本文關(guān)鍵詞：菌群紊亂導(dǎo)致的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在炎癥性腸病腸壁纖維化中的作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：炎癥性腸病(IBD)主要是指一組以腸道炎癥為特征的慢性腸道疾病。臨床上主要分為克羅恩病(CD)和潰瘍性結(jié)腸炎(UC)兩種。隨著腸道炎癥的反復(fù)、持續(xù)發(fā)作,腸道慢性損傷的逐漸加重,腸道也會(huì)逐漸發(fā)生重構(gòu),最終由腸道炎癥形成腸道纖維化。不僅喪失了基本功能,而且容易出現(xiàn)各種臨床伴隨疾病。腸壁纖維化所致的腸腔狹窄是炎癥性腸病病變不可逆和手術(shù)治療的首位病因。有證據(jù)表明,持續(xù)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(ERS)與纖維化相關(guān),是纖維化的可能機(jī)制之一。而且ERS在肺、腎、肝等組織纖維化中都有重要作用。同時(shí)很多研究表明在IBD腸道纖維化過程中,存在著明顯的菌群紊亂,這種菌群紊亂可以導(dǎo)致持續(xù)ERS的增加。因此,我們想探究是否是菌群紊亂帶來的ERS導(dǎo)致了IBD腸纖維化,且在這個(gè)過程中我們通過改善菌群紊亂是否可以改善腸道纖維化過程。為此,我們分別設(shè)計(jì)了以下三部分實(shí)驗(yàn),分別探究在臨床UC患者的結(jié)腸標(biāo)本中,明顯狹窄處ERS的表達(dá)；在TNBS誘導(dǎo)的腸纖維化小鼠模型中,調(diào)節(jié)ERS是否可以改變纖維化；以及在TNBS誘導(dǎo)的腸纖維化小鼠模型中,調(diào)節(jié)菌群,是否可以改善ERS的表達(dá)和腸道纖維化過程。具體三部分如下：第一部分研究臨床潰瘍性結(jié)腸炎非活動(dòng)期患者結(jié)腸狹窄處內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的表達(dá)目的：研究在臨床UC非活動(dòng)期患者結(jié)腸標(biāo)本中,狹窄處內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的表達(dá),探討在ERS在UC結(jié)腸狹窄中的作用。方法：選用臨床UC非活動(dòng)期結(jié)腸標(biāo)本,分別選取其狹窄處與非狹窄處,并與結(jié)腸癌患者正常結(jié)腸標(biāo)本進(jìn)行對比。通過HE染色、Masson染色、免疫組織化學(xué)染色及Western blot來檢測各組黏膜厚度、膠原沉積、上皮標(biāo)記、纖維化標(biāo)記及ERS相關(guān)蛋白的表達(dá)情況。探究ERS在UC患者結(jié)腸狹窄處的作用。結(jié)果：實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)相比結(jié)腸癌患者結(jié)腸癌患者正常結(jié)腸標(biāo)本,UC非狹窄處結(jié)腸,黏膜僅輕度增厚,黏膜結(jié)構(gòu)基本正常,ERS表達(dá)輕度增高。而UC狹窄處結(jié)腸組織黏膜紊亂嚴(yán)重,黏膜增厚明顯,尤其是黏膜下層更為顯著,膠原外沉積更多,纖維化明顯,且ERS表達(dá)明顯增高。結(jié)論：UC患者結(jié)腸狹窄處纖維化明顯增強(qiáng),ERS是UC患者結(jié)腸纖維性狹窄的重要機(jī)制。第二部分在TNBS導(dǎo)致的IBD腸壁纖維化模型中調(diào)節(jié)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激對腸壁纖維化的影響目的：建立TNBS導(dǎo)致的IBD腸壁纖維化模型,并在此模型基礎(chǔ)上探究調(diào)節(jié)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激對腸壁纖維化的影響。方法：在這部分動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中,我們采用了TNBS灌腸來建立IBD慢性腸炎腸纖維化模型。并觀察在加入了ERS保護(hù)劑熊去氧膽酸(TUDCA)后對結(jié)腸纖維化及ERS的影響。分別通過HE染色、Masson三色染色、免疫組織化學(xué)染色及Western blot來檢測各組黏膜厚度、膠原沉積、上皮標(biāo)記、纖維化標(biāo)記及ERS相關(guān)蛋白的表達(dá)情況。