第一部分:C57BL/6小鼠來源的脂肪間充質干細胞的分離、培養(yǎng)與鑒定目的:分離培養(yǎng)C57BL/6小鼠腹股溝脂肪組織中的脂肪間充質干細胞（adipose-derived stem cells,ADSCs）,并鑒定其生物學特性。方法:無菌切取小鼠腹股溝皮下脂肪組織,采用0.1%I型膠原酶進行消化后用含10%FBS的低糖DMEM培養(yǎng)基貼壁培養(yǎng)小鼠ADSCs,倒置顯微鏡觀察其細胞形態(tài);流式細胞術檢測對其表面標記物進行鑒定,行成骨及成脂誘導判斷其多向分化潛能。結果:體外分離培養(yǎng)的小鼠ADSCs具有良好的細胞形態(tài)、較強的增殖能力,體外具有成脂、成骨分化潛能,表面標記CD29、CD44陽性,Sca-1高表達,不表達CD31。結論:利用該實驗方法,能培養(yǎng)出高純度、具有良好干性的小鼠ADSCs。第二部分:血管內皮生長因子C刺激的ADSCs對小鼠慢性實驗性結腸炎的治療作用及機制研究目的:研究VEGF-C刺激的ADSCs對TNBS誘導的慢性結腸炎的治療作用并探尋其機制。方法:構建C57BL/6小鼠TNBS誘導的慢性結腸炎模型,隨機分為四組:空白對照組（n=5）、TNBS模型組（n=5）、ADSCs干預組（n... 

【文章來源】：蘇州大學江蘇省 211工程院校

【文章頁數】：75 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１倒置顯微鏡下各階段ＡＤＳＣｓ形態(tài)

ＶＥＧＦ－Ｃ刺激的脂昉間充質干細胞通過調節(jié)炎癥反應與淋巴管引流減輕ＴＮＢＳ介導的慢性實驗性結腸炎第一部分??＿＿??圖２ＡＤＳＣＳ多向分化的成脂與成骨誘導。Ａ：成脂誘導后油紅０染色（４〇ｘ）?Ｂ：?ＡＤＳＣｓ成骨??誘導后西素紅染色（４〇ｘ）??３．３流式細胞術檢測ＡＤＳＣｓ的表面標記物??采用流式細胞儀鑒定ＡＤＳＣｓ的表面標記分子ＣＤ２９、ＣＤ４４、Ｓｃａ－１表達。結果顯??示陽性率分別為匚０２９?８６．４％士１．４％、００４４?８２．９％士１．１％和５〇３－１９５．５％±１．３°／〇（見圖３），??而不表達上皮細胞標記物ＣＤ３１，其陰性率為７７．８％±１．３％，表明培養(yǎng)的ＡＤＳＣｓ純度??較尚。??Ａ???Ｂ??＃?Ｊ??ＦｔＴＣ－Ａ?５ｕｂｓ？?Ｆ１ＴＣ－Ａ?ｓｕｂｓｅｔ??８８．４?８２９??１?Ｊｌ?－ｌ??ＲＴＣ－Ｃ０２９?ＦＩＴＣ－ＣＤ４４??Ｃ?Ｄ??ＡＰＣ－Ａ?ｓｕｂｓｅｔ??ＡＰＣ－ｆｉ．??７７?Ｓ?Ｉ?１??Ｋ?Ｈ?／?ｌ??ＡＰＣ－ＣＫ３１?ＡＰＣ－ＳＣＡ－１??圖３流式細胞儀檢測ＡＤＳＣｓ表面蛋白的表達。Ａ－Ｄ分別為ＣＤ２９、ＣＤ４４、??ＣＤ３１及Ｓｃａ－１的蛋白表達情況。??１１??

ＶＥＧＦ－Ｃ刺激的脂昉間充質干細胞通過調節(jié)炎癥反應與淋巴管引流減輕ＴＮＢＳ介導的慢性實驗性結腸炎第一部分??＿＿??圖２ＡＤＳＣＳ多向分化的成脂與成骨誘導。Ａ：成脂誘導后油紅０染色（４〇ｘ）?Ｂ：?ＡＤＳＣｓ成骨??誘導后西素紅染色（４〇ｘ）??３．３流式細胞術檢測ＡＤＳＣｓ的表面標記物??采用流式細胞儀鑒定ＡＤＳＣｓ的表面標記分子ＣＤ２９、ＣＤ４４、Ｓｃａ－１表達。結果顯??示陽性率分別為匚０２９?８６．４％士１．４％、００４４?８２．９％士１．１％和５〇３－１９５．５％±１．３°／〇（見圖３），??而不表達上皮細胞標記物ＣＤ３１，其陰性率為７７．８％±１．３％，表明培養(yǎng)的ＡＤＳＣｓ純度??較尚。??Ａ???Ｂ??＃?Ｊ??ＦｔＴＣ－Ａ?５ｕｂｓ？?Ｆ１ＴＣ－Ａ?ｓｕｂｓｅｔ??８８．４?８２９??１?Ｊｌ?－ｌ??ＲＴＣ－Ｃ０２９?ＦＩＴＣ－ＣＤ４４??Ｃ?Ｄ??ＡＰＣ－Ａ?ｓｕｂｓｅｔ??ＡＰＣ－ｆｉ．??７７?Ｓ?Ｉ?１??Ｋ?Ｈ?／?ｌ??ＡＰＣ－ＣＫ３１?ＡＰＣ－ＳＣＡ－１??圖３流式細胞儀檢測ＡＤＳＣｓ表面蛋白的表達。Ａ－Ｄ分別為ＣＤ２９、ＣＤ４４、??ＣＤ３１及Ｓｃａ－１的蛋白表達情況。??１１??

【參考文獻】：
期刊論文
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[5]共培養(yǎng)法神經細胞誘導骨髓間充質干細胞向神經元的分化[J]. 楊乃龍,楊芬,徐麗麗.  中國組織工程研究與臨床康復. 2008(29)



本文編號：3282281