肝纖維化是多種肝損傷因子持續(xù)作用于肝臟引起的損傷修復(fù)過程,其主要特征是肝組織內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的大量沉積引起肝臟結(jié)構(gòu)紊亂和功能異常。研究發(fā)現(xiàn),激活態(tài)肝星狀細(xì)胞（HSCs）是ECM的主要合成和分泌細(xì)胞,因此,抑制肝星狀細(xì)胞的活化,增殖是治療肝纖維化的有效途徑之一。隨著國內(nèi)、外學(xué)者對肝纖維化的深入研究,發(fā)現(xiàn)HSCs活化的過程受DNA甲基化的密切調(diào)控,肝纖維化相關(guān)基因的DNA甲基化水平可能對其轉(zhuǎn)錄和表達(dá)產(chǎn)生重要影響。為進(jìn)一步探索肝纖維化過程中DNA甲基化發(fā)揮作用的新靶點(diǎn),課題組提取原代肝星狀細(xì)胞進(jìn)行RRBS測序,分析發(fā)現(xiàn)小鼠肝纖維化過程中SUN2基因的甲基化水平異常升高,基因發(fā)生異常高甲基化可能引起該基因表達(dá)水平降低甚至沉默,此發(fā)現(xiàn)提示我們,SUN2可能參與肝纖維化過程。SUN2（SAD1/UNC84 domain containing protein-2）屬于SUN結(jié)構(gòu)域蛋白,哺乳動物中,SUN2在細(xì)胞核定位和遷移上起關(guān)鍵調(diào)控作用。另有研究發(fā)現(xiàn),SUN2在乳腺癌,肺癌和中樞神經(jīng)系統(tǒng)胚胎瘤等疾病中呈現(xiàn)低表達(dá)狀態(tài),SUN2通過抑制癌細(xì)胞增殖,促進(jìn)細(xì)胞凋亡等方面發(fā)揮重要功能。但,SUN2在肝... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：101 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中英文縮略詞對照
中文摘要
Abstract
1 前言
2 實(shí)驗(yàn)材料
    2.1 實(shí)驗(yàn)動物
    2.2 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
    2.3 主要試劑
    2.4 儀器與設(shè)備
3 實(shí)驗(yàn)方法
    3.1 小鼠肝纖維化模型的建立
    3.2 灌流小鼠原代肝星狀細(xì)胞
    3.3 肝組織病理學(xué)檢測
    3.4 肝星狀細(xì)胞培養(yǎng)及活化
    3.5 MTT實(shí)驗(yàn)
    3.6 Western Blot
    3.7 Real-time PCR
    3.8 細(xì)胞周期檢測
    3.9 細(xì)胞凋亡檢測
    3.10 細(xì)胞轉(zhuǎn)染RNAi
    3.11 細(xì)胞轉(zhuǎn)染過表達(dá)質(zhì)粒
    3.12 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.1 小鼠肝纖維化過程中SUN2的表達(dá)變化
    4.2 TGF-β1活化的HSC-T6細(xì)胞和LX-2細(xì)胞中SUN2的表達(dá)變化
    4.3 在體過表達(dá)SUN2對CCl4誘導(dǎo)的小鼠肝纖維化進(jìn)程的影響
    4.4 HSC-T6細(xì)胞中過表達(dá)SUN2對細(xì)胞活化,細(xì)胞增殖和細(xì)胞凋亡的影響
    4.5 HSC-T6細(xì)胞中過表達(dá)SUN2對AKT信號通路和細(xì)胞周期相關(guān)蛋白的影響
    4.6 肝纖維化過程中甲基化轉(zhuǎn)移酶DNMT3b調(diào)控SUN2表達(dá)
5 討論
6 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
綜述
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Anti-miRNA-221 sensitizes human colorectal carcinoma cells to radiation by upregulating PTEN[J]. Qi Xue,Kai Sun,Hai-Jun Deng,Shang-Tong Lei,Jing-Qing Dong,Guo-Xin Li.  World Journal of Gastroenterology. 2013(48)



本文編號：2921767