目的:探討腫瘤壞死因子配體1A（TL1A）通過調(diào)控白細胞介素17（IL-17）和干擾素γ（IFN-γ）促進慢性實驗性結(jié)腸炎相關(guān)腸纖維化的發(fā)生。方法:建立葡聚糖硫酸鈉（DSS）誘導(dǎo)的慢性實驗性結(jié)腸炎相關(guān)野生型及TL1A（L-Tg）轉(zhuǎn)基因型腸纖維化模型,通過疾病活動指數(shù)（DAI）評分、HE染色及髓過氧化物酶（MPO）含量評估結(jié)腸炎癥程度,馬松染色和天狼星紅染色評估腸纖維化程度,流式細胞術(shù)檢測脾和淋巴結(jié)單個核細胞中CD4⁺IFN-γ⁺和CD4⁺IL-17⁺細胞的比例,ELISA測定上述細胞IL-17和IFN-γ的分泌水平。結(jié)果:與野生型小鼠相比,轉(zhuǎn)基因小鼠的體重下降更明顯,DAI評分、病理學(xué)評分和結(jié)腸組織MPO含量均顯著增高,且馬松染色和天狼星紅染色提示纖維化程度加重;流式細胞術(shù)檢測脾臟和淋巴結(jié)單個核細胞中的CD4⁺IFN-γ⁺T細胞和CD4⁺IL-17⁺T細胞的比例也明顯升高;ELISA測定脾、淋巴結(jié)及腸黏膜固有層單... 

【文章來源】：中國病理生理雜志. 2020,36(06)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

流式細胞術(shù)檢測脾臟和腸系膜淋巴結(jié)的單個核淋巴細胞中CD4+IFN-γ+和CD4+IL-17+細胞的百分比

TL1A是新近發(fā)現(xiàn)的一種腫瘤壞死因子家族成員，是IBD的易感基因。TL1A通過與受體DR3相結(jié)合，刺激T淋巴細胞的激活，促進Th1和Th17等細胞的活化與效應(yīng)功能，參與腸道炎癥反應(yīng)[9-10]。在對IBD患者研究中發(fā)現(xiàn)，結(jié)腸LPMC的TL1A表達升高，且與炎癥的嚴重程度呈正相關(guān)[11]。有學(xué)者通過用抗TL1A抗體干預(yù)后，發(fā)現(xiàn)其在緩解腸道炎癥的同時減輕了纖維化程度，提示TL1A在結(jié)腸炎癥反應(yīng)中發(fā)揮了促炎促纖維化作用，且可能與抑制IFBs增殖與活化，減少膠原合成的同時增加膠原分解有關(guān)[12-13]。本研究發(fā)現(xiàn)，飲用DSS后，與野生型小鼠相比，轉(zhuǎn)基因小鼠DAI和病理評分進一步升高，證明TL1A過表達促進了慢性實驗性結(jié)腸炎小鼠的腸道炎癥反應(yīng)。通過天狼星紅染色觀察DSS誘導(dǎo)的小鼠結(jié)腸炎中腸道膠原纖維的改變，發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因小鼠與野生型小鼠飲用DSS水后，與control組相比，結(jié)腸不僅僅出現(xiàn)了炎癥的改變，在黏膜及黏膜下層出現(xiàn)膠原蛋白的沉積，馬松染色、天狼星紅染色提示膠原染色的面積明顯增多，而且，轉(zhuǎn)基因小鼠病變程度更重。這表明TL1A在促進結(jié)腸發(fā)生炎癥的同時，也會促進膠原的合成與過度沉積，進而在腸纖維化的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用。目前，研究表明，TL1A作為調(diào)控Th細胞的關(guān)鍵因子，可促進CD4+T細胞分化為Th1細胞和Th17細胞，分泌大量的促炎因子IFN-γ和IL-17，參與IBD的發(fā)生。在T細胞轉(zhuǎn)移及DSS誘導(dǎo)的慢性結(jié)腸炎小鼠模型中發(fā)現(xiàn)，TL1A可通過上調(diào)腸相關(guān)淋巴樣組織中CD4+T細胞的IFN-γ和IL-17表達，增強Th1和Th17細胞的效應(yīng)功能，促進腸黏膜炎癥和纖維化發(fā)生[14-15]，研究證實，TL1A能誘導(dǎo)CD患者的腸黏膜固有層CD4+T細胞分化成為Th17細胞，IL-17分泌增加加重腸道炎癥反應(yīng)的發(fā)生；同時也可促進IFN-γ產(chǎn)生，使Th1介導(dǎo)的免疫反應(yīng)增強[16]。研究發(fā)現(xiàn)纖維性CD患者的腸活檢標(biāo)本IL-17的表達升高，并且在狹窄性CD患者中IL-17能刺激肌成纖維細胞產(chǎn)生更多的膠原[17]。因此，我們推測TL1A通過調(diào)控IL-17和IFN-γ促進慢性實驗性結(jié)腸炎相關(guān)腸纖維化的發(fā)生，參與腸纖維化的發(fā)生。

