目的:非酒精性脂肪性肝病（Non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）是最常見的慢性肝病之一,與代謝異常尤其是糖尿病密切相關(guān)。本研究目的是探索合并糖代謝異常（Impaired glucose metabolism,IGM）NAFLD 患者的外泌體代謝組學特征。方法:杭州市西溪醫(yī)院肝病門診招募NAFLD成人患者,所有患者均接受生化檢查及普通二維B超檢查,根據(jù)有無糖代謝異常分為NAFLD+IGM組和單純NAFLD組,采集外周血標本;差異超速離心法提取血漿外泌體,驗證后利用超高效液相色譜-四級桿飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（ultra-high-performance liquid chromatography/quadrupole time-of-flight-tandem mass spectrometry,UHPLC-Q-TOF-MS/MS）行血漿和外泌體代謝組學分析,根據(jù)偏最小二乘判別分析（Partial least squares discrimination analysis,PLS-DA）的變量投影重要性（variable importance ... 

【文章來源】：浙江中醫(yī)藥大學浙江省

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．外泌體驗證結(jié)果

圖２－１．ａ．正離子模式下所有樣本的總離子流圖；ｂ．負離子模式下所有樣本的總離子流圖（橫??坐標：保留時間，縱坐標：峰強度）??２多元數(shù)據(jù)處理結(jié)果??２．１主成分分析??ＰＣＡ是一種非監(jiān)督方法，從原始變量之間的相互關(guān)系入手，根據(jù)變異最大化的原則??將其線性變換到幾個獨立的綜合指標上（即主成分），取前２個主成分作圖，將兩組的??差異結(jié)果可視化。??在正、負離子模式下分別獲得的前兩個主要成分ＰＣＩ、ＰＣ２的得分（圖２－２），揭示??造成樣本差異性的主要成分及其貢獻率。如在下圖２－２（ａ）中，造成樣本差異性的第一主??成分為ＰＣ１，貢獻率為１７．６４％，造成樣本差異性的第二主成分為ＰＣ２，貢獻率為１０．４４％，??橫縱坐標刻度表相對距離，無實際意義。圖２－２（ｂ）分析同上。在正、負離子模式下，兩??組間差異累積貢獻率均＜３０％，再結(jié)合ＰＣＡ圖中散點的分布情況（樣品組成越相似，在??ＰＣＡ中距離越近），表明兩組有一定的區(qū)分聚類趨勢，但不顯著。由于代謝組學數(shù)據(jù)具??有高維度、小樣本的特性，同時有噪聲變量的干擾，臨床樣本的ＰＣＡ分類結(jié)果往往不??理想，因此需進一步行有監(jiān)督的判別分析。??ｃｌａｓｓ?ａｐ?？?ｂｐ?ｃｌａｓｓ?ａｐ?ｂｐ??５０?５０－—??Ａ?＼?／?＼??．冒?，?ＩＴ??１?１?１?１?ｒ－＊??－８０?－４０?０?４０?－２５?０?２５?５０?７５??ＰＣ１?（１７．６４％）?ＰＣ１?（１６．０８％）??圖２－２．?ＰＣＡ圖（ａ．正離子模式；ｂ．負離子模式；ＡＰ：?ＮＡＦＬＤ血漿代謝組；ＢＰ：?ＮＡＦＬＤ＋ＩＧＭ??血漿代謝組。ＰＣ１／ＰＣ２?（百分數(shù)）分別

ＰＬＳ－ＤＡ是一種有監(jiān)督的差異判別分析方法，可以最大程度地反映不同組別之間的??差異，該方法運用偏最小二乘回歸建立代謝物表達量和樣品類別之間的關(guān)系模型，實現(xiàn)??對樣品的建模預(yù)測。但該模型可能會出現(xiàn)過擬合現(xiàn)象，因此需對其進行交叉驗證和置換??檢驗。??ＰＬＳ－ＤＡ圖直觀展示模型分類效果（圖２－３），由圖可見兩組樣品分離程度較大，表??明分類效果較顯著。該模型交叉驗證結(jié)果為．？正離子模式下，Ｒ２?＝?０．９３４，?Ｑ２?＝?０．５６３；??負離子模式下，Ｒ２?＝?０．９１１，（３２?＝?０．５７６。１１２和Ｑ２分別代表ＰＬＳ－ＤＡ模型的解釋率和預(yù)測??率。從理論上講，Ｒ２和Ｑ２越接近１，效果越好，模型越穩(wěn)定可靠。在這項研究中，正??負模式下的Ｒ２和Ｑ２值均大于０．５，表明模型解釋和預(yù)測能力較好。??進一步對偏最小二乘分析模型進行置換檢驗，設(shè)置置換次數(shù)２００次，重新隨機賦予??分類結(jié)果建模，由圖２－４可見所有置換值低于原始值，證明所建模型有效，即兩組間的??代謝輪廓差異具有統(tǒng)計學顯著性。??３?ｃｌａｓｓ?ａｐ?ｂｐ?ｂ?ｃｌａｓｓ?ａｐ?ｂｐ??Ｉ：肉纖??－２５?０?２５?５０?－２０?０?２０?４０?６０??ＰＣ１?（１７．３３％）?ＰＣ１?（１５．５６％）??圖２－３．?ＰＬＳ－ＤＡ圖（ａ．正離子模式；ｂ．負離子模式；ＡＰ：ＮＡＦＬＤ組血漿代謝；ＢＰ：?ＮＡＦＬＤ＋ＩＧＭ??組血漿代謝。ＰＣ１／ＰＣ２?（百分數(shù)）分別表示第一／第二主成分對總體差異的貢獻率。橫縱坐標??刻度表相對距離。）??１１??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]非酒精性脂肪性肝病防治指南（2018年更新版）[J]. National Workshop on Fatty Liver and Alcoholic Liver Disease,Chinese Society of Hepatology,Chinese Medical Association;Fatty Liver Expert Committee,Chinese Medical Doctor Association;.  實用肝臟病雜志. 2018(02)
[2]重視非酒精性脂肪性肝病的診斷與治療[J]. 范建高.  臨床肝膽病雜志. 2010(02)
[3]非酒精性脂肪肝的蛋白質(zhì)組學和代謝組學研究[J]. 王蘭,厲有名,賀福初,姜穎.  中華消化雜志. 2008 (10)



本文編號：3495002