我國有9300萬慢性乙型肝炎病毒（hepatitis B virus, HBV）感染人群,慢性HBV感染可引起慢性乙型肝炎、肝硬化、肝衰竭和肝細胞癌,我國每年死于HBV感染相關(guān)疾病的患者約35萬人。抗HBV治療是慢性乙型肝炎治療及阻斷其向肝硬化、肝衰竭和肝細胞癌發(fā)展的重要手段,核苷（酸）類似物（nucleos（t）ide analogs, NAs）是抗HBV治療的主要藥物,但隨用藥時間的延長,病毒的耐藥問題已成為臨床抗HBV治療的棘手問題。1998年上市的拉米夫定（lamviudine,LAM）在我國有長達13年的臨床抗HBV治療史,超過120萬慢性乙型肝炎患者曾經(jīng)應(yīng)用LAM進行抗病毒治療,由于該藥服用方便、安全,治療費用相對低等優(yōu)點,目前仍有大量患者在服用該藥。HBV多聚酶缺乏校對活性,因此在病毒復(fù)制過程中容易產(chǎn)生錯配,產(chǎn)生大量序列多樣性的病毒株,形成病毒準種。在藥物選擇壓力下,對藥物適應(yīng)性強的病毒變異株可演變?yōu)閮?yōu)勢株,引起病毒耐藥。NAs的作用靶位在HBV多聚酶的逆轉(zhuǎn)錄酶（reverse transcriptase, RT）區(qū),抑制病毒的復(fù)制。引起病毒耐藥的基因變異分為原發(fā)耐藥變異... 

【文章來源】：桂林醫(yī)學(xué)院廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
符號說明
前言
1 材料與方法
    1.1 研究對象
    1.2 主要試劑
    1.3 主要儀器
    1.4 HBV DNA提取
    1.5 HBV RT全基因組巢式PCR擴增方法
    1.6 瓊脂糖凝膠電泳檢測PCR擴增結(jié)果
    1.7 HBV DNA的克隆、鑒定及測序分析
    1.8 定點突變改建pTriEx-1.1倍HBV重組質(zhì)粒
    1.9 五種變異克隆株上RT區(qū)與改建成功的pTriEx-1.1-HBV(C)上的RT區(qū)置換克隆及鑒定
    1.10 重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HepG2細胞及加藥培養(yǎng)
    1.11 變異病毒株的復(fù)制力測定及對藥物敏感性實驗
2 結(jié)果
    2.1 PCR擴增目的樣品L107 HBV RT區(qū),TA克隆及其基因型分析
    2.2 改建的pTriEX-HBV(C)-1.1載體酶切鑒定與測序鑒定
    2.3 HBV突變型與野生型的RT區(qū)與pTriEX-HBV-1.1倍載體上的RT進行置換
    2.4 變異病毒復(fù)制力水平與表型耐藥特點的鑒定
3 討論
4 結(jié)論
參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3173561