目的:腸易激綜合征（Irritable Bowel Syndrome,IBS）是臨床常見的引起患者腹痛、腹脹、腹部不適等癥狀的功能性消化道疾病,在全球發(fā)病率較高,并嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量和過分占用醫(yī)療衛(wèi)生資源。然而,目前對(duì)于IBS的發(fā)病機(jī)制了解仍然不足,有效的治療措施亟待研究發(fā)現(xiàn)。近年來研究表明,IBS的發(fā)生與腸道運(yùn)動(dòng)功能密切相關(guān),而5-羥色胺（5-hydroxytryptamine,5-HT）和5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)體（serotonin transporter,SERT）則是影響腸道運(yùn)動(dòng)的關(guān)鍵物質(zhì)。有研究表明,SERT的水平受腸道菌群的影響。大量的基礎(chǔ)和臨床實(shí)驗(yàn)都證實(shí)了益生菌對(duì)于IBS的治療有著很好地療效。然而,益生菌治療IBS的機(jī)制尚不明確。歷史研究表明,鼠李糖乳桿菌上清液作用于腸上皮細(xì)胞和感染后IBS小鼠的結(jié)腸組織可以引起SERT水平上調(diào)�？莶菅挎邨U菌、糞腸球菌、屎腸球菌是常用的三種益生菌類型,然而,對(duì)于此三種益生菌是否也可以對(duì)SERT表達(dá)進(jìn)行調(diào)控尚無證據(jù)。本研究旨在觀察枯草芽孢桿菌、糞腸球菌、屎腸球菌上清對(duì)腸上皮細(xì)胞SERT蛋白的表達(dá)有無影響,進(jìn)而影響5-HT的水平,從而為益生菌緩解... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

PT-PCRSERT擴(kuò)增曲線

下游為 CAT GGT GGT GAA GAC GCC AG；SERT 上游為 AAT GGGTAC TCA GCA GTT CC，下游為 CCA CAG CAT AGC CAA TCA C；（3）反應(yīng)體系Components VolumeAceQ Universal SYBR qPCR Master Mix 10μl上游引物 0.4μl下游引物 0.4μlddH2O 4.2μlcDNA（適度稀釋） 5μl總體系 20μl（4）反應(yīng)條件（見圖 1 和圖 2）95℃ 5min95℃ 10s60℃ 30s40 個(gè)循環(huán)

圖 3. 枯草芽孢桿菌刺激 Caco-2 細(xì)胞 SERT 表達(dá)水平（a. 12 小時(shí) SERT mRNA 表達(dá)水平 b. 12 小時(shí) SER蛋白表達(dá)水平 c. 24 小時(shí) SERT mRNA 表達(dá)水平 d. 24 小時(shí) SERT 蛋白表達(dá)水平）2.2 糞腸球菌上清液上調(diào) Caco-2 細(xì)胞 SERT 蛋白表達(dá)水平糞腸球菌（CGMCC 1.2135）上清液刺激 Caco-2 細(xì)胞 12 小時(shí)，各濃度刺激組 SERT mRNA 表達(dá)均有明顯上調(diào)，分別是對(duì)照組表達(dá)的 2.0 倍、1.9 倍、1.9 倍但上調(diào)無差異（見圖 4a）；此時(shí)，刺激組 SERT 蛋白表達(dá)水平較對(duì)照組均無上調(diào)表現(xiàn)（見圖 4b）。糞腸球菌（CGMCC 1.2135）上清液刺激 Caco-2 細(xì)胞 24 小時(shí)，SERT mRN表達(dá)只在 1:50 刺激濃度組出現(xiàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的上調(diào)，約為對(duì)照組的 1.3 倍（見圖 4c）；此時(shí)的 SERT 蛋白在 1:50 和 1：20 稀釋的糞腸球菌上清液條件下表現(xiàn)出明顯上調(diào)，以 1：20 刺激濃度最為顯著，呈濃度-依賴性（見圖 4d）。因此，糞腸球菌上清液可以上調(diào)Caco-2細(xì)胞的SERT蛋白表達(dá)。SERT mRN在 12 小時(shí)呈明顯上調(diào)，隨濃度增長未表現(xiàn)出濃度-依賴性，至 24 小時(shí)表達(dá)已逐漸回落，只有 1:50 稀釋濃度組仍有輕度上調(diào)。而 SERT 蛋白的表達(dá)晚于 mRNA

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3020281