目的：肝臟疾病是世界性的常見疾病,現(xiàn)有的治療方法卻不理想,基因治療將可能是治療最為有效方法。然而,目前肝病的基因治療進(jìn)展緩慢,其中最主要的原因是缺乏高效的、肝細(xì)胞特異性的載體。因此,研制出高效的嗜肝性基因治療載體,是肝病基因治療取得實(shí)質(zhì)進(jìn)展的關(guān)鍵。pre-S1蛋白含有HBV和肝細(xì)胞膜結(jié)合的位點(diǎn),該位點(diǎn)位于第21-47位氨基酸,是重要的免疫介導(dǎo)部位,肝細(xì)胞、B細(xì)胞和T細(xì)胞均可表達(dá)針對(duì)這一肽段的受體,變異的病毒只要這一區(qū)段完好就有傳染性。本研究采用基因重組技術(shù),將HBV表面蛋白中嗜肝性成分的基因編碼作無免疫原性修改后,構(gòu)建出攜改良型HBVpre-S1基因表達(dá)載體,為下一步嗜肝性重組腺相關(guān)病毒微球的制備提供實(shí)驗(yàn)研究基礎(chǔ)。方法：以我國(guó)HBV流行株adr的DNA為模板,PCR法提取并擴(kuò)增pre-S1的編碼基因HBVpre-S1,然后將提取的HBVpre-S1基因用定點(diǎn)突變延伸的方法,通過兩個(gè)獨(dú)立的PCR擴(kuò)增反應(yīng),將預(yù)設(shè)的突變構(gòu)建在重疊區(qū)域,同時(shí)存在于兩個(gè)擴(kuò)增片段中,混合得到的兩個(gè)重疊DNA片段,用兩條分別與兩個(gè)原始片段末端結(jié)合的引物進(jìn)行第二次PCR擴(kuò)增,將硬性較強(qiáng)的脯氨酸用柔性較大的丙氨酸替換,... 

【文章來源】：西南醫(yī)科大學(xué)四川省

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
1 攜改良型HBVpre-S1基因表達(dá)載體的構(gòu)建及相關(guān)研究
    1.1 中文摘要
    1.2 英文摘要
    1.3 前言
    1.4 材料與方法
    1.5 結(jié)果
    1.6 討論
    1.7 結(jié)論
    1.8 參考文獻(xiàn)
    1.9 英漢縮略詞對(duì)照表
2 致謝
3 乙肝病毒pre-S1基因的研究現(xiàn)狀(綜述)
    參考文獻(xiàn)



本文編號(hào)：3176611