TGF-β1/Smad通路表達(dá)結(jié)果
4. 討論
    4.1 CCl_4肝纖維化大鼠模型的建立
    4.2 氧化應(yīng)激與肝纖維化的關(guān)系
    4.3 褪黑素抗纖維化與氧化應(yīng)激的關(guān)系
    4.4 TGF-β1/Smad通路與肝纖維化的關(guān)系
    4.5 氧化應(yīng)激與TGF-β1/Smad信號(hào)通路的關(guān)系
    4.6 褪黑素抗纖維化與TGF-β1/Smad通路的關(guān)系
5.結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄 個(gè)人簡(jiǎn)歷
致謝
綜述
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]TGF-β1、PDGF、CTGF與肝纖維化發(fā)病機(jī)制的相關(guān)性研究進(jìn)展[J]. 田甜,馬國(guó)珍,廖志峰,盧雨蓓.  甘肅醫(yī)藥. 2014(10)
[2]Pathogenesis of liver cirrhosis[J]. Wen-Ce Zhou,Quan-Bao Zhang,Liang Qiao.  World Journal of Gastroenterology. 2014(23)
[3]TGF-β-Smad信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑在肝纖維化中的作用及中藥干預(yù)的研究進(jìn)展[J]. 何林蔓,李曼,周振華,張?chǎng)?高月求.  中國(guó)中醫(yī)急癥. 2014(06)
[4]shRNA重組慢病毒沉默SMAD3對(duì)大鼠肝纖維化的抑制作用[J]. 張瑩,孔賀利,張建軍,劉梅,任鋒,劉霜,陳煜,段鐘平,鄭素軍.  實(shí)用肝臟病雜志. 2014(03)
[5]TGFβ1-Smad3-ILK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與大鼠肝纖維化的相關(guān)性研究[J]. 吳雄健,毛忠懿.  中國(guó)當(dāng)代醫(yī)藥. 2013(36)
[6]肝纖維化中的TGF-β1/Smad信號(hào)通路[J]. 湯雯,姜春燕.  中華臨床醫(yī)師雜志(電子版). 2013(07)
[7]Exogenous bone morphogenetic protein-7 reduces hepatic fibrosis inSchistosoma japonicum-infected micevia transforming growth factor-β/Smad signaling[J]. Bo-Lin Chen,Jie Peng,Qing-Fu Li,Min Yang,Yuan Wang,Wei Chen.  World Journal of Gastroenterology. 2013(09)
[8]大鼠肝纖維化模型建立及肝纖維化的檢測(cè)[J]. 黃迪,古維立,胡志文,張帥,王成興.  廣州醫(yī)藥. 2012(05)
[9]褪黑素對(duì)大鼠肝纖維化的影響及部分機(jī)制研究[J]. 洪汝濤,許建明,沈繼龍,梅俏,胡元生,羅慶禮.  中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2012(08)
[10]氧化應(yīng)激在肝纖維化發(fā)展過(guò)程中的作用[J]. 李豐衣,張琳,聶為民.  中華中醫(yī)藥學(xué)刊. 2012(04)



本文編號(hào)：3602324