肝纖維化（Hepatic Fibrosis）是指肝臟在各種慢性炎癥或損傷的持續(xù)刺激下發(fā)生的肝臟內(nèi)纖維結(jié)締組織異常增生。目前認(rèn)為肝纖維化的形成機(jī)制是各種致病因子造成肝細(xì)胞損傷,引起肝枯否細(xì)胞（Kupffer Cells,KCs）、血小板、肝竇狀內(nèi)皮細(xì)胞和肝細(xì)胞等激活,分泌多種細(xì)胞因子（Cytokine）與化學(xué)遞質(zhì)共同作用于肝星狀細(xì)胞（Hepatic Stellate Cells,HSCs）,使其激活和增殖并最終分化成肌成纖維細(xì)胞。巨噬細(xì)胞在慢性肝臟損傷病理中發(fā)揮著核心作用,研究表明不同巨噬細(xì)胞亞型已經(jīng)被證實(shí)在肝纖維化的進(jìn)展中發(fā)揮著關(guān)鍵性的調(diào)節(jié)因素,在肝臟損傷的進(jìn)展和恢復(fù)過(guò)程中發(fā)揮著不同的功能,巨噬細(xì)胞或者KCs分泌的細(xì)胞因子是肝纖維化進(jìn)展的重要調(diào)節(jié)因子。另外,小鼠外周單核巨噬細(xì)胞遷移浸潤(rùn)是肝臟炎癥和纖維化進(jìn)展的關(guān)鍵因素。電壓依賴(lài)性鉀離子通道亞型1.3（Kv1.3）作為電壓依賴(lài)性鉀離子通道家族的成員,參與纖維化等多種疾病的發(fā)生和發(fā)展,且與調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞功能的關(guān)系密切。Kv1.3表達(dá)于多種組織和細(xì)胞中,尤其在免疫細(xì)胞中高表達(dá)。它最初是在T淋巴細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的,是調(diào)節(jié)T細(xì)胞活性和分化的重要因素。目前... 

【文章來(lái)源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁(yè)數(shù)】：109 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中英文縮寫(xiě)詞對(duì)照
中文摘要
Abstract
1.前言
2.材料及方法
    2.1 藥品與試劑
        2.1.1 抗體
        2.1.2 主要試劑和藥品
    2.2 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞株
    2.3 儀器與設(shè)備
    2.4 實(shí)時(shí)熒光定量PCR引物序列
    2.5 圖像及數(shù)據(jù)處理分析軟件
    2.6 實(shí)驗(yàn)方法
        2.6.1 小鼠肝纖維化模型
        2.6.2 小鼠血清和組織收集
        2.6.3 小鼠肝臟組織蠟片制作
        2.6.4 蘇木精-伊紅(H&E)染色
        2.6.5 小鼠肝組織Masson染色
        2.6.6 天狼猩紅(Sirius red)染色
        2.6.7 免疫組化染色
        2.6.8 ELISA測(cè)定細(xì)胞因子的含量
        2.6.9 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
        2.6.10 Western Blot實(shí)驗(yàn)
        2.6.11 RNA-seq
        2.6.12 小RNA干擾和質(zhì)粒轉(zhuǎn)染
        2.6.13 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)
        2.6.14 Transwell實(shí)驗(yàn)
        2.6.15 正常大鼠腹腔巨噬細(xì)胞電生理特征記錄
        2.6.16 Kv1.3過(guò)表達(dá)及沉默
        2.6.17 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3.結(jié)果
    3.1 全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)記錄正常大鼠巨噬細(xì)胞電生理特征
        3.1.1 正常大鼠腹腔巨噬細(xì)胞電生理特征和動(dòng)力學(xué)參數(shù)
        3.1.2 鉀通道阻斷劑對(duì)正常大鼠腹腔巨噬細(xì)胞電流的影響
        3.1.3 鉀通道選擇性阻斷劑MgTX對(duì)正常大鼠腹腔巨噬細(xì)胞電流的影響
    3.2 Mg TX減輕CCL4 誘導(dǎo)的肝纖維化
        3.2.1 Kv1.3在CCL4誘導(dǎo)的肝纖維化小鼠肝臟的表達(dá)
        3.2.2 MgTX減輕肝纖維化小鼠的病理特征
    3.3 MgTX對(duì)肝纖維化小鼠保護(hù)作用
        3.3.1 Mg TX降低肝纖維化組織中α-SMA和膠原I的表達(dá)
        3.3.2 Mg TX減輕CCL4 引起的肝纖維化相關(guān)蛋白的表達(dá)
        3.3.3 MgTX影響肝纖維化小鼠血清中細(xì)胞因子的含量
    3.4 MgTX對(duì)肝纖維化小鼠的作用機(jī)制
        3.4.1 Mg TX對(duì) RAW264.7 細(xì)胞株中相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
        3.4.2 MgTX對(duì)巨噬細(xì)胞表型的影響
        3.4.3 Mg TX通過(guò)STAT1/STAT6 信號(hào)通路調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞株表型
    3.5 MgTX影響巨噬細(xì)胞的遷移及機(jī)制
        3.5.1 MgTX抑制巨噬細(xì)胞的遷移
        3.5.2 Mg TX靶向降低巨噬細(xì)胞中δ-catenin表達(dá)
        3.5.3 Mg TX降低δ-catenin表達(dá)并具有劑量依賴(lài)性
        3.5.4 δ-catenin表達(dá)變化影響巨噬細(xì)胞的遷移
        3.5.5 δ-catenin調(diào)節(jié)遷移相關(guān)信號(hào)蛋白R(shí)ho A的表達(dá)
4.討論
5.結(jié)論
6.參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
綜述 Kv1.3 的生物學(xué)特性及在肝臟疾病中的作用進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)



本文編號(hào)：3174004