乙型肝炎病毒剪接特異性蛋白（hepatitis B spliced protein，HBSP）是由2447nt-489nt單剪接型2.2Kb HBV剪接變異體編碼產(chǎn)生的一種蛋白。已有研究顯示，它可誘導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡，與肝硬化發(fā)生呈正相關(guān)；HBSP還可誘導(dǎo)特異性CTL活性，導(dǎo)致肝臟損傷。目前該蛋白的具體致病機(jī)制仍未闡明，為了更深入了解其致病性，本實(shí)驗(yàn)室在前期研究工作中，以酵母雙雜交篩選的方法獲得了多個與HBSP相互作用的肝細(xì)胞蛋白，泛轉(zhuǎn)錄表達(dá)因子（Ubiquitously expressed transcript，UXT）即是其中之一。本研究首先構(gòu)建pCMVTNT-UXT重組載體，利用TNT兔網(wǎng)織紅細(xì)胞裂解物轉(zhuǎn)錄/翻譯偶聯(lián)系統(tǒng)體外轉(zhuǎn)錄翻譯UXT蛋白，誘導(dǎo)表達(dá)和純化GST-HBSP融合蛋白，通過GST pull-down實(shí)驗(yàn)，證實(shí)了HBSP和UXT在體外具有直接相互作用。進(jìn)一步通過哺乳動物細(xì)胞雙雜交，將pBIND-HBSP與pACT-UXT重組質(zhì)粒和報告基因載體pG5luc共轉(zhuǎn)染肝癌細(xì)胞株Huh7細(xì)胞，結(jié)果證實(shí)HBSP和UXT在哺乳動物細(xì)胞存在相互作用。另外，本研究成功包裝表達(dá)HBSP的重組腺... 

【文章來源】：福建醫(yī)科大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
前言
材料和方法
結(jié)果
討論
參考文獻(xiàn)
附錄一 英文縮略詞表
附錄二 試劑配方
附錄三 主要儀器設(shè)備
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號：2953124