CRISPR/Cas9敲除Ptgs2對肝星狀細(xì)胞凋亡的影響
發(fā)布時間:2022-01-12 06:00
目的:研究敲除HSC-T6細(xì)胞Ptgs2基因后對其凋亡的影響,為臨床上肝硬化防治探索新策略。方法:將大鼠HSC-T6細(xì)胞設(shè)置KD組(HSC-T6-Ptgs2-/-細(xì)胞)、陰性對照NC組(HSC-T6-NC細(xì)胞)和空白對照CON組(HSC-T6細(xì)胞)。LV-Ptgs2-sgRNA慢病毒載體轉(zhuǎn)染KD組,LV慢病毒載體轉(zhuǎn)染NC組,CON組常規(guī)培養(yǎng),不做干預(yù)。轉(zhuǎn)染72小時后,電子熒光顯微鏡觀察慢病毒轉(zhuǎn)染效果并拍片,計算轉(zhuǎn)染率。轉(zhuǎn)染后72小時、96小時,采用Western blot分別檢測三組HSC-T6細(xì)胞Ptgs2基因蛋白表達(dá)情況。轉(zhuǎn)染5天后Annexin V-APC單染法染色,采用流式細(xì)胞技術(shù)分別檢測三組細(xì)胞凋亡率。結(jié)果:(1)各組HSC-T6細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)染情況:KD組和NC組細(xì)胞均可見綠色熒光,CON組未見綠色熒光,經(jīng)計算KD組和NC組轉(zhuǎn)染效率在80%以上,慢病毒載體轉(zhuǎn)染成功。(2)各組HSC-T6細(xì)胞Ptgs2蛋白的表達(dá)情況:KD組細(xì)胞LV-Ptgs2-sgRNA慢病毒感染72小時,Ptgs2蛋白表達(dá)明顯低于NC組、CON組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05...
【文章來源】:湖南師范大學(xué)湖南省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:54 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
2小時慢病毒轉(zhuǎn)染HSC-T6細(xì)胞圖片(×100倍)
2小時慢病毒轉(zhuǎn)染HSC-T6細(xì)胞圖片(×200倍)
轉(zhuǎn)染72h及96h各組Ptgs2蛋白表達(dá)變化
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)的發(fā)展及其在醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域的應(yīng)用[J]. 朱佩琪,蔣偉東,周諾. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志. 2019(02)
[2]β-腎上腺素能受體阻滯劑和COX-2抑制劑在結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移中的作用研究[J]. 李敏江,陳棟,陳文斌. 中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué). 2018(08)
[3]siRNA靶向沉默COX-2對宮頸癌細(xì)胞VEGF、EGFR表達(dá)的影響[J]. 陳杰,王莉,王俊嶺,王慧. 癌癥進(jìn)展. 2018(08)
[4]全反式維甲酸對TGF-β1刺激的肝星狀細(xì)胞COL1α2、MMP-2、TIMP-1以及信號通路的影響[J]. 陳珂,許君望,周琦,李雪倩,范修德. 西安交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2017(06)
[5]肝復(fù)康經(jīng)JNK信號通路在肝星狀細(xì)胞凋亡中的調(diào)節(jié)機制[J]. 李驄,李寒姝,張彩華,姜妙娜,袁麗君,賈玉杰. 實用藥物與臨床. 2017(06)
[6]Role of retinoids in the prevention and treatment of colorectal cancer[J]. Catherine C Applegate,Michelle A Lane. World Journal of Gastrointestinal Oncology. 2015(10)
[7]Bcl-2基因家族研究進(jìn)展[J]. 任玉偉,宿華威. 大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2015(02)
[8]內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標(biāo)志性蛋白Caspase-12在四氯化碳誘導(dǎo)大鼠肝纖維化逆轉(zhuǎn)恢復(fù)模型中的作用研究[J]. 黃艷,李曉慧,吳正升,王歡,汪應(yīng)紅,李海迪,孫仕偉,李俊. 安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2015(02)
[9]肝纖維化的發(fā)病機制和藥物治療現(xiàn)況[J]. 夏海珊,陳少茹,鐘月春,呂思敏,陳麗思,黃志榮,吳鐵,鄒麗宜. 中國醫(yī)藥導(dǎo)報. 2014(18)
[10]紫花牡荊素誘導(dǎo)肝星狀細(xì)胞凋亡的作用機制[J]. 田君湘. 世界華人消化雜志. 2014(07)
博士論文
[1]RNAi沉默COX-2對HSC細(xì)胞動力學(xué)及脂質(zhì)代謝的影響[D]. 陽學(xué)風(fēng).南華大學(xué) 2012
