基于肝腸軸功能改變對(duì)非酒精性脂肪肝發(fā)病與治療的研究
發(fā)布時(shí)間:2021-05-07 18:07
【目的】高脂飲食誘導(dǎo)大鼠建立非酒精性脂肪肝模型,動(dòng)態(tài)觀察建模過(guò)程中腸道菌群改變,比較抑制菌群后對(duì)大鼠脂肪肝形成的影響;對(duì)已成功建模的NAFLD大鼠給予抗生素或低熱量常脂飲食干預(yù),觀察大鼠腸道菌群改變及脂肪肝程度的差異。【方法】實(shí)驗(yàn)一:選取SPF級(jí)72只SD大鼠隨機(jī)分為高脂飲食組(FD組)、抗生素預(yù)處理組(KY組)及ND組。對(duì)照組予以標(biāo)準(zhǔn)飼料飲食,正常飲水;FD組大鼠給予高脂飼料飲食,正常飲水;KY組則給予高脂飲食,飲用抗生素溶液。動(dòng)態(tài)觀察各組大鼠行為學(xué)指標(biāo)改變,于1w,2w,3w,4w周末隨機(jī)處死各組中6只,留取回腸末端糞便樣本,應(yīng)用16s rRNA熒光定量PCR方法分析大鼠腸道主要菌群的變化,并取大鼠肝臟組織進(jìn)行HE染色,對(duì)其組織病理學(xué)改變進(jìn)行評(píng)分,酶比法測(cè)量血清及肝臟組織甘油三酯(TG),膽固醇(TC),高密度脂蛋白(HDL),低密度脂蛋白(LDL)含量,及血清AST,ALT值,免疫組化聯(lián)合RT-PCR測(cè)定肝臟FIAF的表達(dá)水平。實(shí)驗(yàn)二選取96只SPF級(jí)SD大鼠,經(jīng)高脂飲食誘導(dǎo)成功建立NAFLD模型,排除體重指數(shù)低于正常對(duì)照組,分為模型組(NAFLD)、抗生素后處理組(KH)、限食...
【文章來(lái)源】:廣東藥科大學(xué)廣東省
【文章頁(yè)數(shù)】:71 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
前言
第一章 主要材料與方法
實(shí)驗(yàn)一 高脂飲食誘導(dǎo)非酒精性脂肪肝模型建立
1 試驗(yàn)材料
1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
1.2 動(dòng)物飼料及抗生素溶液配方
1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)條件
1.4 主要試劑
1.5 主要儀器
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 動(dòng)物分組
2.2 實(shí)驗(yàn)步驟
2.3 實(shí)驗(yàn)相關(guān)指標(biāo)觀察及樣本采集
2.3.1 行為學(xué)評(píng)估
2.3.2 標(biāo)本的采集與處理
2.3.3 各指標(biāo)測(cè)定與方法
實(shí)驗(yàn)二 不同干預(yù)手段通過(guò)調(diào)節(jié)腸道菌群可顯著改善NAFLD
1 試驗(yàn)材料:基本同第一部分
2 試驗(yàn)方法
第二章 結(jié)果
實(shí)驗(yàn)一
1 一般特征
2.各組大鼠體重變化趨勢(shì)
3.各組別活動(dòng)比較
4 各組生化指標(biāo)檢測(cè)
4.1 各組大鼠于不同時(shí)期血脂水平的比較
4.2 各組大鼠血清肝酶水平比較
4.3 各組大鼠糖代謝指標(biāo)水平比較
4.4 肝臟脂代謝
4.4.1 肝濕重及肝指數(shù)
4.4.2 肝臟勻漿 TG、TC 測(cè)定
5 肝臟組織病理學(xué)變化:
6 肝臟組織 FIAF 基因表達(dá)水平
6.1 FIAF 免疫組化(immunohistochemistry)檢測(cè)結(jié)果
6.2 、肝臟 FIAF 基因 RT-PCR 檢測(cè)
7 回盲部菌群分析
實(shí)驗(yàn)二
1 一般特征
2、干預(yù)期各組大鼠體重變化趨勢(shì)
3、干預(yù)期各組別固定時(shí)段活動(dòng)次數(shù)比較
4. 干預(yù)期各組生化指標(biāo)檢測(cè)
4.1 各組大鼠于不同時(shí)期血脂水平的比較
4.2 干預(yù)期各組大鼠血清 AST 水平比較
4.3 不同干預(yù)手段大鼠糖代謝指標(biāo)水平變化
4.4 、肝臟脂代謝水平
4.4.1 肝濕重及肝指數(shù)變化
4.4.2 肝臟勻漿 TG、TC 測(cè)定
5 肝臟組織病理變化
