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檢測(cè)乙型肝炎病毒S區(qū)“α”決定簇145位點(diǎn)突變株方法的建立及應(yīng)用研究

發(fā)布時(shí)間:2020-12-31 10:44
  病毒性肝炎是由多種肝炎病毒引起的常見(jiàn)傳染病,具有傳染性強(qiáng)、傳播途徑復(fù)雜、流行面廣泛,發(fā)病率較高等特點(diǎn)。臨床上主要表現(xiàn)為乏力、食欲減退、惡心、嘔吐、肝腫大及肝功能損害,部分病人可有黃疸和發(fā)熱。有些患者出現(xiàn)蕁麻疹、關(guān)節(jié)痛或上呼吸道癥狀。病毒性肝炎呈世界性分布,我國(guó)是病毒性肝炎的高發(fā)區(qū)域,其中全國(guó)各地人群中乙型肝炎的發(fā)病率最高約為50%—70%。乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染所至。HBV屬嗜肝DNA病毒科,為環(huán)狀,雙股DNA病毒,外層是脂蛋白包膜,含乙肝表面抗原(HBsAg);內(nèi)部是核心,含有核酸及乙肝核心抗原(HBcAg)。對(duì)人類(lèi)血清中HBV的電鏡檢查,顯示三種顆粒:即Dane顆粒、球型顆粒和絲狀顆粒。HBV感染人體肝細(xì)胞后,對(duì)肝細(xì)胞并無(wú)直接致病作用,而是通過(guò)細(xì)胞免疫和體液免疫造成肝細(xì)胞的病毒性免疫損害,并從而引起各種臨床表現(xiàn)。大部分患者呈急性發(fā)病過(guò)程,通常于6個(gè)月內(nèi)痊愈;10%-20%患者可演變成慢性肝炎,繼而發(fā)展成肝硬化,甚至肝細(xì)胞癌;90%以上新生兒感染者成為慢性攜帶者或慢性肝炎患者。但值得慶幸的是目前已有乙肝疫苗用于預(yù)防HBV感染,而且事... 

【文章來(lái)源】:東北師范大學(xué)吉林省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:81 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【圖文】:

檢測(cè)乙型肝炎病毒S區(qū)“α”決定簇145位點(diǎn)突變株方法的建立及應(yīng)用研究


基因的PCR擴(kuò)增100bp

基因克隆,酶切鑒定,質(zhì)粒,同源性比較


2 S 基因克隆質(zhì)粒酶切鑒定00 Marker;2,3:S 基因陽(yáng)性及氨基酸序列同源性比較苷酸序列進(jìn)行測(cè)定,證明本為:CAAGAATCCTCACAATATAGGGGGATCTCCCGTGCTCACCAACCTCCTGTCTTTTATCATATTCCTCTTCATTATCAAGGTATGTTGCCGGGACCATGCAAAACTGTTGCTGTACAAAACC

電泳圖,含量檢測(cè),原核細(xì)胞,超聲裂解


ET28a-S 的酶切鑒定T28a-S 質(zhì)粒的酶切結(jié)果arker 4白含量檢測(cè)加 IPTG 誘導(dǎo) 3h,超聲裂解細(xì)胞,表明,S 基因在原核細(xì)胞中的表達(dá)是的 SDS-PAGE 電泳圖見(jiàn)圖 4.經(jīng)過(guò)薄。


本文編號(hào):2949469

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