目的探究髓系細(xì)胞中TGF-β1基因敲除對(duì)葡聚糖硫酸鈉（dextran sulfate sodium,DSS）引發(fā)的小鼠結(jié)腸炎發(fā)病進(jìn)程的影響以及與神經(jīng)肽因子的關(guān)系。方法TGF-β1^+/+LysM-Cre及TGF-β1^f/fLysM-Cre小鼠分別分成2組,飲用無菌水的小鼠命名為TGF-β1^+/+LysM-Cre water及TGF-β1^f/fLysM-Cre water;飲用含2%DSS無菌水的小鼠命名為TGF-β1^+/+LysM-Cre DSS及TGF-β1^f/fLysM-Cre DSS。檢測(cè)小鼠質(zhì)量;記錄死亡率;測(cè)量結(jié)腸長(zhǎng)度;HE染色檢測(cè)結(jié)腸組織中炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)情況;QRT-PCR及免疫組化檢測(cè)結(jié)腸組織中炎癥因子,神經(jīng)肽及其受體的表達(dá)水平。結(jié)果TGF-β1^+/+LysM-Cre water及TGF-β1^f/fLysM-Cre water小鼠均表征正常;而TGF-β1^+/+LysM-Cre D... 

【文章來源】：免疫學(xué)雜志. 2020,36(04)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

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TGF-β1髓系敲除鼠的建立

相比于全身性的基因敲除，條件性基因敲除對(duì)目標(biāo)基因的敲除更加明確，效果更加可靠、精確，可用于研究具有胚胎致死性目的基因及基因在特定組織或細(xì)胞中的生理病理功能[10]。為了更深入地研究TGF-β1對(duì)小鼠結(jié)腸炎的影響，我們首先成功構(gòu)建了髓系TGF-β1特異性敲除小鼠。通過DSS造模，結(jié)果表明失去髓系細(xì)胞來源的TGF-β1會(huì)增加小鼠對(duì)結(jié)腸炎的易感性。圖3 各組小鼠神經(jīng)肽及其受體的表達(dá)量

圖2 髓系TGF-β1基因敲除鼠對(duì)實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎的易感性髓系細(xì)胞主要包括樹突細(xì)胞（dendritic cells,DCs）與巨噬細(xì)胞[13]。在腸道中，DCs是TGF-β的重要來源及激活劑[14],CD103+耐受型DCs可產(chǎn)生TGF-β和維A酸，有助于Treg細(xì)胞分化[15-16]。DCs中的TGF-β1信號(hào)對(duì)維持結(jié)腸穩(wěn)態(tài)發(fā)揮關(guān)鍵的作用，DCs中缺乏TGF-β信號(hào)的小鼠（CD11c-Cre TGFβR2f/f）易產(chǎn)生多種自身免疫性疾病，例如出現(xiàn)淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，抑制Treg細(xì)胞分化，激活T細(xì)胞及B細(xì)胞，增加促炎細(xì)胞因子TNF-α及IFN-γ分泌等癥狀的自發(fā)性結(jié)腸炎[17]。在巨噬細(xì)胞中，TGF-β信號(hào)失活（CD68-dnTGFβRII）并不會(huì)引起自發(fā)性結(jié)腸炎，但表現(xiàn)出對(duì)DSS引起的結(jié)腸炎的易感性并減少IL-10的產(chǎn)生[18-19]。Rani等研究發(fā)現(xiàn)巨噬細(xì)胞中TGF-β信號(hào)的活化可抑制IL-33的產(chǎn)生并抵抗腸道炎癥[18]。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]腸上皮細(xì)胞HIF-1α對(duì)結(jié)腸炎的緩解作用及機(jī)制研究[J]. 唐含林,周超,孫力華,楊樺.  免疫學(xué)雜志. 2019(03)



本文編號(hào)：3040946