目的:探討硫化氫（hydrogen sulfide,H2S）對肝纖維化大鼠肝細(xì)胞增殖、凋亡的調(diào)節(jié)作用以及對P-p38絲裂原活化蛋白激酶（p38 mitogen-activated protein kinase,p38MAPK）蛋白的表達的影響。方法:①CCl4復(fù)合因素法制備肝纖維化大鼠模型,胰酶兩步灌流法提取肝纖維化大鼠肝細(xì)胞,臺盼藍染色檢測細(xì)胞活性,細(xì)胞活性>90%,每只肝纖維化大鼠細(xì)胞產(chǎn)量>107,可繼續(xù)后續(xù)實驗;②MTT法檢測肝纖維化大鼠肝細(xì)胞增殖:將新提取的肝細(xì)胞按2×104個/孔接種于96孔板,當(dāng)細(xì)胞出現(xiàn)大片島狀連接時,用無血清WME培養(yǎng)基同步化處理12h,分對照組與實驗組,實驗組按照加藥濃度梯度分組:H2S組將Na HS（H2S供體）按照25、50、75、100、200μmol/L濃度梯度給藥,SB組分別按照12.5、25、50、100、200μmol/L濃度梯度給藥,每組各設(shè)6個復(fù)孔。在5%CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)48h后終止實驗,每孔加入5g/L的MTT 20μL,培養(yǎng)箱中繼續(xù)反應(yīng)4h,吸出培養(yǎng)基,每孔加入150μL DMSO,震蕩混勻10min。利用酶標(biāo)儀于... 

【文章來源】：石河子大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】：44 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
英漢縮略詞表
前言
一.肝纖維化大鼠肝細(xì)胞分離和原代培養(yǎng)的簡易方法
    1.實驗材料
    2.實驗方法
二.硫化氫通過p38MAPK信號通路對肝纖維化大鼠肝細(xì)胞增殖、凋亡的影響
    1.實驗材料
    2.實驗方法
三、統(tǒng)計學(xué)處理
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
綜述
    參考文獻
致謝
作者簡介
導(dǎo)師評閱表


【參考文獻】：
期刊論文
[1]大鼠原代肝細(xì)胞、星狀細(xì)胞、枯否細(xì)胞和肝竇內(nèi)皮細(xì)胞的同步分離與培養(yǎng)[J]. 李洋,蔡雙明,張莉莉,李旭.  南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2014(04)
[2]氣體分子信號硫化氫和缺血再灌注損傷[J]. 馮磊,李文志.  疑難病雜志. 2014(03)
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[10]肝臟原位注射新生大鼠肝細(xì)胞構(gòu)建的工程化肝組織對大鼠肝纖維化的影響[J]. 周海洋,鄭愛民,黃蓉蓉,戴大江,張海宏,曹厚軍.  空軍醫(yī)學(xué)雜志. 2013(03)

博士論文
[1]硫化氫后處理對大鼠肝缺血再灌注損傷的保護作用[D]. 杜津.天津醫(yī)科大學(xué) 2012



本文編號：3111651