發(fā)布時間：2021-11-24 22:34

　　目的:探討高脂飲食誘導(dǎo)的小鼠非酒精性脂肪肝與腸道菌群的關(guān)系。方法:1、采用C57BL小鼠作為實(shí)驗(yàn)對象,隨機(jī)分為2組:普通飲食組和高脂飲食組。通過高脂飲食干預(yù)12周,構(gòu)建非酒精性脂肪肝（NAFLD）模型,使用新鮮肝臟標(biāo)本進(jìn)行HE和油紅O染色以觀察小鼠肝臟病理損傷和脂質(zhì)積累;2、采用ELISA法檢測小鼠血清脂多糖結(jié)合蛋白（LBP）和胰島素水平,并采用全自動生化儀檢測小鼠血脂及血糖水平;3、采用高通量測序法對腸道糞便細(xì)菌16SrRNA的V4-V5區(qū)進(jìn)行基因測序及生物信息學(xué)分析:從小鼠體內(nèi)取出新鮮糞便標(biāo)本后,提取其總DNA,采用PCR法對16SrDNA進(jìn)行擴(kuò)增和純化并構(gòu)建文庫,采用HiSeq 2500 PE250進(jìn)行測序,對測序結(jié)果進(jìn)行物種及功能注釋,最后對結(jié)果進(jìn)行生物信息學(xué)分析,如聚類分析、多樣性分析及群落結(jié)構(gòu)分析等;4、分析腸道菌群與非酒精性脂肪肝代謝指標(biāo)的相關(guān)性:找出門水平和屬水平中有差異的物種,分別與NAFLD相關(guān)血清代謝指標(biāo)進(jìn)行Spearman相關(guān)分析。結(jié)果:1、與普通飲食組相比,高脂飲食組小鼠的正常肝臟結(jié)構(gòu)被破壞、肝小葉結(jié)構(gòu)紊亂、肝臟炎癥細(xì)胞浸潤并有明顯的脂質(zhì)累積。2、與普通飲食組... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

普通飲食組和高脂飲食組小鼠體重變化

C.高脂組飲食組小鼠肝臟 HE 染色（100X） D.高脂飲食組小鼠肝臟 HE 染色（400X）圖2.1普通飲食組和高脂飲食組小鼠的肝臟病理結(jié)果3.2.2小鼠肝臟油紅染色在飲食干預(yù) 12 周后，取小鼠肝臟冰凍標(biāo)本進(jìn)行油紅 O 染色，并在顯微鏡下觀察小鼠肝臟脂肪沉積情況。如圖 2.2 所示，普通飲食組肝細(xì)胞未被染色，肝臟未發(fā)生脂肪累積。而高脂飲食組小鼠肝細(xì)胞和周圍組織被顯著紅染，肝臟表現(xiàn)為明顯的脂肪累積。A.普通飲食組小鼠肝臟油紅染色（100X） B.普通飲食組小鼠肝臟油紅染色（400X）

C.高脂飲食組小鼠肝臟油紅染色(100X) D.高脂飲食組小鼠肝臟油紅染色(400X)圖2.2普通飲食組和高脂飲食組小鼠肝臟油紅染色結(jié)果3.3小鼠血清LBP及胰島素水平3.3.1小鼠血清LBP水平采用 ELISA 法分別檢測兩組小鼠血清 LBP 濃度，以反映血清 LPS 水平。如圖 3.1 所示，高脂飲食組小鼠的血清 LBP 水平明顯高于普通飲食組（ 438.96 ±51.61 vs 312.09 ± 48.07 ），且兩組間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.0079 ，P<0.01）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Role of non-steroidal anti-inflammatory drugs on intestinal permeability and nonalcoholic fatty liver disease[J]. Erika Utzeri,Paolo Usai.  World Journal of Gastroenterology. 2017(22)
[2]Effects of different diets on intestinal microbiota and nonalcoholic fatty liver disease development[J]. Jian-Ping Liu,Wen-Li Zou,Shui-Jiao Chen,Hong-Yun Wei,Ya-Ni Yin,Yi-You Zou,Fang-Gen Lu.  World Journal of Gastroenterology. 2016(32)
[3]Effects of probiotics on nonalcoholic fatty liver disease:A meta-analysis[J]. Yan-Yan Ma,Lin Li,Chao-Hui Yu,Zhe Shen,Li-Hua Chen,You-Ming Li.  World Journal of Gastroenterology. 2013(40)



本文編號：3516880