目的：研究核苷類(lèi)似物治療后完全應(yīng)答的慢性乙型肝炎患者在停藥時(shí)肝內(nèi)HBV準(zhǔn)種分布情況，從準(zhǔn)種角度探討核苷類(lèi)似物停藥復(fù)發(fā)的分子病毒學(xué)機(jī)制。方法：選擇經(jīng)核苷類(lèi)似物治療后達(dá)到停藥標(biāo)準(zhǔn)（實(shí)現(xiàn)HBeAg血清轉(zhuǎn)換、HBVDNA持續(xù)陰轉(zhuǎn)后繼續(xù)用藥48周）的慢性乙型肝炎患者10例，進(jìn)行肝組織活檢，抽提肝內(nèi)HBVDNA，PCR擴(kuò)增HBV RT區(qū)基因，克隆后測(cè)序。并對(duì)所有患者每4周隨訪1次，連續(xù)隨訪24周，觀察停藥后的病毒學(xué)應(yīng)答情況，根據(jù)病毒學(xué)應(yīng)答情況分為持續(xù)應(yīng)答組和停藥復(fù)發(fā)組。應(yīng)用生物信息學(xué)技術(shù)分析停藥復(fù)發(fā)組和持續(xù)應(yīng)答組之間肝內(nèi)HBV準(zhǔn)種的復(fù)雜度和多樣性的差異，對(duì)病毒序列應(yīng)用鄰接法構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)。結(jié)果：停藥復(fù)發(fā)組的血清HBsAg水平明顯高于持久應(yīng)答組，兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.028)。兩組間肝組織病理學(xué)結(jié)果無(wú)論是炎癥水平還是纖維化分期以及肝組織內(nèi)HBsAg的免疫組化差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。停藥復(fù)發(fā)組和持續(xù)應(yīng)答組肝內(nèi)HBV準(zhǔn)種復(fù)雜度和準(zhǔn)種多樣性無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。進(jìn)化樹(shù)分析結(jié)果顯示停藥復(fù)發(fā)組和持續(xù)應(yīng)答組的序列分支枝長(zhǎng)相似。結(jié)論：停藥時(shí)的血清HBsAg水平越低越不易復(fù)... 

【文章來(lái)源】：福建醫(yī)科大學(xué)福建省

【文章頁(yè)數(shù)】：43 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
符號(hào)說(shuō)明
摘要
Abstract
引言
研究對(duì)象和方法
    1. 研究對(duì)象
    2. 材料與方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)主要儀器及器材
        2.2 實(shí)驗(yàn)主要試劑
        2.3 實(shí)驗(yàn)方法
            2.3.1 抽提肝組織內(nèi) HBV-DNA
            2.3.2 巢式 PCR 擴(kuò)增 HBV RT 區(qū)基因
            2.3.3 PCR 產(chǎn)物純化回收
            2.3.4 PCR 純化產(chǎn)物加 A 與連接反應(yīng)
            2.3.5 轉(zhuǎn)化
            2.3.6 陽(yáng)性重組克隆的鑒定
            2.3.7 陽(yáng)性重組克隆的擴(kuò)增
            2.3.8 陽(yáng)性重組克隆的測(cè)序
        2.4 肝功能、乙肝兩對(duì)半定量和血清及肝內(nèi) HBVDNA 載量檢測(cè)
        2.5 生物信息學(xué)分析
            2.5.1 序列的一般性處理
                2.5.1.1 檢測(cè)并去除混雜序列
                2.5.1.2 序列比對(duì)
                2.5.1.3 檢測(cè)重組序列
            2.5.2 病毒基因型鑒定
            2.5.3 病毒準(zhǔn)種分析
            2.5.4 進(jìn)化樹(shù)分析
        2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié)果
    3.1 一般情況
    3.2 停藥時(shí)血清 HBsAg、HBcAb 及肝內(nèi) HBV DNA 與核苷（酸）類(lèi)似物停藥復(fù)發(fā)的關(guān)系
    3.3 病理學(xué)檢測(cè)結(jié)果分析
    3.4 HBV 基因組 RT 區(qū)準(zhǔn)種的復(fù)雜度和多樣性
    3.5 HBV S 區(qū)的終止密碼子的突變情況
    3.6 進(jìn)化樹(shù)分析
討論
結(jié)論
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
附錄
參考文獻(xiàn)
致謝
綜述
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]乙型肝炎病毒基因S區(qū)準(zhǔn)種特點(diǎn)與臨床轉(zhuǎn)歸關(guān)系的初步研究[J]. 郁嘉倫,于德敏,姜節(jié)洪,張東華,黃素園,劉峰,張欣欣.  中華臨床感染病雜志. 2011 (01)
[2]拉米夫定與恩替卡韋序貫治療中的乙型肝炎病毒準(zhǔn)種動(dòng)力學(xué)[J]. 劉霖,湯影子,李俊剛,周吉軍,王小紅,王宇明.  中華肝臟病雜志. 2010 (06)
[3]HBV準(zhǔn)種變異預(yù)測(cè)核苷(酸)類(lèi)似物治療HBeAg陽(yáng)性慢性乙型肝炎持續(xù)療效的初步研究[J]. 羅志雄,劉映霞,彭忠田,李紅梅.  中華實(shí)驗(yàn)和臨床感染病雜志(電子版). 2009(02)
[4]拉米夫定治療HBeAg陽(yáng)性慢性乙型肝炎患者7年結(jié)果總結(jié)[J]. 姚光弼,朱玫,馬秀云,蔡皓東.  肝臟. 2007(02)
[5]慢性乙型肝炎急性發(fā)作患者血清病毒準(zhǔn)種動(dòng)力學(xué)研究[J]. 劉霖,王宇明,蘭林,李俊剛,鄧國(guó)宏,夏杰,趙學(xué)蘭,張緒清.  中華肝臟病雜志. 2006(01)
[6]慢性乙型肝炎防治指南[J].   肝臟. 2005(04)
[7]重型乙型肝炎患者肝組織和血清中乙型肝炎病毒前C區(qū)準(zhǔn)種的比較[J]. 趙學(xué)蘭,王宇明,蘭林,黃燕萍.  中華肝臟病雜志. 2005(08)
[8]慢性乙型肝炎患者血清HBeAg和HBV DNA水平與肝組織病理關(guān)系的探討[J]. 姜湘寧,王功遂,尹建軍.  實(shí)用肝臟病雜志. 2004(02)
[9]基因芯片技術(shù)在檢測(cè)乙型肝炎病毒P區(qū)YMDD變異中的研究[J]. 張新華,張躍新,孫立茹,文倩,周禮全,樊國(guó)霞,張新,揚(yáng)德剛.  中華醫(yī)學(xué)雜志. 2003(06)
[10]定量檢測(cè)慢性乙型肝炎患者肝組織乙型肝炎病毒DNA的臨床價(jià)值[J]. 呂卉,馬立憲,徐皖蘇,張惠蕓,于麗君,段洪英.  中華肝臟病雜志. 2003(03)



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