第一部分:C57BL/6小鼠來(lái)源的脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)與鑒定目的:分離培養(yǎng)C57BL/6小鼠腹股溝脂肪組織中的脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞（adipose-derived stem cells,ADSCs）,并鑒定其生物學(xué)特性。方法:無(wú)菌切取小鼠腹股溝皮下脂肪組織,采用0.1%I型膠原酶進(jìn)行消化后用含10%FBS的低糖DMEM培養(yǎng)基貼壁培養(yǎng)小鼠ADSCs,倒置顯微鏡觀察其細(xì)胞形態(tài);流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)對(duì)其表面標(biāo)記物進(jìn)行鑒定,行成骨及成脂誘導(dǎo)判斷其多向分化潛能。結(jié)果:體外分離培養(yǎng)的小鼠ADSCs具有良好的細(xì)胞形態(tài)、較強(qiáng)的增殖能力,體外具有成脂、成骨分化潛能,表面標(biāo)記CD29、CD44陽(yáng)性,Sca-1高表達(dá),不表達(dá)CD31。結(jié)論:利用該實(shí)驗(yàn)方法,能培養(yǎng)出高純度、具有良好干性的小鼠ADSCs。第二部分:血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C刺激的ADSCs對(duì)小鼠慢性實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎的治療作用及機(jī)制研究目的:研究VEGF-C刺激的ADSCs對(duì)TNBS誘導(dǎo)的慢性結(jié)腸炎的治療作用并探尋其機(jī)制。方法:構(gòu)建C57BL/6小鼠TNBS誘導(dǎo)的慢性結(jié)腸炎模型,隨機(jī)分為四組:空白對(duì)照組（n=5）、TNBS模型組（n=5）、ADSCs干預(yù)組（n... 

【文章來(lái)源】：蘇州大學(xué)江蘇省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：75 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１倒置顯微鏡下各階段ＡＤＳＣｓ形態(tài)

ＶＥＧＦ－Ｃ刺激的脂昉間充質(zhì)干細(xì)胞通過(guò)調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)與淋巴管引流減輕ＴＮＢＳ介導(dǎo)的慢性實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎第一部分??＿＿??圖２ＡＤＳＣＳ多向分化的成脂與成骨誘導(dǎo)。Ａ：成脂誘導(dǎo)后油紅０染色（４〇ｘ）?Ｂ：?ＡＤＳＣｓ成骨??誘導(dǎo)后西素紅染色（４〇ｘ）??３．３流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)ＡＤＳＣｓ的表面標(biāo)記物??采用流式細(xì)胞儀鑒定ＡＤＳＣｓ的表面標(biāo)記分子ＣＤ２９、ＣＤ４４、Ｓｃａ－１表達(dá)。結(jié)果顯??示陽(yáng)性率分別為匚０２９?８６．４％士１．４％、００４４?８２．９％士１．１％和５〇３－１９５．５％±１．３°／〇（見圖３），??而不表達(dá)上皮細(xì)胞標(biāo)記物ＣＤ３１，其陰性率為７７．８％±１．３％，表明培養(yǎng)的ＡＤＳＣｓ純度??較尚。??Ａ???Ｂ??＃?Ｊ??ＦｔＴＣ－Ａ?５ｕｂｓ？?Ｆ１ＴＣ－Ａ?ｓｕｂｓｅｔ??８８．４?８２９??１?Ｊｌ?－ｌ??ＲＴＣ－Ｃ０２９?ＦＩＴＣ－ＣＤ４４??Ｃ?Ｄ??ＡＰＣ－Ａ?ｓｕｂｓｅｔ??ＡＰＣ－ｆｉ．??７７?Ｓ?Ｉ?１??Ｋ?Ｈ?／?ｌ??ＡＰＣ－ＣＫ３１?ＡＰＣ－ＳＣＡ－１??圖３流式細(xì)胞儀檢測(cè)ＡＤＳＣｓ表面蛋白的表達(dá)。Ａ－Ｄ分別為ＣＤ２９、ＣＤ４４、??ＣＤ３１及Ｓｃａ－１的蛋白表達(dá)情況。??１１??

ＶＥＧＦ－Ｃ刺激的脂昉間充質(zhì)干細(xì)胞通過(guò)調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)與淋巴管引流減輕ＴＮＢＳ介導(dǎo)的慢性實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎第一部分??＿＿??圖２ＡＤＳＣＳ多向分化的成脂與成骨誘導(dǎo)。Ａ：成脂誘導(dǎo)后油紅０染色（４〇ｘ）?Ｂ：?ＡＤＳＣｓ成骨??誘導(dǎo)后西素紅染色（４〇ｘ）??３．３流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)ＡＤＳＣｓ的表面標(biāo)記物??采用流式細(xì)胞儀鑒定ＡＤＳＣｓ的表面標(biāo)記分子ＣＤ２９、ＣＤ４４、Ｓｃａ－１表達(dá)。結(jié)果顯??示陽(yáng)性率分別為匚０２９?８６．４％士１．４％、００４４?８２．９％士１．１％和５〇３－１９５．５％±１．３°／〇（見圖３），??而不表達(dá)上皮細(xì)胞標(biāo)記物ＣＤ３１，其陰性率為７７．８％±１．３％，表明培養(yǎng)的ＡＤＳＣｓ純度??較尚。??Ａ???Ｂ??＃?Ｊ??ＦｔＴＣ－Ａ?５ｕｂｓ？?Ｆ１ＴＣ－Ａ?ｓｕｂｓｅｔ??８８．４?８２９??１?Ｊｌ?－ｌ??ＲＴＣ－Ｃ０２９?ＦＩＴＣ－ＣＤ４４??Ｃ?Ｄ??ＡＰＣ－Ａ?ｓｕｂｓｅｔ??ＡＰＣ－ｆｉ．??７７?Ｓ?Ｉ?１??Ｋ?Ｈ?／?ｌ??ＡＰＣ－ＣＫ３１?ＡＰＣ－ＳＣＡ－１??圖３流式細(xì)胞儀檢測(cè)ＡＤＳＣｓ表面蛋白的表達(dá)。Ａ－Ｄ分別為ＣＤ２９、ＣＤ４４、??ＣＤ３１及Ｓｃａ－１的蛋白表達(dá)情況。??１１??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[5]共培養(yǎng)法神經(jīng)細(xì)胞誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)元的分化[J]. 楊乃龍,楊芬,徐麗麗.  中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2008(29)



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