6、不同干預(yù)方法肝臟組織 FIAF 表達(dá)變化
6.1 FIAF 免疫組化(immunohistochemistry)檢測(cè)結(jié)果
6.2 FIAF 的 RT-PCR 檢測(cè)結(jié)果
7. 回盲部菌群分析
第三章 結(jié)論
第四章 討論
參考文獻(xiàn)
致謝
文獻(xiàn)綜述
參考文獻(xiàn)
附錄·發(fā)表文章
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]益生菌對(duì)腸道菌群的影響——以Lactobacillus casei Zhang研究為例[J]. 張家超,郭壯,孫志宏,陳衛(wèi),張和平. 中國(guó)食品學(xué)報(bào). 2011(09)
[2]非酒精性脂肪肝大鼠結(jié)腸Cajal間質(zhì)細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的改變[J]. 胡先平,余保平,胡柳丹. 胃腸病學(xué). 2011(11)
[3]腸道菌群與肥胖的關(guān)聯(lián)性研究現(xiàn)狀[J]. 劉洋,李敏,徐佩茹. 臨床兒科雜志. 2011(05)
[4]Small intestinal bacteria overgrowth decreases small intestinalmotility in the NASH rats[J]. Wan-Chun Wu, Wei Zhao, Sheng Li, Department of Gastro-enterology, Yijishan Hospital, Wuhu 241000, Anhui Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2008(02)
[5]非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝臟內(nèi)毒素受體表達(dá)上調(diào)[J]. 徐正婕,范建高,王興鵬,王國(guó)良. 中華肝臟病雜志. 2006(01)
[6]非酒精性脂肪性肝炎患者血清內(nèi)毒素和腫瘤壞死因子-α的檢測(cè)及意義(附92例報(bào)告)[J]. 陳寶昌,霍曉輝. 河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2003(05)
[7]大鼠非酒精性脂肪性肝炎形成過(guò)程中血清內(nèi)毒素含量的變化[J]. 范建高,徐正婕,王國(guó)良,丁曉東,田麗艷,鄭曉英. 中華肝臟病雜志. 2003(02)
[8]枯否氏細(xì)胞在大鼠非酒精性脂肪性肝炎發(fā)病中的作用[J]. 范建高,鐘嵐,王國(guó)良,巫協(xié)寧,李明升,靖大道,張丕利. 中華肝臟病雜志. 2001(01)
[9]內(nèi)毒素體外誘導(dǎo)大鼠肝細(xì)胞凋亡[J]. 梁秀彬,喬中東,尹鐳,趙嘉惠,韓德五. 中華肝臟病雜志. 1999(02)
本文編號(hào):3173838
【文章來(lái)源】:廣東藥科大學(xué)廣東省
【文章頁(yè)數(shù)】:71 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
前言
第一章 主要材料與方法
實(shí)驗(yàn)一 高脂飲食誘導(dǎo)非酒精性脂肪肝模型建立
1 試驗(yàn)材料
1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
1.2 動(dòng)物飼料及抗生素溶液配方
1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)條件
1.4 主要試劑
1.5 主要儀器
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 動(dòng)物分組
2.2 實(shí)驗(yàn)步驟
2.3 實(shí)驗(yàn)相關(guān)指標(biāo)觀察及樣本采集
2.3.1 行為學(xué)評(píng)估
2.3.2 標(biāo)本的采集與處理
2.3.3 各指標(biāo)測(cè)定與方法
實(shí)驗(yàn)二 不同干預(yù)手段通過(guò)調(diào)節(jié)腸道菌群可顯著改善NAFLD
1 試驗(yàn)材料:基本同第一部分
2 試驗(yàn)方法
第二章 結(jié)果
實(shí)驗(yàn)一
1 一般特征
