[背景及目的]進行性肝纖維化（liver fibrosis）是各種慢性肝病演變?yōu)楦斡不闹饕l(fā)病機制,造成細胞外基質過度沉積,功能性肝細胞相對減少,尤其是肝損傷后功能性肝細胞減少,使得補充丟失的肝細胞已成為近年來研究的熱點。干細胞移植是當今世界上最前沿、最熱門的醫(yī)療新技術之一。國內外的研究及臨床應用均表明,自體干細胞移植治療肝硬化腹水等肝病療效肯定,具有較好推廣價值,被譽為“肝硬化治療第二條終極途徑”骨髓間充質干細胞（bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs）是來源于中胚層具有多向分化能力的干細胞,主要存在于結締組織和器官間質中,以骨髓組織中含量最為豐富。BMSCs在一定的誘導條件下能分化為神經細胞、成骨細胞、造血細胞、心肌細胞、骨骼肌細胞、表皮細胞、腱細胞、脂肪細胞、肝細胞等。BMSCs具有極強的自我復制能力和多向分化潛能,且低免疫源性,具有在活體內外誘導分化為肝細胞的潛能,動物實驗及臨床初步研究顯示移植自身BMSCs可改善肝功能,有望成為新的肝細胞源治療肝臟疾病。BMSCs的導入途徑是影響干細胞定植于肝臟的重要因素。門靜脈或肝動脈介入肝臟或... 

【文章來源】：中南大學湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

原代分離的(A)分離的原代細胞(X200倍);fC)第2代細胞(X200倍):

CD44表達為陽性，其中CD29的陽性率為98.05%, CD44的陽性率為96.92%(P<0.05)(見圖3-2)。流式檢測結果表明，純化后的細胞符合骨髓間充質干細胞的特征，說明貼壁培養(yǎng)分離后的細胞為純度較高的間充質干細胞，可進行后續(xù)誘導分化的實驗。 8^ 0 ： 2 .答 §■； }\^ ■ I 爸? 一 I II Ml I ‘ Io ： 、 O ： ‘‘"；；義 ,丨 1 i i i..?i1。 10l 1t)2 103 104 > 101 io2 103 jo^CDIIbPE CD45PE8- 8. . 00 .ll :\ ^-A^I il f\ ^""7^"■“‘ 〉>一 :]丄■ ■,2^、:、一10。 10l 1o2 1o3 10^ loO 10l 1o2 10^ 1()4CD29 FITC CD44 FiTC圖3-2流式細胞儀檢測純化后BMSCs的CDllb、CD45. CD29、CD44的表達情況。3.2不同途徑移植BMSCs治療急性肝損害的效果研究3.2.1大鼠BMSCs的體外雙標記3.2.1.1 GFP重組逆轉錄病毒體外標記BMSCs將攜帶綠色突光蛋白的重組逆轉錄病毒感染體外分離培養(yǎng)的大鼠骨髓間充質干細胞，用于急性肝損害大鼠模型移植后的示蹤研究。在焚光顯微鏡下，可見細胞內有明亮綠色熒光，證實存在綠色熒光蛋白的表達，表明GFP標記BMSCs成功（見圖3-3)。14

表3-1雙標記的BMSCs的MTT檢測（* P<0.05 )0D 值 Id 3d 7d 14d雙標記 0.26±0.04 0.31士 0.11* 0.65±0.04 0.65±0.11未標記 0.28±0.06 0.4] 士0.12 0.64±0.11 0.68±0.133.2.2急性肝損傷大鼠模型的建立3.2.2.1病理結果實驗組大鼠腹腔注射10%CCl4損傷液（5mL/kg)，建立急性肝損害模型。造模期間，觀察大鼠的生長及生活情況，發(fā)現(xiàn)實驗組大鼠被毛逐漸雜亂而無光澤，活動減少，精神萎靡，對外界刺激反應遲鈍，食欲減退，體重下降，尿色深黃。但大鼠無拒飲拒食現(xiàn)象發(fā)生，整體耐受狀態(tài)良好。而對照組大鼠體毛光滑、緊貼身體，肌肉豐滿，反應敏捷，活動有力，眼睛有神，食欲旺盛，精神狀態(tài)好。24小時后隨機處死實驗組及對照組大鼠各2只，切取肝右葉，常規(guī)進行HE

【參考文獻】：
期刊論文
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