研究背景和目的：食管上皮屏障功能是食管粘膜對抗胃食管反流的重要防御機制。胃食管反流可誘導(dǎo)食管上皮屏障功能的損傷,食管粘膜對特定離子以及大分子通透性的增強以及上皮細胞間隙的增寬。因此,理解反流誘導(dǎo)的食管粘膜屏障功能損傷的機制對尋求胃食管反流病的有效干預(yù)措施具有重要的臨床意義。Barrett食管是胃食管反流病的繼發(fā)病變之一,但胃食管反流進展為Barrett食管的分子機制至今還不清楚。本研究的目的1)探討NFκB介導(dǎo)的炎癥在胃食管反流誘導(dǎo)食管粘膜屏障功能損傷中的作用；2)探討胃食管反流病進展為Barrett食管的分子機制。研究方法：建立手術(shù)誘導(dǎo)的胃反流,十二指腸反流和胃十二指腸混合反流的小鼠模型.使用mini-Ussing chamber檢測各反流食管粘膜跨上皮電阻抗值,利用電鏡觀察并比較各型反流食管粘膜上皮間隙的改變。應(yīng)用基因芯片技術(shù)檢測各型反流食管粘膜上皮內(nèi)特異的基因表達譜,再利用生物信息學分析策略（例如GSEA和SAM）篩選出表達上調(diào)或者下調(diào)的轉(zhuǎn)錄因子,激活的經(jīng)典信號傳導(dǎo)通路以及具有相似功能的基因簇,同時也篩選出基因組內(nèi)所有表達上調(diào)或者下調(diào)的基因。采用Real-time PCR,免疫印... 

【文章來源】：中南大學湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：133 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
目錄
英文縮略詞
第一章 胃食管反流通過NFκB介導(dǎo)的炎癥破壞小鼠食管粘膜屏障功能
    1.1 緒論
    1.2 材料和方法
        1.2.1 手術(shù)構(gòu)建胃食管反流小鼠模型
        1.2.2 食管粘膜TEER的檢測
        1.2.3 食管粘膜電鏡觀察
        1.2.4 RNA的抽提
        1.2.5 基因芯片
        1.2.6 Real-time PCR分析
        1.2.7 蛋白的抽提
        1.2.8 免疫印跡
        1.2.9 ELISA
        1.2.10 免疫組織化學染色
        1.2.11 組織化學染色以及炎癥細胞的半定量分析
        1.2.12 NFκB抑制試驗
        1.2.13 統(tǒng)計學方法
    1.3 實驗結(jié)果
        1.3.1 胃食管反流誘導(dǎo)小鼠食管粘膜TEER的下降以及DIS
        1.3.2 胃食管反流食管粘膜特征性基因表達譜
        1.3.3 胃食管反流食管粘膜上皮緊密連接蛋白基因表達
        1.3.4 胃食管反流食管粘膜上皮內(nèi)NFκB以及NFκB下游基因的表達
        1.3.5 胃食管反流食管粘膜炎癥細胞的浸潤以及炎癥趨化因子的表達和釋放
        1.3.6 抑制粘膜內(nèi)NFκB可減弱胃食管反流食管粘膜屏障功能的損傷
        1.3.7 胃食管反流誘導(dǎo)食管粘膜Barrett食管相關(guān)基因的表達
    1.4 實驗討論
        1.4.1 胃食管反流破壞食管粘膜上皮屏障功能以及相關(guān)病理生理機制的探討
        1.4.2 NFκB相關(guān)的炎癥因子誘導(dǎo)反流食管粘膜上皮屏障功能的損傷
        1.4.3 炎癥細胞誘導(dǎo)反流食管粘膜上皮屏障功能的損傷
        1.4.4 NFκB介導(dǎo)的基質(zhì)金屬蛋白酶參與反流食管粘膜上皮屏障功能的損傷
        1.4.5 胃食管反流是誘發(fā)Barrett食管的重要因素
        1.4.6 探討反流食管粘膜屏障功能損傷的機制以及本研究的臨床意義
    1.5 實驗結(jié)論
參考文獻
綜述一
    參考文獻
綜述二
    1. 不同模型動物的食管特點
    2. 誘導(dǎo)胃食管反流的外科手術(shù)術(shù)式
    3. 轉(zhuǎn)基因動物模型和轉(zhuǎn)基因動物聯(lián)合外科手術(shù)模型
    4. 大動物（犬和豬）作為巴雷特食管和食管腺癌的動物模型
    5. 展望
    參考文獻
    附圖
攻讀學位期間主要研究成果
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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