研究背景:致病因子損傷肝臟后主要經(jīng)過肝纖維化發(fā)展為肝硬化,晚期肝硬化并發(fā)癥多、癌變率高、死亡率高,嚴(yán)重危害人類健康。肝纖維化的主要發(fā)病機制是細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）過度彌漫性沉淀,研究發(fā)現(xiàn)活化的肝星狀細(xì)胞（HSC）是產(chǎn)生ECM的主要細(xì)胞。熊去氧膽酸（UDCA）具有抗肝纖維化的作用,但具體藥理機制仍不明。多系統(tǒng)疾病的發(fā)病機制與線粒體功能密切相關(guān),線粒體NIX蛋白可能參與肝纖維化的進展。本實驗旨在研究線粒體NIX蛋白的表達(dá)變化與UDCA抑制實驗性肝纖維化作用的關(guān)系。方法:肝星狀細(xì)胞-LX2細(xì)胞株和CCl4誘導(dǎo)的肝纖維化大鼠模型肝臟組織分別用于體外實驗和體內(nèi)實驗的研究。免疫蛋白印跡法（WB）檢測分析各組間LX2細(xì)胞α-SMA、NIX蛋白的表達(dá)差異。實時熒光定量PCR（q RT-PCR）比較各組間LX2細(xì)胞COL1A2 mRNA及肝臟組織COL1A2mRNA、NIX mRNA的表達(dá)差異。流式細(xì)胞學(xué)檢測各組間LX2細(xì)胞的凋亡情況。Masson染色評估大鼠肝纖維化情況。結(jié)果:TGFβ1活化LX-2細(xì)胞后α-SMA、NIX蛋白、COL1A2 mRNA表達(dá)分別較對照組各增加60.9%、51.0%、185.... 

【文章來源】：廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：41 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

蛋白免疫印跡法檢測UDCA對TGFβ1刺激下HSC-LX2表達(dá)α-SMA的影響圖

UDCA 對 TGFβ1 刺激下 HSC-LX2 表達(dá) COL1A2 mRNA 的 detection of UDCA on TGFβ1 stimulation of HSC-LX2 e制 HSC-LX2 線粒體 NIX 蛋白的表達(dá)測UDCA對TGFβ1刺激下LX2細(xì)胞表達(dá)NTGFβ1 處理 LX2 細(xì)胞后 NIX 蛋白表達(dá)較對0.1）。UDCA 顯著抑制 TGFβ1 刺激 LX（t=3.783，P＜0.05）。進一步分析顯示，TA 和 NIX 蛋白表達(dá)均增加，呈正相關(guān)（r=0.Fβ1 活化的 LX2 細(xì)胞后，抑制 α-SMA 和 N

qRT-PCR 檢測 UDCA 對 TGFβ1 刺激下 HSC-LX2 表達(dá) COL1A2 mRNA 的影響圖re 2 qRT-PCR detection of UDCA on TGFβ1 stimulation of HSC-LX2 expression of COL1A2AUDCA 抑制 HSC-LX2 線粒體 NIX 蛋白的表達(dá)使用WB檢測UDCA對TGFβ1刺激下LX2細(xì)胞表達(dá)NIX蛋白的影響。 結(jié)果顯示 TGFβ1 處理 LX2 細(xì)胞后 NIX 蛋白表達(dá)較對照組增加 51.0%=3.308，P＜0.1）。UDCA 顯著抑制 TGFβ1 刺激 LX2 細(xì)胞后線粒體 蛋白的表達(dá)（t=3.783，P＜0.05）。進一步分析顯示，TGFβ1 激活 LX2后，α-SMA 和 NIX 蛋白表達(dá)均增加，呈正相關(guān)（r=0.806，P＜0.1）；CA 干預(yù) TGFβ1 活化的 LX2 細(xì)胞后，抑制 α-SMA 和 NIX 蛋白的表達(dá)，相關(guān)（r=0.762，P＜0.1）。


本文編號：2930910