肝臟是機(jī)體代謝的樞紐,承擔(dān)了大部分的合成、分解、轉(zhuǎn)化等代謝過程,其中某些酶系和功能是肝臟所特有的,因此,系統(tǒng)研究肝臟損傷后的代謝組變化非常重要。代謝組學(xué)主要研究細(xì)胞調(diào)節(jié)過程的終端產(chǎn)物,研究結(jié)果能夠定量、定性的反映生物體對基因或環(huán)境變化的復(fù)雜響應(yīng),為了解生命奧秘提供了一個新途徑。本文將液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)和化學(xué)計(jì)量學(xué)相結(jié)合,整合建立了一個代謝組學(xué)的研究平臺,并將該平臺應(yīng)用于研究肝損傷的標(biāo)志物。給Wistar大鼠口服了經(jīng)典的肝毒性化合物四氯化碳,建立肝毒性模型。在給藥前一天和給藥后六天內(nèi),連續(xù)收集了實(shí)驗(yàn)動物的尿液和膽汁。采用具有較廣泛樣品適應(yīng)性的液相色譜作為分離手段,以高靈敏度、高選擇性的質(zhì)譜作為檢測儀器,分析復(fù)雜生物樣品。在大鼠尿液中找出的病理標(biāo)志物表明,四氯化碳減緩了大鼠的能量代謝,引起急性肝、腎損傷。大鼠的膽汁排泄也因肝功能受損而減緩,并發(fā)現(xiàn)膽汁中卵磷脂的含量有所增加。用代謝組學(xué)的研究方法對乙肝病人和正常病人的血清樣品進(jìn)行比對,發(fā)現(xiàn)病人血清中的一些組分例如肌酸苷、蘇氨酸、酪氨酸和鵝脫氧膽酰甘氨酸等會因?yàn)槭艿讲《靖腥径鴿舛壬摺?shí)驗(yàn)同時證實(shí)臨床案例存在很大的個體差異,增加了代謝組學(xué)應(yīng)... 

【文章來源】：天津大學(xué)天津市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：115 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
目錄
縮略語說明
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 代謝組學(xué)簡介
        1.1.1 代謝組學(xué)的概念
        1.1.2 代謝組學(xué)與系統(tǒng)生物學(xué)
    1.2 代謝組學(xué)的研究流程
        1.2.1 樣品的采集和制備
        1.2.2 分析檢測方法
        1.2.3 數(shù)據(jù)處理
        1.2.4 生物標(biāo)志物的解析
    1.3 基于核磁共振的代謝組學(xué)
        1.3.1 核磁共振氫譜
        1.3.2 核磁共振碳譜
        1.3.3 核磁共振譜的輔助技術(shù)
    1.4 基于質(zhì)譜的代謝組學(xué)
        1.4.1 氣相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用
        1.4.2 液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用
        1.4.3 色質(zhì)聯(lián)用技術(shù)鑒定生物標(biāo)志物
    1.5 代謝組學(xué)的應(yīng)用
        1.5.1 病理機(jī)制研究
        1.5.2 臨床診斷
        1.5.3 新藥安全性評價
    1.6 本課題的研究意義和研究內(nèi)容
        1.6.1 本課題的研究意義
        1.6.2 本課題的研究內(nèi)容
第二章 基于液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)的代謝組學(xué)研究平臺
    2.1 XCMS 數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換方法的評價
        2.1.1 XCMS 簡介
        2.1.2 考察XCMS 的靈敏度
    2.2 尋找溴莫普林在大鼠體內(nèi)的代謝產(chǎn)物
        2.2.1 動物實(shí)驗(yàn)
        2.2.2 樣品處理
        2.2.3 液質(zhì)聯(lián)用分析
        2.2.4 數(shù)據(jù)處理
        2.2.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果和討論
        2.2.6 實(shí)驗(yàn)結(jié)論
    2.3 討論
        2.3.1 代謝組學(xué)樣品的處理方法
        2.3.2 液質(zhì)聯(lián)用分析
        2.3.3 代謝組學(xué)數(shù)據(jù)分析
        2.3.4 代謝物的鑒定
第三章 四氯化碳肝毒性模型大鼠尿液中的肝損傷標(biāo)志物
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑和材料
        3.2.2 動物實(shí)驗(yàn)
        3.2.3 尿樣處理
        3.2.4 血清生物化學(xué)
        3.2.5 組織病理學(xué)
        3.2.6 液質(zhì)聯(lián)用分析
        3.2.7 數(shù)據(jù)分析
        3.2.8 內(nèi)源性代謝物的鑒定
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 血清生物化學(xué)和組織檢查
        3.3.2 大鼠尿樣的預(yù)處理
        3.3.3 液質(zhì)聯(lián)用分析
        3.3.4 數(shù)據(jù)處理
        3.3.5 解析尿液中的肝損傷標(biāo)志物
    3.4 討論
        3.4.1 液質(zhì)聯(lián)用方法進(jìn)行代謝組學(xué)研究
        3.4.2 生物標(biāo)志物解析四氯化碳引發(fā)的毒性機(jī)制
        3.4.3 尿液中的生物標(biāo)志物用于毒理研究
第四章 四氯化碳肝毒性模型大鼠膽汁中的肝損傷標(biāo)志物
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)部分
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑和材料
        4.2.2 動物實(shí)驗(yàn)
        4.2.3 膽汁樣品處理
        4.2.4 液質(zhì)聯(lián)用分析
        4.2.5 數(shù)據(jù)分析
        4.2.6 內(nèi)源性代謝物的鑒定
    4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.3.1 膽汁的排泄量
        4.3.2 液質(zhì)聯(lián)用分析
        4.3.3 數(shù)據(jù)處理
        4.3.4 解析膽汁中的肝損傷標(biāo)志物
    4.4 討論
        4.4.1 液質(zhì)聯(lián)用分析
        4.4.2 數(shù)據(jù)處理
        4.4.3 解析膽汁中的肝損傷標(biāo)志物
        4.4.4 膽汁作為組學(xué)研究對象
第五章 乙型肝炎病人血清中的肝損傷標(biāo)志物
    5.1 引言
    5.2 實(shí)驗(yàn)部分
        5.2.1 樣品來源
        5.2.2 樣品處理方法
        5.2.3 液質(zhì)聯(lián)用分析
        5.2.4 數(shù)據(jù)分析
    5.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5.3.1 液質(zhì)聯(lián)用分析
        5.3.2 數(shù)據(jù)分析
        5.3.3 鑒定肝損傷標(biāo)志物
        5.3.4 解析血清中的肝損傷標(biāo)志物
    5.4 討論
        5.4.1 未知代謝物鑒定
        5.4.2 個體差異與臨床診斷
        5.4.3 比較動物模型和人的肝損傷標(biāo)志物
第六章 結(jié)論與展望
    6.1 結(jié)論
    6.2 創(chuàng)新點(diǎn)
    6.3 展望
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
致謝



本文編號：3308274