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HBx蛋白對NLRP3炎性小體的激活及機(jī)制研究

發(fā)布時間:2021-04-04 07:04
  目的:乙型肝炎病毒(HBV)感染后容易發(fā)生慢性化,乙型肝炎慢性化是導(dǎo)致肝纖維化、肝硬化,甚至肝細(xì)胞癌(HCC)的主要原因,近年來研究發(fā)現(xiàn),HBV X基因編碼的X蛋白(HBx)和NLRP3炎性小體在HBV相關(guān)肝病的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮巨大的作用。了解HBx蛋白及其截短體對NLRP3炎性小體活性的影響并初步探討其作用機(jī)制,以期闡明HBV感染后慢性化的主要發(fā)病機(jī)制。方法:利用HBx及其羧基端截短體真核表達(dá)質(zhì)粒pEGFP-N1-X、pEGFP-N1-X1-127和pEGFP-N1-X1-101,瞬時轉(zhuǎn)染人肝癌細(xì)胞株HepG2,Western blot法檢測各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞內(nèi)HBx蛋白的表達(dá)水平。利用LPS與內(nèi)源性危險信號ATP共同刺激未轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞為陽性對照,Western blot法檢測各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞內(nèi)NLRP3蛋白的表達(dá)水平;ELISA法檢測各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞上清液中IL-1β和IL-18的合成和分泌;流式細(xì)胞儀法檢測各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞內(nèi)ROS的表達(dá)水平。結(jié)果:在轉(zhuǎn)染后的HepG2細(xì)胞中,Western blot法能檢測到全長HBx蛋白及其羧基端截短體HBx1-127、HBx1-101蛋白的表達(dá),但截短體組... 

【文章來源】:重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】:53 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
英漢縮略語名詞對照
摘要
ABSTRACT
前言
    參考文獻(xiàn)
第一部分 HBx蛋白對NLRP3炎性小體活性的影響
    1 材料與方法
    2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3 討論
第二部分 HBx蛋白通過促進(jìn)肝細(xì)胞內(nèi)ROS的表達(dá)水平激活NLRP3炎性小體
    1 材料與方法
    2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)位論文


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]慢性乙型肝炎防治指南(2015年版)[J]. 王貴強(qiáng),王福生,成軍,任紅,莊輝,孫劍,李杰,李蘭娟,孟慶華,趙景民,段鐘平,侯金林,賈繼東,唐紅,盛吉芳,彭劼,魯鳳民,謝青,魏來.  中國肝臟病雜志(電子版). 2015(03)
[2]NLRP3炎性小體激活調(diào)控機(jī)制研究新進(jìn)展[J]. 王位,馬遠(yuǎn)方,韓根成.  國際免疫學(xué)雜志. 2015 (04)
[3]NLRP3炎癥小體在肝臟疾病發(fā)病中的作用研究進(jìn)展[J]. 王曉彤,韓濤.  實(shí)用肝臟病雜志. 2014(05)
[4]Hepatitis B virus,HBx mutants and their role in hepatocellular carcinoma[J]. Ashraf Ali,Hany Abdel-Hafiz,Mohd Suhail,Amany Al-Mars,Mohammad Khalid Zakaria,Kaneez Fatima,Sultan Ahmad,Esam Azhar,Adeel Chaudhary,Ishtiaq Qadri.  World Journal of Gastroenterology. 2014(30)
[5]接頭蛋白WAVS促進(jìn)NLRP3線粒體定位以及炎癥小體的激活[J]. 羅雨虹.  生理科學(xué)進(jìn)展. 2013(06)
[6]NLRP1和NLRP3炎性體的研究進(jìn)展[J]. 原孟,尚麗新.  中華臨床醫(yī)師雜志(電子版). 2013(23)

碩士論文
[1]HBV通過激活NLRP3炎性體促進(jìn)IL-1β產(chǎn)生的作用及機(jī)制研究[D]. 王蓉.山東大學(xué) 2013



本文編號:3117953

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