目的:探討硫化氫（hydrogen sulfide,H2S）對(duì)肝纖維化大鼠肝細(xì)胞增殖、凋亡的調(diào)節(jié)作用以及對(duì)P-p38絲裂原活化蛋白激酶（p38 mitogen-activated protein kinase,p38MAPK）蛋白的表達(dá)的影響。方法:①CCl4復(fù)合因素法制備肝纖維化大鼠模型,胰酶兩步灌流法提取肝纖維化大鼠肝細(xì)胞,臺(tái)盼藍(lán)染色檢測(cè)細(xì)胞活性,細(xì)胞活性>90%,每只肝纖維化大鼠細(xì)胞產(chǎn)量>107,可繼續(xù)后續(xù)實(shí)驗(yàn);②MTT法檢測(cè)肝纖維化大鼠肝細(xì)胞增殖:將新提取的肝細(xì)胞按2×104個(gè)/孔接種于96孔板,當(dāng)細(xì)胞出現(xiàn)大片島狀連接時(shí),用無(wú)血清WME培養(yǎng)基同步化處理12h,分對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組,實(shí)驗(yàn)組按照加藥濃度梯度分組:H2S組將Na HS（H2S供體）按照25、50、75、100、200μmol/L濃度梯度給藥,SB組分別按照12.5、25、50、100、200μmol/L濃度梯度給藥,每組各設(shè)6個(gè)復(fù)孔。在5%CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)48h后終止實(shí)驗(yàn),每孔加入5g/L的MTT 20μL,培養(yǎng)箱中繼續(xù)反應(yīng)4h,吸出培養(yǎng)基,每孔加入150μL DMSO,震蕩混勻10min。利用酶標(biāo)儀于... 

【文章來(lái)源】：石河子大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū) 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：44 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
英漢縮略詞表
前言
一.肝纖維化大鼠肝細(xì)胞分離和原代培養(yǎng)的簡(jiǎn)易方法
    1.實(shí)驗(yàn)材料
    2.實(shí)驗(yàn)方法
二.硫化氫通過(guò)p38MAPK信號(hào)通路對(duì)肝纖維化大鼠肝細(xì)胞增殖、凋亡的影響
    1.實(shí)驗(yàn)材料
    2.實(shí)驗(yàn)方法
三、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介
導(dǎo)師評(píng)閱表


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]大鼠原代肝細(xì)胞、星狀細(xì)胞、枯否細(xì)胞和肝竇內(nèi)皮細(xì)胞的同步分離與培養(yǎng)[J]. 李洋,蔡雙明,張莉莉,李旭.  南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2014(04)
[2]氣體分子信號(hào)硫化氫和缺血再灌注損傷[J]. 馮磊,李文志.  疑難病雜志. 2014(03)
[3]原代小鼠肝臟細(xì)胞的高效分離純化與培養(yǎng)[J]. 張鈺,付亮,魯超,鎖濤,宋陸軍.  現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2014(06)
[4]肺癌條件培養(yǎng)液對(duì)人臍血來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞增殖及其磷酸化p38MAPK表達(dá)的影響[J]. 袁哲,王哲,王秋實(shí).  腫瘤. 2014(02)
[5]SB203580對(duì)肝纖維化大鼠肝臟Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白表達(dá)的影響[J]. 楊新疆,齊翠花,鄭勇,曹玉文,李睿,宋麗秀,趙強(qiáng),陳衛(wèi)剛.  世界華人消化雜志. 2014(03)
[6]延遲給予外源性硫化氫加劇脂多糖引起的大鼠肝細(xì)胞損傷[J]. 王艷莎,季英磊,吳林琳,劉夷嫦,谷振勇.  南通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2014(01)
[7]一種SD大鼠肝細(xì)胞原代培養(yǎng)的改良方法[J]. 王力,劉輝.  齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2014(01)
[8]一種簡(jiǎn)化的分離與培養(yǎng)小鼠原代肝細(xì)胞的方法[J]. 張丁丁,辛永寧,羅兵,姜曼,劉昊剛,宣世英.  青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2014(01)
[9]硫化氫在SB203580影響肝星狀細(xì)胞增殖、凋亡中的作用[J]. 徐霞,李睿,任嬙,劉芳,宋麗秀,鄭勇,陳衛(wèi)剛.  天津醫(yī)藥. 2013(11)
[10]肝臟原位注射新生大鼠肝細(xì)胞構(gòu)建的工程化肝組織對(duì)大鼠肝纖維化的影響[J]. 周海洋,鄭愛(ài)民,黃蓉蓉,戴大江,張海宏,曹厚軍.  空軍醫(yī)學(xué)雜志. 2013(03)

博士論文
[1]硫化氫后處理對(duì)大鼠肝缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[D]. 杜津.天津醫(yī)科大學(xué) 2012



本文編號(hào)：3111651