碩士論文
[1]阿魏酸聯(lián)合脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞體外促肝星狀細(xì)胞凋亡及機制的研究[D]. 許希燕.西南醫(yī)科大學(xué) 2018
[2]維生素A缺乏對免疫性肝炎肝損傷影響的實驗研究[D]. 周哲.天津醫(yī)科大學(xué) 2018
[3]沉默COX-2對HSC-T6衰老的影響及機制探討[D]. 唐艷芬.南華大學(xué) 2017
[4]沉默COX-2對HSC-T6增殖的影響及機制研究[D]. 周遷.南華大學(xué) 2017
[5]COX-2通過AA對HSC-T6細(xì)胞增殖及Acsl家族基因表達(dá)的調(diào)控[D]. 章爍.南華大學(xué) 2014
本文編號:3584237
【文章來源】:湖南師范大學(xué)湖南省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:54 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
2小時慢病毒轉(zhuǎn)染HSC-T6細(xì)胞圖片(×100倍)
2小時慢病毒轉(zhuǎn)染HSC-T6細(xì)胞圖片(×200倍)
轉(zhuǎn)染72h及96h各組Ptgs2蛋白表達(dá)變化
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)的發(fā)展及其在醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域的應(yīng)用[J]. 朱佩琪,蔣偉東,周諾. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志. 2019(02)
[2]β-腎上腺素能受體阻滯劑和COX-2抑制劑在結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移中的作用研究[J]. 李敏江,陳棟,陳文斌. 中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué). 2018(08)
[3]siRNA靶向沉默COX-2對宮頸癌細(xì)胞VEGF、EGFR表達(dá)的影響[J]. 陳杰,王莉,王俊嶺,王慧. 癌癥進(jìn)展. 2018(08)
[4]全反式維甲酸對TGF-β1刺激的肝星狀細(xì)胞COL1α2、MMP-2、TIMP-1以及信號通路的影響[J]. 陳珂,許君望,周琦,李雪倩,范修德. 西安交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2017(06)
[5]肝復(fù)康經(jīng)JNK信號通路在肝星狀細(xì)胞凋亡中的調(diào)節(jié)機制[J]. 李驄,李寒姝,張彩華,姜妙娜,袁麗君,賈玉杰. 實用藥物與臨床. 2017(06)
[6]Role of retinoids in the prevention and treatment of colorectal cancer[J]. Catherine C Applegate,Michelle A Lane. World Journal of Gastrointestinal Oncology. 2015(10)
[7]Bcl-2基因家族研究進(jìn)展[J]. 任玉偉,宿華威. 大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2015(02)
[8]內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標(biāo)志性蛋白Caspase-12在四氯化碳誘導(dǎo)大鼠肝纖維化逆轉(zhuǎn)恢復(fù)模型中的作用研究[J]. 黃艷,李曉慧,吳正升,王歡,汪應(yīng)紅,李海迪,孫仕偉,李俊. 安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2015(02)
[9]肝纖維化的發(fā)病機制和藥物治療現(xiàn)況[J]. 夏海珊,陳少茹,鐘月春,呂思敏,陳麗思,黃志榮,吳鐵,鄒麗宜. 中國醫(yī)藥導(dǎo)報. 2014(18)
[10]紫花牡荊素誘導(dǎo)肝星狀細(xì)胞凋亡的作用機制[J]. 田君湘. 世界華人消化雜志. 2014(07)
博士論文
[1]RNAi沉默COX-2對HSC細(xì)胞動力學(xué)及脂質(zhì)代謝的影響[D]. 陽學(xué)風(fēng).南華大學(xué) 2012
碩士論文
[1]阿魏酸聯(lián)合脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞體外促肝星狀細(xì)胞凋亡及機制的研究[D]. 許希燕.西南醫(yī)科大學(xué) 2018
[2]維生素A缺乏對免疫性肝炎肝損傷影響的實驗研究[D]. 周哲.天津醫(yī)科大學(xué) 2018
[3]沉默COX-2對HSC-T6衰老的影響及機制探討[D]. 唐艷芬.南華大學(xué) 2017
[4]沉默COX-2對HSC-T6增殖的影響及機制研究[D]. 周遷.南華大學(xué) 2017
[5]COX-2通過AA對HSC-T6細(xì)胞增殖及Acsl家族基因表達(dá)的調(diào)控[D]. 章爍.南華大學(xué) 2014
本文編號:3584237
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