急性肝損傷血清誘導骨髓間充質(zhì)干細胞分化為類肝細胞的實驗研究
發(fā)布時間:2021-02-14 07:32
目的:探討急性肝損傷血清誘導骨髓間充質(zhì)干細胞(bone marrow mesenchyme stem cells,BMSCs)體外分化為類肝細胞的能力,為利用BMSCs治療終末期肝臟疾病患者提供實驗依據(jù)。方法:利用全骨髓培養(yǎng)法分離提取大鼠BMSCs,在倒置顯微鏡下觀察所提取的原代細胞的形態(tài)學變化,免疫熒光染色法檢測BMSCs表面特異性標志物CD29及造血干細胞(Hematopoietic stem cells,HSCs)表面特異性標志物CD34的表達。建立急性肝損傷模型:模型組將四氯化碳(Carbon tetrachloride,CCL4)-大豆油溶液腹腔注射入大鼠后對其進行部分肝葉切除術;假手術組腹腔注射等劑量的生理鹽水后開腹后即關腹,造模后用全自動生化分析儀檢測大鼠血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(glutamic pyruvic transaminase,ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(Glutamic oxaloacetic transaminase,AST)及總膽紅素值(total bilirubin,TBIL),取大鼠肝臟進行HE染色,倒置顯微鏡下觀察兩組大鼠肝臟病理學改變。將造模組、假手術組大鼠血清...
【文章來源】:南昌大學江西省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:52 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第1章 前言
第2章 材料與方法
2.1 實驗動物
2.2 主要實驗試劑
2.3 主要液體配制
2.4 主要實驗儀器、設備
2.5 實驗方法
2.5.1 BMSCs 的提取、分離、純化及鑒定
2.5.2 急性肝損傷大鼠模型的建立及相關指標測定
2.5.3 不同血清作用于BMSCs 及相關指標測定
2.6 統(tǒng)計學處理
第3章 結(jié)果
3.1 大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的提取、分離、純化及鑒定
3.2 模型組及假手術組大鼠相關指標檢測
3.2.1 兩組大鼠術后24 小時生存率
3.2.2 手術操作方式
3.2.3 血清ALT、AST、TBIL 測定
3.2.4 大鼠肝臟變化
3.3 經(jīng)各組細胞形態(tài)學觀察及RT-PCR 檢測結(jié)果
3.3.1 各組細胞形態(tài)學觀察
3.3.2 各組細胞RT-PCR 檢測
第4章 討論
4.1 BMSCs 分離及培養(yǎng)
4.2 BMSCs 誘導為類肝細胞
第5章 結(jié)論與展望
致謝
參考文獻
附圖
攻讀學位期間的研究成果
綜述
【參考文獻】:
期刊論文
[1]大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞體外誘導分化為肝細胞[J]. 王忠瓊,李昌平,夏世萍,劉彥,鐘曉琳. 基礎醫(yī)學與臨床. 2009(04)
[2]大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞向肝細胞的分化[J]. 徐洪軍,關曉輝,關興卓. 中國組織工程研究與臨床康復. 2008(43)
[3]肝癌術后肝再生狀態(tài)與肝癌復發(fā)關系的初步研究[J]. 蔡云峰,甄作均,陳煥偉,蘇樹英. 中國普通外科雜志. 2008(07)
[4]磁標記豬骨髓間充質(zhì)干細胞自體肝內(nèi)移植后MR活體示蹤研究[J]. 方亮,施曉雷,褚薛慧,方勝,丁義濤. 肝膽外科雜志. 2008(03)
[5]成人骨髓間充質(zhì)干細胞的鑒定與體外BrdU標記[J]. 王小蕊,侯相麟,席亞明,張海紅. 中國組織工程研究與臨床康復. 2008(21)
[6]不同誘導條件對大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞體外誘導類肝細胞的影響[J]. 何文艷,劉樹賢,姜慧卿. 世界華人消化雜志. 2008(05)
[7]肝衰竭大鼠血清誘導間充質(zhì)干細胞向肝細胞分化的實驗研究[J]. 孫慶國,趙文靜,王日中,彭慧杰. 中國實驗診斷學. 2007(11)
