目的：膽紅素葡萄糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶（BilirubinUDP-glucuronsytran-sferase,B-UGT）是膽紅素代謝的關(guān)鍵酶，其編碼基因?yàn)閁GT1A1。既往實(shí)驗(yàn)研究提示B-UGT活性降低可能是導(dǎo)致膽汁中單結(jié)合膽紅素增多，形成致石膽汁的重要原因。本實(shí)驗(yàn)觀察原發(fā)性肝內(nèi)膽管結(jié)石（PrimaryIntrahepaticStones,PIS）患者肝細(xì)胞內(nèi)膽紅素葡萄糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶基因UGT1A1mRNA及其蛋白（B-UGT）表達(dá)情況，在基因水平探索原發(fā)性肝內(nèi)膽管結(jié)石的發(fā)病機(jī)理及調(diào)控機(jī)制對象與方法：1、以原發(fā)性肝內(nèi)膽管結(jié)石病患者肝臟為標(biāo)本，取33例肝內(nèi)膽管結(jié)石患者肝臟（HS組），其中男性患者19人，女性14人。15例非結(jié)石患者肝臟（其中肝囊腫患者8人，肝血管瘤6人，肝癌1人，男性9人，女性6人）為對照組（NS組）。在術(shù)中將肝組織切下后，立即切除適當(dāng)大小裝入凍存管，急送瀘州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室液氮速凍，然后轉(zhuǎn)存于-80攝氏度冰箱保存。2、肝臟細(xì)胞內(nèi)UGT1A1基因mRNA表達(dá)量測定：以GAPDH為內(nèi)參照，采用Real-timeQuantitativePCR方法檢測UGT1A1基因mRN... 

【文章來源】：西南醫(yī)科大學(xué)四川省

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

s形動力學(xué)曲線,表明出現(xiàn)特異性擴(kuò)增Fig1、Nucleicacidamplificationprocesssshapecurve

圖1 ： s形 動力 學(xué) 曲 線 , 表明 出現(xiàn) 特異 性 擴(kuò) 增 Fi g 1 、N u c l e ic ac i d am p li f i c at io n pr o ce s s s sh a p e cu r ve 圖2 ： 圖中 溶 解曲 線 均為 單 一吸 收 峰 ，無 明 顯干 擾 峰出 現(xiàn) Fi g 2、 T he so lu bi l i t y cu r ve sh o ws si n g le ab so r pt io n p ea k 2. 5. 2 、標(biāo) 準(zhǔn)曲 線 做標(biāo) 準(zhǔn) 曲線 得 出 擴(kuò)展 熒 光 值與 基 因拷 貝 數(shù) 的實(shí) 時(shí) 變 化關(guān) 系 ，從而 根據(jù) 樣品 的熒 光 值在 擴(kuò) 增 過程 中 的 變化 ， 求 出樣 品 的 D N A 拷貝 。以

率 E 值 E= 9 5. 7 % 以及 相 關(guān)性 R 值 = 0. 99 7。 說明 擴(kuò) 增效 率 高 ，相關(guān) 性好 （圖 3） 。 圖3 ： 標(biāo)準(zhǔn) 曲 線 Fi g 3: T he s ta nd a rd c u rv e 2. 5 . 3、 Pc r 結(jié) 果 分析 根 據(jù) 標(biāo)準(zhǔn) 曲 線 和樣 本 PC R 反 應(yīng) C t值 ， 用 Bi o -R a d iQ 5 軟 件 分析 ，按 Pf a ff l 法 ， 基 因 表 達(dá) = (1 + Et a rg e t)△C t t ar g et (c o nr ro l -e x p t )/( 1 + Ere f e r en ce )△C tre f e r en ce (c o nr r ol - ex p t )。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：2962843