目的:采用HBV變異株與野生株病毒血清感染HepG2和L02細(xì)胞,評(píng)價(jià)這兩種細(xì)胞是否可被HBV自然感染,并探討二者復(fù)制能力是否有差異。方法:分別收集ADV變異株、LAM變異株及野生株的HBV感染患者血清。用2% DMSO培養(yǎng)液培養(yǎng)人肝癌細(xì)胞系HepG2細(xì)胞和人正常肝細(xì)胞系L02細(xì)胞4天后,用收集的患者血清分別感染這兩種細(xì)胞,于感染后0、1、2、4、6、8、10天收集細(xì)胞上清,采用時(shí)間分辨熒光免疫分析法檢測(cè)細(xì)胞上清中HBsAg水平;實(shí)時(shí)定量PCR法檢測(cè)細(xì)胞上清中HBV DNA含量。收集感染后0、24h、48h、96h時(shí)間點(diǎn)的細(xì)胞,細(xì)胞免疫熒光法檢測(cè)細(xì)胞中HBcAg的定位。結(jié)果:1. HepG2和L02細(xì)胞上清中HBsAg含量均呈遞增趨勢(shì),在感染后第2天達(dá)到最高峰,之后逐漸下降。2.兩種細(xì)胞上清中HBV-DNA的量均呈遞增趨勢(shì),在感染后第4天達(dá)到最高峰,以后呈下降趨勢(shì);3. 24h后在兩種細(xì)胞胞質(zhì)中首次見(jiàn)強(qiáng)信號(hào)的HBcAg,呈均勻分布,而胞核中未見(jiàn)陽(yáng)性表達(dá)物;48h后可在細(xì)胞核中看見(jiàn)紅色標(biāo)記物,而胞質(zhì)中HBcAg表達(dá)減弱;96h后細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中HBcAg的表達(dá)均減少。4. ADV變異株、... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

組和C組比較、B組和C組比較，P＜

（3）在 ADV 變異株組、LAM 變異株組和 HBV 野生株組中，每細(xì)胞和 L02 細(xì)胞細(xì)胞上清中 HBsAg 的量相比較，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，1----HepG2 細(xì)胞 2----L02 細(xì)胞圖 6. A 組和 D 組、B 組和 E 組、C 組和 F 組細(xì)胞上清中 HBsA無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＞0.05

（3）在 ADV 變異株組、LAM 變異株組和 HBV 野生株組中，每細(xì)胞和 L02 細(xì)胞細(xì)胞上清中 HBsAg 的量相比較，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，1----HepG2 細(xì)胞 2----L02 細(xì)胞圖 6. A 組和 D 組、B 組和 E 組、C 組和 F 組細(xì)胞上清中 HBsA無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＞0.05

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Recognition of HBV antigens and HBV DNA by dendritic cells[J]. Guang-Ying Cui and Hong-Yan Diao State Key Laboratory for Diagnosis and Treatment of Infectious Disease,First Affiliated Hospital,Zhejiang University School of Medicine,Hangzhou 310003,China.  Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International. 2010(06)
[2]新型乙型肝炎病毒細(xì)胞感染模型的建立[J]. 姚永遠(yuǎn),馬立憲,賽林濤,邵麗華,關(guān)彥彥,王剛.  世界華人消化雜志. 2010(08)
[3]乙肝病毒YMDD變異與乙型肝炎病毒大蛋白相關(guān)性的探討[J]. 王立軍,孫燕,付海平.  中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志. 2010 (01)
[4]HSVⅠ感染L-02細(xì)胞對(duì)核不均一性核糖核蛋白H2（hnRNP H2）表達(dá)影響[J]. 王賽鋒,寸韡,董承紅,洪敏,劉龍丁,王蕾,李琦涵.  中國(guó)生物工程雜志. 2008(06)
[5]DMSO促進(jìn)HepG2細(xì)胞感染乙型肝炎病毒后核心蛋白入核[J]. 潘孝本,韓進(jìn)超,魏來(lái),高燕,叢旭.  世界華人消化雜志. 2007(29)
[6]HBcAg生物學(xué)特性研究進(jìn)展[J]. 徐志強(qiáng),成軍,張鴻飛.  世界華人消化雜志. 2004(12)
[7]HBV陽(yáng)性血清體外感染HepG2細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 王安輝,門可,張景霞,徐德忠,閆永平.  第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2003(24)
[8]丙型肝炎病毒感染細(xì)胞模型的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 陳瑞烈,賀永文,高勇,李淑莉,楊小銘,羅端德.  華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2003(03)



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