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大鼠肝纖維化組織差異MicroRNA的篩選及其與纖維化相關(guān)性分析

發(fā)布時間:2021-04-21 23:59
  在肝組織存在纖維化甚至肝硬化的病理改變基礎(chǔ)上,各種致病因子的打擊更容易造成嚴(yán)重的肝功能衰竭。終末期肝功能衰竭,臨床治療效果差,給人民健康及醫(yī)療財政帶來了嚴(yán)峻的考驗。眾多研究表明肝纖維化形成機制復(fù)雜,但具有可逆性。近年來研究發(fā)現(xiàn)MicroRNA在調(diào)控肝纖維化形成過程中發(fā)揮著重要的作用,有研究表明促肝纖維化發(fā)展的MicroRNA,其抑制劑能有效的逆轉(zhuǎn)肝纖維化。因此有關(guān)肝纖維化的MicroRNA研究可能為臨床治療肝纖維化帶來新的突破。第一部分構(gòu)建大鼠免疫性肝纖維化模型目的:明確是否成功構(gòu)建大鼠免疫性肝纖維化模型。方法:將26只雄性Wistar大鼠隨機分為兩組(A、B),A組10只,B組16只。A組為正常對照組,生理鹽水腹腔注射(0.5ml/只,2次/周)連續(xù)12周;B組為肝纖維化模型組,其中隨機選取3只為B1組,腹腔注射豬血清0.5ml/只/次,2次/周,共4周;繼續(xù)隨機抽選3只為B2組,腹腔注射豬血清0.5ml/只/次,2次/周,共8周;余下10只為B3組,腹腔注射豬血清0.5ml/只/次,2次/周,共12周。B1、B2組實驗動物分別在第4周末及第8周末處死,留取肝組織進行HE染色、Mas... 

【文章來源】:中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:54 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
中英文縮略語表
前言
第一部分 構(gòu)建大鼠免疫性肝纖維化模型
    1.1 引言
    1.2 材料
        1.2.1 研究對象
        1.2.2 主要試劑
        1.2.3 主要儀器設(shè)備
        1.2.4 病理染色試劑的配制
    1.3 方法
        1.3.1 實驗動物分組及處理
        1.3.2 標(biāo)本采取
        1.3.3 病理學(xué)圖片制作
        1.3.4 染色結(jié)果分析方法
        1.3.5 統(tǒng)計學(xué)方法
    1.4 結(jié)果
        1.4.1 大鼠一般情況
        1.4.2 HE及MASSON染色結(jié)果分析
        1.4.3 兩組肝纖維化分級及膠原面積百分比的比較
    1.5 討論
    1.6 結(jié)論
第二部分 分析大鼠肝纖維化組織與正常肝組織中MICRORNA的表達差異
    2.1 引言
    2.2 材料
        2.2.1 研究對象
        2.2.2 主要試劑
        2.2.3 主要儀器
    2.3 方法
        2.3.1 RNA的提取
        2.3.2 RNA的純度分析
        2.3.3 MicroRNA表達差異的檢測
        2.3.4 qPCR驗證各差異MicroRNA在兩樣本間的表達
    2.4 結(jié)果
        2.4.1 兩組樣本中所獲得的MicroRNA數(shù)目
        2.4.2 兩組樣本中存在表達差異的MicroRNA
    2.5 討論
    2.6 結(jié)論
第三部分 研究MicroRNA-138與肝纖維化細(xì)胞因子表達的相關(guān)性
    3.1 引言
    3.2 材料
        3.2.1 研究對象
        3.2.2 主要試劑
        3.2.3 主要儀器設(shè)備
    3.3 方法
        3.3.1 提取RNA
        3.3.2 RNA的純度分析
        3.3.3 MicroRNA-138表達水平檢測
        3.3.4 各細(xì)胞因子mRNA檢測
        3.3.5 qPCR所得數(shù)據(jù)結(jié)果分析
        3.3.6 統(tǒng)計學(xué)方法
    3.4 結(jié)果
        3.4.1 MicroRNA-138及各mRNA的qPCR結(jié)果
        3.4.2 MicroRNA-138及各mRNA表達水平及其相關(guān)系數(shù)
    3.5 討論
    3.6 結(jié)論
參考文獻
綜述
    參考文獻
致謝


【參考文獻】:
期刊論文
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[7]視黃醇脂對慢性酒精性肝病患者肝臟纖維化的抑制作用[J]. 劉中宏,鄭長青,李春明.  世界華人消化雜志. 2006(02)
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本文編號:3152750

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