目的通過建立大鼠肝纖維化及IL-10干預模型,研究肝纖維化大鼠肝組織中IL-10的表達和變化,探討外源性IL-10對肝細胞的作用;通過外源性IL-10對原代肝細胞進行培養(yǎng)干預,了解IL-10對肝細胞增殖、凋亡的影響,并分析其相關生長因子的表達變化。方法動物實驗部分:建立大鼠肝纖維化和IL-10干預模型,抽提肝臟總RNA,Real-Time PCR法檢測模型組與正常組IL-10表達的差異,原位Tunnel法檢測IL-10對肝細胞凋亡的影響;免疫組織化學法、RT-PCR檢測肝組織Bax/Bcl-2蛋白及mRNA的表達。細胞實驗部分:通過膠原蛋白酶原位灌流法分離大鼠原代肝細胞, RT-PCR法檢測肝內不同細胞標志基因,如:ALB、CK19、AFP、CYP8B1、CD68、CD31等基因的表達情況,并進行細胞純度鑒定、凍存研究、復蘇培養(yǎng)、細胞活性鑒定等;RT-PCR、Western-blot檢測原代肝細胞IL-10/IL-10R1 mRNA和蛋白的表達情況;原代肝細胞分三組培養(yǎng):正常組（N組,普通培養(yǎng)基）、對照組（C組,含胰島素培養(yǎng)基）和IL-10干預組（I組,含IL-10、胰島素的培養(yǎng)基）,... 

【文章來源】：福建醫(yī)科大學福建省

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

組IL-10mRNA、β-actin電泳圖

組IL-10mRNA、β-actin電泳圖

（0.72±0.25）%，M 組見多量陽性細胞散在（18.87±3.58）%，S 組較 N 組陽細胞數(shù)增多，兩者差異顯著（P<0.01）；T 組陽性率（4.77±2.15）%，較 R 組（±1.85）%，陽性細胞數(shù)顯著減少（19.23%，P<0.01），（圖 4）。

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3224496