背景乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus，HBV）是一種嗜肝DNA病毒，其感染仍是世界范圍內(nèi)慢性肝炎、肝硬化、肝癌的主要成因，嚴(yán)重危害人類(lèi)健康[1]，而治療慢性乙型肝炎的首要目標(biāo)是持久抑制病毒的復(fù)制。阿德福韋酯（Adefovir，ADV）是目前被批準(zhǔn)治療慢性乙型肝炎的一種核苷類(lèi)似物藥物，通過(guò)抑制HBV聚合酶（HBV Polymerase，HBV-Pol）的活性來(lái)抑制病毒復(fù)制，但是長(zhǎng)期治療會(huì)發(fā)生耐藥導(dǎo)致治療失敗[2]。HBV聚合酶主要分成四個(gè)結(jié)構(gòu)域：N末端蛋白區(qū)（TP），間隔區(qū)（SD），逆轉(zhuǎn)錄酶區(qū)（Reverse Transcriptase，RT），核糖核酸酶（RNaseH）區(qū)^[3]。該蛋白同時(shí)具有DNA聚合酶和RNaseH酶活性，直接參與了HBV基因組的復(fù)制。HBV繁殖速度快，但其DNA聚合酶缺乏糾錯(cuò)能力，復(fù)制過(guò)程中有大量突變發(fā)生，使得藥物與HBV聚合酶的親和力下降，進(jìn)而導(dǎo)致藥物抑制病毒復(fù)制的作用明顯減弱[4,5]，其中HBV聚合酶RT區(qū)域的rtN236T和rtAl81T/V變異是與阿德福韋耐藥有關(guān)的常見(jiàn)變異位點(diǎn)[6,7]。臨床研究發(fā)現(xiàn)，一些患者在長(zhǎng)期... 

【文章來(lái)源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

-1HBV聚合酶RT區(qū)域PCR擴(kuò)增Fig.2.1-1HBVpolymeraseRTPCRamplification

-2重組質(zhì)粒SUMO-RTWTPCR篩選Fig.2.1-2ColoniesselectionusingPCR

-3HBV聚合酶RT區(qū)域的PCR擴(kuò)增和重組質(zhì)粒的酶切鑒定Fig.2.1-3PCRproductsofHBVRTdomainanddigestionofrecombinantplasmid

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Structural Characteristics and Molecular Mechanism of Hepatitis B Virus Reverse Transcriptase[J]. Hui FENG and Kang-hong HU (State Key Laboratory of Virology, Wuhan Institute of Virology, Chinese Academy of Sciences, Wuhan 430071, China).  Virologica Sinica. 2009(06)
[2]HBV聚合酶研究進(jìn)展[J]. 韓聚強(qiáng),胡大榮,葉棋濃.  肝臟. 2008(03)
[3]第三代反義核酸技術(shù)—肽核酸[J]. 謝勇恩.  川北醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2007(04)
[4]Hepatitis B virus replication[J]. Juergen Beck,Michael Nassal.  World Journal of Gastroenterology. 2007(01)
[5]肽核酸生物傳感器直接檢測(cè)臨床標(biāo)本中提取的病毒基因組DNA[J]. 陳鳴,府偉靈,蔡國(guó)儒,劉明華,張波,蔣天倫,陳慶海,秦廷輝.  中華醫(yī)院感染學(xué)雜志. 2003(07)



本文編號(hào)：3380261