發(fā)布時間：2017-04-12 17:21

  本文關(guān)鍵詞：川芎嗪和大鼠CTGF miRNA質(zhì)粒對高糖刺激大鼠肝星狀細(xì)胞CTGF、TGF-β表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:探討川芎嗪和大鼠CTGF miRNA質(zhì)粒對高糖刺激大鼠肝星狀細(xì)胞（HSC）的結(jié)締組織生長因子（CTGF）、轉(zhuǎn)化生長因子(TGF-β)及Ⅰ型膠原表達(dá)的作用效果，為在臨床上應(yīng)用川芎嗪治療及預(yù)防肝纖維化提供理論依據(jù)。 方法：根據(jù)大鼠CTGF mRNA序列設(shè)計合成3種大鼠CTGF miRNA質(zhì)粒及1種陰性質(zhì)粒，分別轉(zhuǎn)染HSC，轉(zhuǎn)染后于熒光顯微鏡下觀察質(zhì)粒瞬時轉(zhuǎn)染肝星狀細(xì)胞的轉(zhuǎn)染率，應(yīng)用RT-PCR法檢測四種質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞CTGF mRNA的表達(dá)水平，篩選出干擾效率最高的一種大鼠CTGFmiRNA質(zhì)粒；將干擾效率最高的大鼠CTGF miRNA質(zhì)粒及陰性對照質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染HSC，，經(jīng)殺稻瘟菌素持續(xù)壓力篩選獲得穩(wěn)定表達(dá)大鼠CTGF miRNA質(zhì)粒的大鼠肝星狀細(xì)胞、穩(wěn)定表達(dá)陰性質(zhì)粒的大鼠肝星狀細(xì)胞。培養(yǎng)HSC、穩(wěn)定表達(dá)大鼠CTGF miRNA質(zhì)粒的大鼠肝星狀細(xì)胞、穩(wěn)定表達(dá)陰性質(zhì)粒的大鼠肝星狀細(xì)胞，高糖及川芎嗪作用后提取細(xì)胞總RNA、總蛋白檢測各組CTGF、TGF-β mRNA表達(dá)量及蛋白的表達(dá)量。高糖及川芎嗪作用后收集細(xì)胞培養(yǎng)上清液檢測各組Ⅰ型膠原表達(dá)量。結(jié)果： 應(yīng)用RT-PCR法篩選出干擾效率最高的大鼠CTGF miRNA質(zhì)粒。獲得穩(wěn)定表達(dá)大鼠CTGF miRNA質(zhì)粒的大鼠肝星狀細(xì)胞及穩(wěn)定表達(dá)陰性質(zhì)粒的大鼠肝星狀細(xì)胞。高糖組CTGF mRNA表達(dá)量及CTGF蛋白表達(dá)量較空白對照組顯著增加（P0.01）；高糖組TGF-beta mRNA表達(dá)量及TGF-beta蛋白表達(dá)量較空白對照組顯著增加（P0.01）；高糖組Ⅰ型膠原表達(dá)量較空白對照組顯著增加（P0.01）。與高糖組比較，川芎嗪組能明顯下調(diào)CTGF mRNA表達(dá)量及CTGF蛋白表達(dá)量（P0.01）；川芎嗪組能明顯下調(diào)TGF-beta mRNA表達(dá)量及TGF-beta蛋白表達(dá)量（P0.01）；川芎嗪組能明顯下調(diào)Ⅰ型膠原的表達(dá)量（P0.01）；大鼠CTGF miRNA質(zhì)粒干擾組能顯著下調(diào)CTGF mRNA表達(dá)量及CTGF蛋白表達(dá)量（P0.01）；大鼠CTGF miRNA質(zhì)粒干擾組能顯著下調(diào)TGF-beta mRNA表達(dá)量及TGF-beta蛋白表達(dá)量（P0.01）；大鼠CTGFmiRNA質(zhì)粒干擾組能顯著下調(diào)Ⅰ型膠原的表達(dá)量（P0.01）。川芎嗪組與大鼠CTGF miRNA質(zhì)粒干擾組相比，CTGF mRNA及蛋白的表達(dá)量差異無統(tǒng)計學(xué)差異（P0.05）；川芎嗪組Ⅰ型膠原的表達(dá)量較大鼠CTGFmiRNA質(zhì)粒干擾組低，且差別有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.01）。 結(jié)論：由此得出高糖可刺激CTGF、TGF-beta、Ⅰ型膠原表達(dá)量，而川芎嗪、大鼠CTGF miRNA質(zhì)�？上抡{(diào)CTGF、TGF-beta、Ⅰ型膠原的表達(dá)。川芎嗪在治療肝纖維化中的作用明顯，有較強(qiáng)的臨床實用價值。
【關(guān)鍵詞】：川芎嗪 大鼠肝星狀細(xì)胞 結(jié)締組織生長因子 轉(zhuǎn)化生長因子-β RNA干擾
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R575.2
【目錄】：

• 符號說明5-6
• 摘要6-8
• ABSTRACT8-11
• 前言11
• 材料11-14
• 方法14-26
• 結(jié)果26-34
• 討論34-36
• 問題與展望36-37
• 全文小結(jié)37-38
• 參考文獻(xiàn)38-39
• 附圖39-42
• 文獻(xiàn)綜述42-51
• 參考文獻(xiàn)48-51
• 致謝51-52
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文目錄52-53

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 周昌華;章崇杰;彭曉東;魏大鵬;王光迪;;采用蛋白組學(xué)技術(shù)分析質(zhì)粒介導(dǎo)siRNA的“Off-target”效應(yīng)[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報;2010年02期

2 沙龍澤;曾毅;王建博;徐思明;崔素霞;;小RNA分子研究進(jìn)展[J];生物學(xué)通報;2009年01期

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  本文關(guān)鍵詞：川芎嗪和大鼠CTGF miRNA質(zhì)粒對高糖刺激大鼠肝星狀細(xì)胞CTGF、TGF-β表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：301794