目前，研究表明，TL1A作為調(diào)控Th細胞的關(guān)鍵因子，可促進CD4+T細胞分化為Th1細胞和Th17細胞，分泌大量的促炎因子IFN-γ和IL-17，參與IBD的發(fā)生。在T細胞轉(zhuǎn)移及DSS誘導(dǎo)的慢性結(jié)腸炎小鼠模型中發(fā)現(xiàn)，TL1A可通過上調(diào)腸相關(guān)淋巴樣組織中CD4+T細胞的IFN-γ和IL-17表達，增強Th1和Th17細胞的效應(yīng)功能，促進腸黏膜炎癥和纖維化發(fā)生[14-15]，研究證實，TL1A能誘導(dǎo)CD患者的腸黏膜固有層CD4+T細胞分化成為Th17細胞，IL-17分泌增加加重腸道炎癥反應(yīng)的發(fā)生；同時也可促進IFN-γ產(chǎn)生，使Th1介導(dǎo)的免疫反應(yīng)增強[16]。研究發(fā)現(xiàn)纖維性CD患者的腸活檢標(biāo)本IL-17的表達升高，并且在狹窄性CD患者中IL-17能刺激肌成纖維細胞產(chǎn)生更多的膠原[17]。因此，我們推測TL1A通過調(diào)控IL-17和IFN-γ促進慢性實驗性結(jié)腸炎相關(guān)腸纖維化的發(fā)生，參與腸纖維化的發(fā)生。本研究通過檢測Th1和Th17細胞的百分比發(fā)現(xiàn)，與DSS/WT組小鼠相比，DSS/Tg組脾臟、MLN中CD4+IFN-γ+細胞和CD4+IL-17+細胞的百分比均明顯升高，同時IFN-γ和IL-17的分泌水平也明顯升高，表明TL1A通過促進Th1和Th17細胞的分化，進而分泌IFN-γ和IL-17增加，參與慢性實驗性結(jié)腸炎相關(guān)腸纖維化的發(fā)生。與此同時，我們通過免疫熒光法、流式細胞術(shù)及ELSIA，亦證實了在DSS組中轉(zhuǎn)基因小鼠與野生型小鼠相比，TL1A促進了IFN-γ和IL-17的分泌。這表明TL1A通過上調(diào)IL-17和IFN-γ的表達，促進了慢性實驗性結(jié)腸炎相關(guān)腸纖維化的發(fā)生發(fā)展。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]潰瘍性結(jié)腸炎患者腸道菌群的變化及其與IL-23/IL-17軸的關(guān)系[J]. 馬旭園,代志峰,王慧超,楊靜楠,唐向陽,康玉華,丁春生,李玉霞,楊瑞林,林旭紅.  中國病理生理雜志. 2018(05)
[2]美沙拉嗪對DSS誘導(dǎo)小鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型Th1、Th17及Treg細胞亞群的影響[J]. 祝斌,張寒仙,曾今誠,安博然,徐軍發(fā),舒建昌.  中國病理生理雜志. 2014(12)
[3]腸肌成纖維細胞與IBD相關(guān)腸纖維化[J]. 宋佳,張曉嵐.  中國病理生理雜志. 2014(09)



本文編號：3126153