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CRISPR/Cas9敲除Ptgs2對肝星狀細(xì)胞凋亡的影響

發(fā)布時間:2022-01-12 06:00
  目的:研究敲除HSC-T6細(xì)胞Ptgs2基因后對其凋亡的影響,為臨床上肝硬化防治探索新策略。方法:將大鼠HSC-T6細(xì)胞設(shè)置KD組(HSC-T6-Ptgs2-/-細(xì)胞)、陰性對照NC組(HSC-T6-NC細(xì)胞)和空白對照CON組(HSC-T6細(xì)胞)。LV-Ptgs2-sgRNA慢病毒載體轉(zhuǎn)染KD組,LV慢病毒載體轉(zhuǎn)染NC組,CON組常規(guī)培養(yǎng),不做干預(yù)。轉(zhuǎn)染72小時后,電子熒光顯微鏡觀察慢病毒轉(zhuǎn)染效果并拍片,計算轉(zhuǎn)染率。轉(zhuǎn)染后72小時、96小時,采用Western blot分別檢測三組HSC-T6細(xì)胞Ptgs2基因蛋白表達(dá)情況。轉(zhuǎn)染5天后Annexin V-APC單染法染色,采用流式細(xì)胞技術(shù)分別檢測三組細(xì)胞凋亡率。結(jié)果:(1)各組HSC-T6細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)染情況:KD組和NC組細(xì)胞均可見綠色熒光,CON組未見綠色熒光,經(jīng)計算KD組和NC組轉(zhuǎn)染效率在80%以上,慢病毒載體轉(zhuǎn)染成功。(2)各組HSC-T6細(xì)胞Ptgs2蛋白的表達(dá)情況:KD組細(xì)胞LV-Ptgs2-sgRNA慢病毒感染72小時,Ptgs2蛋白表達(dá)明顯低于NC組、CON組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05... 

【文章來源】:湖南師范大學(xué)湖南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:54 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

CRISPR/Cas9敲除Ptgs2對肝星狀細(xì)胞凋亡的影響


2小時慢病毒轉(zhuǎn)染HSC-T6細(xì)胞圖片(×100倍)

CRISPR/Cas9敲除Ptgs2對肝星狀細(xì)胞凋亡的影響


2小時慢病毒轉(zhuǎn)染HSC-T6細(xì)胞圖片(×200倍)

CRISPR/Cas9敲除Ptgs2對肝星狀細(xì)胞凋亡的影響


轉(zhuǎn)染72h及96h各組Ptgs2蛋白表達(dá)變化

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[3]siRNA靶向沉默COX-2對宮頸癌細(xì)胞VEGF、EGFR表達(dá)的影響[J]. 陳杰,王莉,王俊嶺,王慧.  癌癥進(jìn)展. 2018(08)
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博士論文
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碩士論文
[1]阿魏酸聯(lián)合脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞體外促肝星狀細(xì)胞凋亡及機制的研究[D]. 許希燕.西南醫(yī)科大學(xué) 2018
[2]維生素A缺乏對免疫性肝炎肝損傷影響的實驗研究[D]. 周哲.天津醫(yī)科大學(xué) 2018
[3]沉默COX-2對HSC-T6衰老的影響及機制探討[D]. 唐艷芬.南華大學(xué) 2017
[4]沉默COX-2對HSC-T6增殖的影響及機制研究[D]. 周遷.南華大學(xué) 2017
[5]COX-2通過AA對HSC-T6細(xì)胞增殖及Acsl家族基因表達(dá)的調(diào)控[D]. 章爍.南華大學(xué) 2014



本文編號:3584237

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