本文關鍵詞：川芎嗪和大鼠CTGF miRNA質(zhì)粒對高糖刺激大鼠肝星狀細胞CTGF、TGF-β表達的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:探討川芎嗪和大鼠CTGF miRNA質(zhì)粒對高糖刺激大鼠肝星狀細胞（HSC）的結締組織生長因子（CTGF）、轉化生長因子(TGF-β)及Ⅰ型膠原表達的作用效果，為在臨床上應用川芎嗪治療及預防肝纖維化提供理論依據(jù)。 方法：根據(jù)大鼠CTGF mRNA序列設計合成3種大鼠CTGF miRNA質(zhì)粒及1種陰性質(zhì)粒，分別轉染HSC，轉染后于熒光顯微鏡下觀察質(zhì)粒瞬時轉染肝星狀細胞的轉染率，應用RT-PCR法檢測四種質(zhì)粒轉染的細胞CTGF mRNA的表達水平，篩選出干擾效率最高的一種大鼠CTGFmiRNA質(zhì)粒；將干擾效率最高的大鼠CTGF miRNA質(zhì)粒及陰性對照質(zhì)粒分別轉染HSC，，經(jīng)殺稻瘟菌素持續(xù)壓力篩選獲得穩(wěn)定表達大鼠CTGF miRNA質(zhì)粒的大鼠肝星狀細胞、穩(wěn)定表達陰性質(zhì)粒的大鼠肝星狀細胞。培養(yǎng)HSC、穩(wěn)定表達大鼠CTGF miRNA質(zhì)粒的大鼠肝星狀細胞、穩(wěn)定表達陰性質(zhì)粒的大鼠肝星狀細胞，高糖及川芎嗪作用后提取細胞總RNA、總蛋白檢測各組CTGF、TGF-β mRNA表達量及蛋白的表達量。高糖及川芎嗪作用后收集細胞培養(yǎng)上清液檢測各組Ⅰ型膠原表達量。結果： 應用RT-PCR法篩選出干擾效率最高的大鼠CTGF miRNA質(zhì)粒。獲得穩(wěn)定表達大鼠CTGF miRNA質(zhì)粒的大鼠肝星狀細胞及穩(wěn)定表達陰性質(zhì)粒的大鼠肝星狀細胞。高糖組CTGF mRNA表達量及CTGF蛋白表達量較空白對照組顯著增加（P0.01）；高糖組TGF-beta mRNA表達量及TGF-beta蛋白表達量較空白對照組顯著增加（P0.01）；高糖組Ⅰ型膠原表達量較空白對照組顯著增加（P0.01）。與高糖組比較，川芎嗪組能明顯下調(diào)CTGF mRNA表達量及CTGF蛋白表達量（P0.01）；川芎嗪組能明顯下調(diào)TGF-beta mRNA表達量及TGF-beta蛋白表達量（P0.01）；川芎嗪組能明顯下調(diào)Ⅰ型膠原的表達量（P0.01）；大鼠CTGF miRNA質(zhì)粒干擾組能顯著下調(diào)CTGF mRNA表達量及CTGF蛋白表達量（P0.01）；大鼠CTGF miRNA質(zhì)粒干擾組能顯著下調(diào)TGF-beta mRNA表達量及TGF-beta蛋白表達量（P0.01）；大鼠CTGFmiRNA質(zhì)粒干擾組能顯著下調(diào)Ⅰ型膠原的表達量（P0.01）。川芎嗪組與大鼠CTGF miRNA質(zhì)粒干擾組相比，CTGF mRNA及蛋白的表達量差異無統(tǒng)計學差異（P0.05）；川芎嗪組Ⅰ型膠原的表達量較大鼠CTGFmiRNA質(zhì)粒干擾組低，且差別有統(tǒng)計學意義（P0.01）。 結論：由此得出高糖可刺激CTGF、TGF-beta、Ⅰ型膠原表達量，而川芎嗪、大鼠CTGF miRNA質(zhì)�？上抡{(diào)CTGF、TGF-beta、Ⅰ型膠原的表達。川芎嗪在治療肝纖維化中的作用明顯，有較強的臨床實用價值。
【關鍵詞】：川芎嗪 大鼠肝星狀細胞 結締組織生長因子 轉化生長因子-β RNA干擾
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R575.2
【目錄】：

• 符號說明5-6
• 摘要6-8
• ABSTRACT8-11
• 前言11
• 材料11-14
• 方法14-26
• 結果26-34
• 討論34-36
• 問題與展望36-37
• 全文小結37-38
• 參考文獻38-39
• 附圖39-42
• 文獻綜述42-51
• 參考文獻48-51
• 致謝51-52
• 攻讀碩士學位期間發(fā)表的論文目錄52-53

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

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  本文關鍵詞：川芎嗪和大鼠CTGF miRNA質(zhì)粒對高糖刺激大鼠肝星狀細胞CTGF、TGF-β表達的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：301794