2.各組大鼠體重變化趨勢(shì)
3.各組別活動(dòng)比較
4 各組生化指標(biāo)檢測(cè)
4.1 各組大鼠于不同時(shí)期血脂水平的比較
4.2 各組大鼠血清肝酶水平比較
4.3 各組大鼠糖代謝指標(biāo)水平比較
4.4 肝臟脂代謝
4.4.1 肝濕重及肝指數(shù)
4.4.2 肝臟勻漿 TG、TC 測(cè)定
5 肝臟組織病理學(xué)變化:
6 肝臟組織 FIAF 基因表達(dá)水平
6.1 FIAF 免疫組化(immunohistochemistry)檢測(cè)結(jié)果
6.2 、肝臟 FIAF 基因 RT-PCR 檢測(cè)
7 回盲部菌群分析
實(shí)驗(yàn)二
1 一般特征
2、干預(yù)期各組大鼠體重變化趨勢(shì)
3、干預(yù)期各組別固定時(shí)段活動(dòng)次數(shù)比較
4. 干預(yù)期各組生化指標(biāo)檢測(cè)
4.1 各組大鼠于不同時(shí)期血脂水平的比較
4.2 干預(yù)期各組大鼠血清 AST 水平比較
4.3 不同干預(yù)手段大鼠糖代謝指標(biāo)水平變化
4.4 、肝臟脂代謝水平
4.4.1 肝濕重及肝指數(shù)變化
4.4.2 肝臟勻漿 TG、TC 測(cè)定
5 肝臟組織病理變化
6、不同干預(yù)方法肝臟組織 FIAF 表達(dá)變化
6.1 FIAF 免疫組化(immunohistochemistry)檢測(cè)結(jié)果
6.2 FIAF 的 RT-PCR 檢測(cè)結(jié)果
7. 回盲部菌群分析
第三章 結(jié)論
第四章 討論
參考文獻(xiàn)
致謝
文獻(xiàn)綜述
參考文獻(xiàn)
附錄·發(fā)表文章
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]益生菌對(duì)腸道菌群的影響——以Lactobacillus casei Zhang研究為例[J]. 張家超,郭壯,孫志宏,陳衛(wèi),張和平. 中國(guó)食品學(xué)報(bào). 2011(09)
[2]非酒精性脂肪肝大鼠結(jié)腸Cajal間質(zhì)細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的改變[J]. 胡先平,余保平,胡柳丹. 胃腸病學(xué). 2011(11)
[3]腸道菌群與肥胖的關(guān)聯(lián)性研究現(xiàn)狀[J]. 劉洋,李敏,徐佩茹. 臨床兒科雜志. 2011(05)
[4]Small intestinal bacteria overgrowth decreases small intestinalmotility in the NASH rats[J]. Wan-Chun Wu, Wei Zhao, Sheng Li, Department of Gastro-enterology, Yijishan Hospital, Wuhu 241000, Anhui Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2008(02)
[5]非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝臟內(nèi)毒素受體表達(dá)上調(diào)[J]. 徐正婕,范建高,王興鵬,王國(guó)良. 中華肝臟病雜志. 2006(01)
[6]非酒精性脂肪性肝炎患者血清內(nèi)毒素和腫瘤壞死因子-α的檢測(cè)及意義(附92例報(bào)告)[J]. 陳寶昌,霍曉輝. 河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2003(05)
[7]大鼠非酒精性脂肪性肝炎形成過(guò)程中血清內(nèi)毒素含量的變化[J]. 范建高,徐正婕,王國(guó)良,丁曉東,田麗艷,鄭曉英. 中華肝臟病雜志. 2003(02)
[8]枯否氏細(xì)胞在大鼠非酒精性脂肪性肝炎發(fā)病中的作用[J]. 范建高,鐘嵐,王國(guó)良,巫協(xié)寧,李明升,靖大道,張丕利. 中華肝臟病雜志. 2001(01)
[9]內(nèi)毒素體外誘導(dǎo)大鼠肝細(xì)胞凋亡[J]. 梁秀彬,喬中東,尹鐳,趙嘉惠,韓德五. 中華肝臟病雜志. 1999(02)
本文編號(hào):3173838
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