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急性肝損傷血清誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為類肝細(xì)胞的實驗研究

發(fā)布時間:2021-02-14 07:32
  目的:探討急性肝損傷血清誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchyme stem cells,BMSCs)體外分化為類肝細(xì)胞的能力,為利用BMSCs治療終末期肝臟疾病患者提供實驗依據(jù)。方法:利用全骨髓培養(yǎng)法分離提取大鼠BMSCs,在倒置顯微鏡下觀察所提取的原代細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化,免疫熒光染色法檢測BMSCs表面特異性標(biāo)志物CD29及造血干細(xì)胞(Hematopoietic stem cells,HSCs)表面特異性標(biāo)志物CD34的表達(dá)。建立急性肝損傷模型:模型組將四氯化碳(Carbon tetrachloride,CCL4)-大豆油溶液腹腔注射入大鼠后對其進(jìn)行部分肝葉切除術(shù);假手術(shù)組腹腔注射等劑量的生理鹽水后開腹后即關(guān)腹,造模后用全自動生化分析儀檢測大鼠血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(glutamic pyruvic transaminase,ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(Glutamic oxaloacetic transaminase,AST)及總膽紅素值(total bilirubin,TBIL),取大鼠肝臟進(jìn)行HE染色,倒置顯微鏡下觀察兩組大鼠肝臟病理學(xué)改變。將造模組、假手術(shù)組大鼠血清... 

【文章來源】:南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:52 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第1章 前言
第2章 材料與方法
    2.1 實驗動物
    2.2 主要實驗試劑
    2.3 主要液體配制
    2.4 主要實驗儀器、設(shè)備
    2.5 實驗方法
        2.5.1 BMSCs 的提取、分離、純化及鑒定
        2.5.2 急性肝損傷大鼠模型的建立及相關(guān)指標(biāo)測定
        2.5.3 不同血清作用于BMSCs 及相關(guān)指標(biāo)測定
    2.6 統(tǒng)計學(xué)處理
第3章 結(jié)果
    3.1 大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的提取、分離、純化及鑒定
    3.2 模型組及假手術(shù)組大鼠相關(guān)指標(biāo)檢測
        3.2.1 兩組大鼠術(shù)后24 小時生存率
        3.2.2 手術(shù)操作方式
        3.2.3 血清ALT、AST、TBIL 測定
        3.2.4 大鼠肝臟變化
    3.3 經(jīng)各組細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察及RT-PCR 檢測結(jié)果
        3.3.1 各組細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察
        3.3.2 各組細(xì)胞RT-PCR 檢測
第4章 討論
    4.1 BMSCs 分離及培養(yǎng)
    4.2 BMSCs 誘導(dǎo)為類肝細(xì)胞
第5章 結(jié)論與展望
致謝
參考文獻(xiàn)
附圖
攻讀學(xué)位期間的研究成果
綜述


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化為肝細(xì)胞[J]. 王忠瓊,李昌平,夏世萍,劉彥,鐘曉琳.  基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床. 2009(04)
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本文編號:3033349

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