目的:既往研究表明S100鈣結(jié)合蛋白A16（S100 calcium binding protein A16,S100A16）參與調(diào)節(jié)脂肪細(xì)胞脂代謝,而S100A16與肝臟脂代謝的關(guān)系尚不清楚,本研究旨在探討S100A16在非酒精性脂肪性肝�。∟onalcoholic fatty liver disease,NAFLD）中的作用。方法:選用5周齡S100a16轉(zhuǎn)基因小鼠模型（S100a16 transgenic）、S100a16基因敲低小鼠模型（S100a16 knockdown）、Wildtype C57BL/6小鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,三種基因型小鼠各20只,再隨機(jī)分配到正常脂肪飲食組（Normal fat diet,NFD）和高脂飲食組（High fat diet,HFD）,共6組:Wildtype小鼠正常脂肪飲食組（n=10）;Wildtype小鼠高脂飲食組（n=10）;S100a16 transgenic正常脂肪飲食組（n=10）;S100a16 transgenic高脂飲食組（n=10）;S100a16 knockdown小鼠正常脂肪飲食組（n=10）;S100a16 knockdo... 

【文章來源】：南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
前言
材料和方法
    1.實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 藥品和試劑
        1.2 主要試劑及配方
        1.3 實(shí)驗(yàn)耗材和儀器
        1.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及飼養(yǎng)條件
        1.5 細(xì)胞株及培養(yǎng)條件
    2.實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 高脂和正常脂肪喂養(yǎng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
        2.2 小鼠脂代謝及肝功能指標(biāo)測(cè)定
        2.3 小鼠肝臟病理染色
        2.4 小鼠肝臟甘油三酯含量檢測(cè)
        2.5 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)常規(guī)操作
        2.6 細(xì)胞質(zhì)粒轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)
        2.7 細(xì)胞脂肪酸培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)
        2.8 細(xì)胞甘油三酯含量檢測(cè)
        2.9 細(xì)胞油紅O染色
        2.10 STO-609 抑制細(xì)胞CAMKK2 活性實(shí)驗(yàn)
        2.11 免疫沉淀、免疫共沉淀及質(zhì)譜分析
        2.12 免疫熒光實(shí)驗(yàn)
        2.13 Quantity Real-time PCR實(shí)驗(yàn)
        2.14 提取總蛋白質(zhì)并采用BCA法檢測(cè)蛋白濃度
        2.15 Western Blot實(shí)驗(yàn)
    3.統(tǒng)計(jì)分析
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    1.S100a16 transgenic 、knockdown基因型小鼠驗(yàn)證
    2.小鼠S100a16 transgenic加重HFD誘導(dǎo)的脂肪肝,而S100a16 knockdown則起緩解作用
    3.S100a16 transgenic小鼠血脂和轉(zhuǎn)氨酶均明顯增高,而S100a16 knockdown小鼠則降低
    4.S100a16 質(zhì)粒成功轉(zhuǎn)染LO2 細(xì)胞
    5.S100A16 與CaM相互作用
    6.S100A16 通過CaM / CAMKK2 / AMPK通路調(diào)節(jié)小鼠肝臟脂肪生成
    7.S100A16 促進(jìn)LO2 細(xì)胞甘油三酯合成
    8.S100A16 通過CaM / CAMKK2 / AMPK通路調(diào)節(jié)LO2 細(xì)胞脂代謝
    9.STO-609 阻斷S100A16 對(duì)CaM/CAMKK2/AMPK通路作用
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述 S100A16 及其相關(guān)性疾病
    參考文獻(xiàn)
附錄:中英文縮略詞對(duì)照表
攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]S100A16基因敲除小鼠模型的構(gòu)建與鑒定[J]. 童佩,奚玲,楊潔,劉云.  南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2017(05)
[2]11β-HSD1與S100A16共同調(diào)節(jié)3T3-L1脂肪細(xì)胞的分化[J]. 李璐,辛婧,薛一,杜新麗,張日華,劉云.  中華內(nèi)分泌代謝雜志. 2014 (09)
[3]S100A16轉(zhuǎn)基因小鼠的構(gòu)建與鑒定[J]. 杜新麗,薛一,張媛媛,張日華,劉云.  南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2012(03)

碩士論文
[1]鈣結(jié)合蛋白S100A16基因敲除小鼠的構(gòu)建以及S100A16對(duì)高脂飲食誘導(dǎo)下肥胖小鼠糖脂代謝的影響及其機(jī)制研究[D]. 童佩.南京醫(yī)科大學(xué) 2017
[2]S100A16與11β-HSD1共同調(diào)節(jié)糖脂代謝的研究[D]. 奚玲.南京醫(yī)科大學(xué) 2016



本文編號(hào)：3270186