[8]自體骨髓干細胞移植治療失代償期肝硬化[J]. 王娟,邵麗春,郭慶,孔欣,朱丹,李曉惠. 中國組織工程研究與臨床康復. 2007(46)
[9]異體骨髓間充質(zhì)干細胞在骨髓嵌合小鼠體內(nèi)分化為肝細胞的實驗研究[J]. 王連友,徐輝,董世武,粟永萍,龐學利,劉登群,王軍平,冉新澤,王鋒超. 第三軍醫(yī)大學學報. 2007(11)
[10]免疫磁珠法分離純化骨髓間充質(zhì)干細胞及向神經(jīng)細胞定向分化[J]. 徐鵬,舒暢,趙子義,張偉. 中國組織工程研究與臨床康復. 2007(20)
本文編號:3033349
【文章來源】:南昌大學江西省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:52 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第1章 前言
第2章 材料與方法
2.1 實驗動物
2.2 主要實驗試劑
2.3 主要液體配制
2.4 主要實驗儀器、設備
2.5 實驗方法
2.5.1 BMSCs 的提取、分離、純化及鑒定
2.5.2 急性肝損傷大鼠模型的建立及相關指標測定
2.5.3 不同血清作用于BMSCs 及相關指標測定
2.6 統(tǒng)計學處理
第3章 結(jié)果
3.1 大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的提取、分離、純化及鑒定
3.2 模型組及假手術組大鼠相關指標檢測
3.2.1 兩組大鼠術后24 小時生存率
3.2.2 手術操作方式
3.2.3 血清ALT、AST、TBIL 測定
3.2.4 大鼠肝臟變化
3.3 經(jīng)各組細胞形態(tài)學觀察及RT-PCR 檢測結(jié)果
3.3.1 各組細胞形態(tài)學觀察
3.3.2 各組細胞RT-PCR 檢測
第4章 討論
4.1 BMSCs 分離及培養(yǎng)
4.2 BMSCs 誘導為類肝細胞
第5章 結(jié)論與展望
致謝
參考文獻
附圖
攻讀學位期間的研究成果
綜述
【參考文獻】:
期刊論文
[1]大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞體外誘導分化為肝細胞[J]. 王忠瓊,李昌平,夏世萍,劉彥,鐘曉琳. 基礎醫(yī)學與臨床. 2009(04)
[2]大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞向肝細胞的分化[J]. 徐洪軍,關曉輝,關興卓. 中國組織工程研究與臨床康復. 2008(43)
[3]肝癌術后肝再生狀態(tài)與肝癌復發(fā)關系的初步研究[J]. 蔡云峰,甄作均,陳煥偉,蘇樹英. 中國普通外科雜志. 2008(07)
[4]磁標記豬骨髓間充質(zhì)干細胞自體肝內(nèi)移植后MR活體示蹤研究[J]. 方亮,施曉雷,褚薛慧,方勝,丁義濤. 肝膽外科雜志. 2008(03)
[5]成人骨髓間充質(zhì)干細胞的鑒定與體外BrdU標記[J]. 王小蕊,侯相麟,席亞明,張海紅. 中國組織工程研究與臨床康復. 2008(21)
[6]不同誘導條件對大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞體外誘導類肝細胞的影響[J]. 何文艷,劉樹賢,姜慧卿. 世界華人消化雜志. 2008(05)
[7]肝衰竭大鼠血清誘導間充質(zhì)干細胞向肝細胞分化的實驗研究[J]. 孫慶國,趙文靜,王日中,彭慧杰. 中國實驗診斷學. 2007(11)
[8]自體骨髓干細胞移植治療失代償期肝硬化[J]. 王娟,邵麗春,郭慶,孔欣,朱丹,李曉惠. 中國組織工程研究與臨床康復. 2007(46)
[9]異體骨髓間充質(zhì)干細胞在骨髓嵌合小鼠體內(nèi)分化為肝細胞的實驗研究[J]. 王連友,徐輝,董世武,粟永萍,龐學利,劉登群,王軍平,冉新澤,王鋒超. 第三軍醫(yī)大學學報. 2007(11)
[10]免疫磁珠法分離純化骨髓間充質(zhì)干細胞及向神經(jīng)細胞定向分化[J]. 徐鵬,舒暢,趙子義,張偉. 中國組織工程研究與臨床康復. 2007(20)
本文編號:3033349
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