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MitoQ保護(hù)mtDNA減輕腸缺血/再灌注致腸屏障損傷的作用及機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2021-12-24 07:57
  背景:缺血/再灌注是臨床上一項(xiàng)重大地挑戰(zhàn),尤其發(fā)生在胃腸道上。腸道是對(duì)缺血最敏感的組織器官之一。腸缺血/再灌注(intestinal ischemia reperfusion,I/R)損傷作為外科危急重癥,常見(jiàn)于嚴(yán)重的創(chuàng)傷,感染,休克。隨著近年來(lái)研究的深入,腸道被認(rèn)為是誘發(fā)多功能臟器衰竭的因素。腸缺血/再灌注損傷后,不僅可以引起腸組織的局部損害,而且由于腸屏障功能障礙將會(huì)進(jìn)一步導(dǎo)致細(xì)菌和毒素移位到體內(nèi)循環(huán),引起網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)發(fā)生系列反應(yīng),促炎癥細(xì)胞因子大量釋放入血,并進(jìn)一步在循環(huán)系統(tǒng)彌散,導(dǎo)致毒血癥、休克等,繼而損害肝、肺、腎等多個(gè)器官,最終導(dǎo)致患者死亡。近年來(lái),盡管在缺血/再灌注損傷的防治和機(jī)制研究中已經(jīng)取得了很大的進(jìn)展,但如何有效地預(yù)防和減輕缺血/再灌注損傷仍然是臨床工作者們面臨的重要難題。有研究表明氧化應(yīng)激和線粒體功能障礙在缺血/再灌注損傷中發(fā)揮了重要作用。線粒體DNA(mtDNA)易受到氧化應(yīng)激損傷。但缺血/再灌注損傷與mtDNA之間的關(guān)系尚不明確。MitoQ是目前研究最多和應(yīng)用最廣泛的線粒體靶向抗氧化劑。由TPP+與輔酶Q10的苯醌部分通過(guò)一個(gè)十碳脂肪鏈共價(jià)結(jié)合構(gòu)成。近年來(lái)研究... 

【文章來(lái)源】:東南大學(xué)江蘇省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:43 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

MitoQ保護(hù)mtDNA減輕腸缺血/再灌注致腸屏障損傷的作用及機(jī)制研究


圖2IEC-6細(xì)胞Tunel染色??

流式細(xì)胞術(shù),流式細(xì)胞儀檢測(cè),腸上皮,細(xì)胞


通過(guò)Timel染色及流式細(xì)胞儀檢測(cè)Annexin-V/PI陽(yáng)性的細(xì)胞比率。與對(duì)照組相比,??缺氧/復(fù)氧處理后的Tunel陽(yáng)性細(xì)胞明顯增多(圖2),通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)Annexm-V/PI??陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)也明顯增多(圖3);而與缺氧/復(fù)氧相比,MkoQ治療組Tunel陽(yáng)性腸上皮細(xì)??胞明顯減少(圖2),流式細(xì)胞儀顯示Annexin-V/PI陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)也減少(圖3)。表明??MitoQ能抑制缺氧/復(fù)氧引起的細(xì)胞凋亡。??:>\?\??■■■■■■??■■■■■■??正常紐?HR?MitoQ?0.1?mM+H.U?MitoQ?0.5?jxM+HR?MitoQ?lfiM+H^R?DTT+HR??圖2IEC-6細(xì)胞Tunel染色???j?1???1?????P??。ⅲ?:?尹???一 ̄;??V?y?.^M|ir??氣.3瀅?'?n??'M?0?*J??nK?I?KM?01???.?.J??__I?,?,?1,1,?J???^????__^????????■?I?,,i,y?.?一?。??'*???rt?nt>ti?”?*"?,fl?nm?H???u??*????n'm??Control?HR?MitoQ?0.1?pM+H?R????j????ii????*j?#?V?^?V?ijjpfr.,..'????^r-??p ̄ ̄:??p?Mt??—??i?-?"j??j?|???tn?'J*?1???j*?? ̄ ̄?I?_i??....i..

腸缺血,細(xì)胞線粒體,膜電位,再灌注


通過(guò)檢測(cè)H9c2細(xì)胞中線粒體膜電位及ATP水平的變化來(lái)反應(yīng)細(xì)胞中線粒體功能的??變化。從結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)與對(duì)照組相比,缺氧/復(fù)氧后IEC-6細(xì)胞中線粒體膜電位明顯降低??(圖),ATP水平也顯著下降(圖4);而與單純?nèi)毖酰瘡?fù)氧處理后相比,用MitoQ后預(yù)??處理再行缺氧/復(fù)氧處理,IEC-6細(xì)胞線粒體膜電位明顯升高,ATP含量也明顯增多。表??明MhoQ能減輕缺氧/復(fù)氧引起的IEC-6細(xì)胞線粒體功能障礙。??0?P???fl????>?t?-??、<?????_..??TT—J,?;;?::'?? ̄V■…"-,^?二?*7;?^ ̄?.??Control?HR?MitoO?0.1?uM+H?R??、t??1?、i?????*??r?S'?i?y??許一—???r_?^?:????I?*?^00-''?-?^pr??.?????t:?**?'?*■??H^?-Z'?i?::?^?H?z<??■b ̄^??;i?*:"?—7?i-?-?';;;??MitoQ?0.5?joM+HR?MitoQ?l^iM+HR?DTT+HR??■Maflili??/、wv^??圖4?ATP水平及IEC-6細(xì)胞線粒體膜電位水平??4.?MitoQ減輕腸缺血/再灌注引起的mtDNA損傷??4.1?MitoQ對(duì)小鼠腸缺血/再灌注后mtDNA拷貝數(shù)及intDNA基因轉(zhuǎn)錄水平的影響??不同組的小鼠進(jìn)行相應(yīng)的處理后,PCR檢測(cè)mtDNA拷貝數(shù)及mtDNA基因轉(zhuǎn)錄水??平的變化來(lái)反應(yīng)mtDNA受損程度。與對(duì)照姐相比


本文編號(hào):3550110

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