肝細(xì)胞癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）是世界上最常見的惡性腫瘤之一。在肝癌病因?qū)W方面,目前傾向于多因素、多步驟發(fā)生且多個因素間交互作用的觀點。乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus,HBV）感染是肝癌最重要的病因之一,在發(fā)展中國家尤為突出。全世界大約有53%,我國約90%的HCC病例與HBV相關(guān)。近來的研究表明乙肝病毒表面抗原（HBsAg）攜帶者發(fā)生HCC的機率是非感染者的25～37倍。因此,研究HBV的感染和致癌機理無疑有著重要的意義。但因缺乏體外的增殖系統(tǒng)和易獲得的動物模型、細(xì)胞模型,HBV感染肝臟的早期機理研究進(jìn)展較為緩慢,從而在一定程度上影響乙型肝炎及其相關(guān)肝病的研究。本研究嘗試用睪丸介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)移法（TMGT）,構(gòu)建轉(zhuǎn)HBx、ras基因樹鼩和小鼠,為從整體水平研究HBV感染誘發(fā)肝癌作用的機制提供理想的動物模型。另一方面,選用樹鼩作為原代肝細(xì)胞的供體,成功構(gòu)建了HBV感染樹鼩肝細(xì)胞的體外模型,并在此基礎(chǔ)上初步探討了HBx在HBV感染中的作用及抗病毒藥物干擾素-a的作用靶點。第一部分HBx基因的克隆和序列分析及其真核表達(dá)載體的構(gòu)建目的通過HB... 

【文章來源】：廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：165 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

HBx測序峰圖(ChromaS2.3)顯示基因全長465bp3.HBx基因(A、B、C和D野生型)與新克隆的HBx基因進(jìn)化樹分析

文樹的體內(nèi)HBx、ras轉(zhuǎn)基因模型及體外HBV感染模型的研究其中3個克隆被切開，可見54O0bp的質(zhì)粒片段和約490bp(含酶切位Kozak序列)的HBx基因片段，如圖5，說明目的片段已正確插入到載體中，從而構(gòu)建了pcDNA3.1(+)一HBx重組質(zhì)粒。用軟件VectorNTI質(zhì)粒圖，如圖6。Marker

peDNA3.l(+)一HBX質(zhì)粒圖

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3360555