發(fā)布時間：2021-12-17 11:45

　　目的:拉米夫定是抗病毒核苷類藥物,對乙型肝炎病毒（HBV）有明顯的抑制作用,但拉米夫定易復(fù)發(fā)和血清轉(zhuǎn)換率低。因此拉米夫定治療乙型肝炎的最大問題是長期治療后產(chǎn)生病毒變異而耐藥和停藥后HBV DNA的反跳。本研究探討拉米夫定治療后乙型肝炎病毒耐藥位點出現(xiàn)的變化規(guī)律,分析其發(fā)生機(jī)制,對進(jìn)一步治療方案的確定、分析YMDD變異對治療效果的影響具有重要臨床價值。方法:選擇應(yīng)用拉米夫定治療的患者14例,常規(guī)離心后收集外周血清,定量PCR擴(kuò)增,純化后通過雙脫氧測序的方法獲得HBV DNA序列,最后通過計算機(jī)Mclone軟件進(jìn)行分析,動態(tài)觀測不同耐藥時段HBV DNA變異位點發(fā)生規(guī)律。結(jié)果:應(yīng)用拉米夫定的患者隨著使用時間的延長,HBV DNA水平逐漸轉(zhuǎn)陽,經(jīng)過測序發(fā)現(xiàn)大部分的患者都出現(xiàn)YMDD變異,其中有11例為YVDD變異,而3例出現(xiàn)YIDD變異。隨著用藥時間的進(jìn)一步延長,部分患者出現(xiàn)ALT反彈,進(jìn)行第2次測序中發(fā)現(xiàn),在原有YMDD變異基礎(chǔ)之上,又出現(xiàn)許多新的變異位點,主要發(fā)生位點有:A181V T184S,A181T S202I,A181T S202I,A181T V214,T184S V214A,... 

【文章來源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

拉米吠陡治療中HBVDNA陽性患者p基因

1.PCR擴(kuò)增結(jié)果拉米夫定治療后 HBVDNA陽性患者間隔6個月P基因的擴(kuò)增，所獲得的陽性標(biāo)本共14個(圖l)，同時進(jìn)行6個月后的樣本進(jìn)行第2次PCR擴(kuò)增(圖2)，片段大小為932bp，擴(kuò)增產(chǎn)物通過5%的瓊脂糖電泳，40v電泳40min后，紫外燈下照相。

T1845VZ14A， A181VT1845，T1845’52021， A181VQ2155， A18lVT1845，VZ14AA181T， A1815V214A， SZOZT5239CC3045等變異株的發(fā)生，變異位點集中于181位點，214位點等，見圖1。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]拉米夫定治療中乙型肝炎病毒YMDD野毒株和變異株的變化[J]. 劉傳苗,張欣欣,陸志檬.  肝臟. 2004(02)
[2]慢性乙型肝炎的抗病毒治療和耐藥株監(jiān)測[J]. 蔣棟,魏來.  中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志. 2003(02)
[3]慢性乙型肝炎患者治療前YMDD變異基因的檢測及分析[J]. 葉曉光,王若倫,郭海波.  中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志. 2002(04)



本文編號：3540053