背景:潰瘍性結(jié)腸炎（Ulcerative colitis,UC）是累及結(jié)腸和直腸黏膜的慢性非特異性炎癥性疾病,近年來,我國人群發(fā)病率呈現(xiàn)出明顯的增長。但UC的病因與發(fā)病機制至今仍不明確。本研究擬通過相關實驗方法,來探索DJ1在UC發(fā)生發(fā)展中的作用以及DJ1是否通過P53實現(xiàn)相關調(diào)控。方法:體外采用不同細胞系構(gòu)建UC炎癥模型、凋亡模型及共培養(yǎng)屏障模型;體內(nèi)選取DJ1基因敲除小鼠及野生型小鼠,分別采用正常飲食、DSS處理構(gòu)建急性腸炎模型。通過小干擾RNA、重組腺病毒技術并結(jié)合DJ1基因敲除（DJ1 KO）小鼠,利用qRT-PCR、WB、免疫組化、流式細胞儀等分子生物學手段觀察DJ1對結(jié)腸炎癥、凋亡、細胞損傷及腸道粘膜屏障功能的影響。進一步分析DJ1對P53的調(diào)控作用及對結(jié)腸上皮細胞炎癥及凋亡的影響。結(jié)果:DJ1在Caco2構(gòu)建的細胞炎癥模型和DSS構(gòu)建的急性腸炎模型中表達顯著下降（mRNA:1.015 VS 0.840,p<0.05;mRNA:NC=1.062 VS 3.5%DSS=0.540 VS 4%DSS=0.303,P<0.05）,同時在人體UC結(jié)腸粘膜中的表達也明顯減... 

【文章來源】：浙江大學浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：99 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１：?ＭＩＸ刺激Ｃａｃｏ－２細胞模擬結(jié)腸上皮細胞炎癥環(huán)境??（Ａ）?ＴＮＦ－ａ；?（Ｂ）?ＩＬ－１?Ｐ?；?ＣＣ）?ＩＣＡＭ；?（Ｄ）ＩＬ８??（注：＊Ｐ＜０．?０５，?＊＊Ｐ?＜０．０１，?＊＊＊Ｐ?＜０＿?００１，?＊＊＊＊Ｐ〈０．０００１）??

ＩＬ－８的ｍＲＮＡ表達均顯著上調(diào)（圖１）；采用ＴＮＦ－ａ刺激ＨＣＴ１１６細胞模擬結(jié)腸??上皮細胞調(diào)亡模型，ＴＮＦ－ａ處理組與對照組相比，介導調(diào)亡的活化ｃａｓｐａｓｅ３表達顯??著上調(diào)（圖２）；采用Ｃａｃｏ－２及ＲＡＷ２６４．７共培養(yǎng)構(gòu)建的腸黏膜屏障模型，可見??隨著培養(yǎng)天數(shù)增加，跨膜電阻ＴＥＥＲ不斷升高，培養(yǎng)至２１ｄ時已經(jīng)達到８００Ｑ／ｃｍ２??以上，屏障建立完全，符合進一步實驗要求（圖３）。??Ａ?ＴＮＦ－ａ?ｇ?ＩＬ１ｐ??�。海郏猓�??Ｃ?ＩＣＡＭ?Ｑ?ＩＬ８??Ｍ１?￣?勹?，…?，??Ｉ４０－?＇?，?１３．??丨?Ｌｌ?ＬＩ??，?參?＜ｆ?＾??圖１：?ＭＩＸ刺激Ｃａｃｏ－２細胞模擬結(jié)腸上皮細胞炎癥環(huán)境??（Ａ）?ＴＮＦ－ａ；?（Ｂ）?ＩＬ－１?Ｐ?；?ＣＣ）?ＩＣＡＭ；?（Ｄ）ＩＬ８??（注：＊Ｐ＜０．?０５，?＊＊Ｐ?＜０．０１，?＊＊＊Ｐ?＜０＿?００１，?＊＊＊＊Ｐ〈０．０００１）??

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【參考文獻】：
期刊論文
[1]云南省2679例炎癥性腸病住院患者初步分析[J]. 唐源,李紅納,張延濤,李方,賀鵬美,王鳳纖,趙黎東,李萍,朱立娜,繆應雷.  中華消化雜志. 2015 (06)
[2]Epidemiology and gene markers of ulcerative colitis in the Chinese[J]. Jun Yun,Department of General Surgery,Xijing Hospital,Fourth Military Medical University,Xi’an 710032,Shaanxi Province,China Chang-Tai Xu,Bo-Rong Pan,Editorial Department,Journal of Fourth Military Medical University,Fourth Military Medical University,Xi’an 710032,Shaanxi Province,China.  World Journal of Gastroenterology. 2009(07)



本文編號：3039620