目的:探討NALP3炎性小體在非酒精性脂肪性肝炎（non-alcoholic steatohepatitis,NASH）的炎癥發(fā)生發(fā)展中的可能作用。方法:選擇THP-1構(gòu)建體外巨噬細(xì)胞模型,用不同濃度的棕櫚酸干預(yù)24 h;用不同濃度的N-乙酰半胱氨酸（N-acetylcysteine,NAC）預(yù)處理細(xì)胞后加入高濃度的棕櫚酸孵育24 h。分別用活性氧（reactive oxygen species,ROS）指示劑結(jié)合流式細(xì)胞儀檢測(cè)THP-1中ROS的變化;ELISA檢測(cè)細(xì)胞上清液中IL-1β的濃度;免疫熒光技術(shù)檢測(cè)NALP3,caspase-1蛋白的表達(dá);熒光定量PCR檢測(cè)NALP3蛋白復(fù)合體各組分（NALP3,ASC,caspase-1）mRNA的表達(dá)水平。結(jié)果:與空白組相比,各棕櫚酸組細(xì)胞內(nèi)ROS增加,NALP3和caspase-1蛋白表達(dá)及其分泌IL-1β水平均增加（P<0.05）,并隨棕櫚酸濃度增加而增強(qiáng);NAC預(yù)處理后,與單純棕櫚酸組相比,各NAC組THP-1產(chǎn)生ROS水平均下降,同時(shí)NALP3和caspase-1蛋白表達(dá)水平,NALP3復(fù)合體各組分mRNA水平及其分泌I... 

【文章來(lái)源】：中南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2014,39(08)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.2 分組
    1.3 ELISA測(cè)定IL-1β
    1.4 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)ROS
    1.5免疫熒光法檢測(cè)THP-1內(nèi)NALP3, caspase-1蛋白的表達(dá)
    1.6 熒光定量PCR檢測(cè)NALP3蛋白復(fù)合體各組分m RNA表達(dá)
    1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 PA對(duì)THP-1內(nèi)ROS, IL-1β的影響
    2.2 NAC預(yù)處理對(duì)PA刺激THP-1產(chǎn)生ROS, IL-1β的影響
    2.3 NAC預(yù)處理對(duì)PA孵育刺激的THP-1細(xì)胞NALP3炎性復(fù)合體各組分m RNA表達(dá)水平的影響
    2.4 THP-1細(xì)胞內(nèi)NALP3, caspase-1蛋白的變化
        2.4.1 不同濃度PA對(duì)THP-1細(xì)胞內(nèi)NALP3, caspase-1蛋白表達(dá)的影響
        2.4.2 不同濃度NAC預(yù)處理對(duì)PA刺激的THP-1巨噬細(xì)胞NALP3, caspase-1蛋白表達(dá)的影響
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]NALP3炎性體在小鼠非酒精性脂肪性肝炎發(fā)病中的作用[J]. 方文莉,施敏,魏玨,王霆,王玉剛.  肝臟. 2012(05)
[2]Roles of liver innate immune cells in nonalcoholic fatty liver disease[J]. Yu-Tao Zhan, Department of Gastroenterology and Hepatology, Beijing Tongren Hospital, Capital Medical University, Beijing 100730, China Wei An, Department of Cell Biology, Capital Medical University, Beijing 100069, China.  World Journal of Gastroenterology. 2010(37)
[3]枯否氏細(xì)胞在大鼠非酒精性脂肪性肝炎發(fā)病中的作用[J]. 范建高,鐘嵐,王國(guó)良,巫協(xié)寧,李明升,靖大道,張丕利.  中華肝臟病雜志. 2001(01)



本文編號(hào)：3103980