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丙型肝炎患者抗-F流行率及F蛋白對細胞(抑)癌基因的調(diào)節(jié)作用

發(fā)布時間:2021-04-12 01:33
  丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)屬于黃病毒科丙型肝炎病毒屬(Flayiviridae hepacivirus),為顆粒狀單正鏈RNA病毒。HCVHCV可以導致急性、慢性肝炎和肝纖維化,部分患者可發(fā)展為肝硬化甚至肝細胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)。HCV基因組全長約9600個核苷酸,結(jié)構(gòu)為:5′非編碼區(qū)(5′UTR)—結(jié)構(gòu)蛋白(核心蛋白C—包膜蛋白E1、E2)—非結(jié)構(gòu)蛋白(P7—NS2—NS3—NS4—NS5)—3′非編碼區(qū)(3′ UTR)。HCV基因組僅含有一個開放讀碼框(open reading frame,ORF),編碼大約3010個氨基酸的多蛋白前體,前體蛋白在翻譯同時或翻譯后被宿主細胞及病毒自身編碼的蛋白酶水解為C~NS5b的10種結(jié)構(gòu)和非結(jié)構(gòu)蛋白。HCV F蛋白是C基因+1移位后所形成新讀框(alternative reading frame,ARF,C基因密碼子第2位堿基為新讀框密碼子第1位堿基)編碼的基因產(chǎn)物,作為新近鑒定出的HCV基因組編碼產(chǎn)物,目前對F蛋白的生物學性狀研究尚處在起步階段。本研究利用大腸桿菌表達... 

【文章來源】:中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學上海市 211工程院校

【文章頁數(shù)】:77 頁

【學位級別】:博士

【部分圖文】:

丙型肝炎患者抗-F流行率及F蛋白對細胞(抑)癌基因的調(diào)節(jié)作用


Hcv基因組結(jié)構(gòu)摘自文獻〔8]

基因,本性,蛋白


圖2HCvC基因三種開放讀碼框摘“端[24]F19.2ThreeoPenreadingfra帕5intheHVCeore一encodingregsineaehofthethreereadingfrmaesofthePlusstrandintheeoofthreeHCVinfeetiouselonesaredepietedasfilledreetangles.Fsinthemainreadingframe:Bindieatesthatthe+1frame(relF)alsohasaeonservedORF,whiehrangesinsizefrom160mainoe1dsintheseinfeetiouselones:Cdemonstratesthatthe+2/一1rrousstoPeodonsindieatingthatstoPeodonsarenotforbiddeninenome.StoPeodonsaredesignatedX.NueleotidePositionsfromenbyArabienumb盯5.的特性本性狀:F蛋白在細胞內(nèi)的半衰期短,約8一10分鐘,2個主要

蛋白純化,洗脫


工TPG誘導h3可以獲得高表達的重組蛋白(F蛋白與硫氧化還原蛋白融合蛋白,分子量26kD左右)。超聲裂菌上清液經(jīng)過Ni一NTA樹脂進行親和層析,純化后的F蛋白電泳結(jié)果見圖3。圖3「蛋白純化后505一pAGE圖F193SDS一PAGEofFproteinsafterNi一NTAehromatograPhyM、蛋白marker1、洗脫0一IOmin時收集2、洗脫10一20min時收集3、洗脫20~30min時收集4、洗脫30~40min時收集

【參考文獻】:
期刊論文
[1]酵母雙雜交技術(shù)篩選HCV F蛋白結(jié)合蛋白基因[J]. 黃燕萍,成軍,王琳,楊倩,楊瑗,白桂芹,劉敏,張樹林.  世界華人消化雜志. 2004(07)
[2]病毒性肝炎防治方案 中華醫(yī)學會傳染病與寄生蟲病學分會、肝病學分會聯(lián)合修訂[J].   肝臟. 2000(04)



本文編號:3132343

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