驗(yàn)證ERS在TNBS導(dǎo)致的腸纖維化模型中的作用。結(jié)果：實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)相比對照組,單純TNBS造模組小鼠結(jié)腸黏膜明顯增高,尤其以黏膜下層最為顯著；膠原沉積明顯增多,以Ⅲ型膠原為主；上皮表達(dá)減弱,纖維化標(biāo)記明顯；且ERS相關(guān)蛋白表達(dá)明顯增加。而在加入ERS保護(hù)劑TUDCA后,相比單純造模組,小鼠結(jié)腸黏膜變薄,膠原沉積減少,上皮標(biāo)記升高,纖維化標(biāo)記變?nèi)?且ERS相關(guān)蛋白也明顯減弱。結(jié)論：在TNBS導(dǎo)致的IBD腸壁纖維化模型中,ERS保護(hù)劑TUDCA可以減弱TNBS誘導(dǎo)的腸纖維化,ERS是TNBS誘導(dǎo)的腸纖維化的重要機(jī)制。第三部分在TNBS導(dǎo)致的IBD腸纖維化模型中,改善腸道菌群紊亂,對腸道纖維化的影響,且ERS在其中的作用目的：在TNBS誘導(dǎo)的IBD慢性腸炎腸纖維化模型中,通過改善腸道菌群紊亂,觀察對ERS及腸道纖維化的影響。方法：在這部分試驗(yàn)中,我們在TNBS誘導(dǎo)的IBD腸纖維化模型基礎(chǔ)上,通過飲水中加入果膠和丁酸鈉來調(diào)節(jié)菌群,觀察他們對腸道纖維化和ERS的影響。分別通過HE染色、Masson三色染色、免疫組織化學(xué)染色及Westernblot來檢測各組黏膜厚度、膠原沉積、上皮標(biāo)記、纖維化標(biāo)記及ERS相關(guān)蛋白的表達(dá)情況。并通過小鼠糞便進(jìn)行菌群分析來驗(yàn)證各組腸道菌群的變化情況。結(jié)果：實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),相比對照組,單純TNBS造模組小鼠結(jié)腸黏膜明顯增高,尤其以黏膜下層最為顯著；膠原沉積明顯增多,以Ⅲ型膠原為主；上皮表達(dá)減弱,纖維化標(biāo)記明顯；且ERS相關(guān)蛋白表達(dá)明顯增加。而在加入了果膠和丁酸鈉后,相比單純造模組,小鼠結(jié)腸黏膜變薄,膠原沉積減少,上皮標(biāo)記升高,纖維化標(biāo)記變?nèi)?且ERS相關(guān)蛋白也明顯減弱。而且通過腸道菌群分析證實(shí)了在單純TNBS造模組腸道菌群明顯紊亂,菌群多態(tài)性減弱,條件致病菌明顯增多。而在加入果膠和丁酸鈉后,腸道菌群紊亂改善,菌群多態(tài)性增加,條件致病菌減少。結(jié)論：在TNBS導(dǎo)致IBD腸纖維化模型中,果膠和丁酸鈉可以減輕TNBS誘導(dǎo)的菌群紊亂,且可以進(jìn)一步減弱ERS的表達(dá),減輕腸纖維化。結(jié)合前兩部分研究進(jìn)一步驗(yàn)證在IBD中,腸道菌群紊亂導(dǎo)致持續(xù)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激,是IBD腸道纖維化的機(jī)制之一。且改善腸道菌群紊亂,可以有效減輕腸道的持續(xù)ERS,從而減輕腸道纖維化過程。
【關(guān)鍵詞】：腸道菌群 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激 炎癥性腸病 腸纖維化
【學(xué)位授予單位】：南京大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R574.62
【目錄】：

• 中文摘要6-9
• ABSTRACT9-12
• 縮略詞表12-13
• 第一章 緒論13-16
• 第二章 臨床潰瘍性結(jié)腸炎非活動(dòng)期患者結(jié)腸狹窄處內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的表達(dá)16-31
• 一、前言16
• 二、材料與方法16-26
• 1、實(shí)驗(yàn)儀器及實(shí)驗(yàn)試劑16-18
• 2、實(shí)驗(yàn)分組、處理及取材方法18-19
• 3、組織病理學(xué)檢測19-22
• 4、蛋白免疫印跡法Western blot22-26
• 三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果26-29
• 1、UC患者結(jié)腸狹窄處纖維化明顯X椙
  
  本文編號：339800
  suoshi