小腸結(jié)腸炎耶爾森菌（Yersinia enterocolitica）是廣泛存在于自然界的一種引起一系列腸道疾病的革蘭氏染色陰性菌,是能在冷藏溫度下生長(zhǎng)的少數(shù)腸道致病菌之一。在許多國(guó)家已經(jīng)證實(shí)由小腸結(jié)腸炎耶爾森菌引起的感染在人群中是比較常見(jiàn)的,屬于全球性疾病。為了研究分離自不同地域的致病性小腸結(jié)腸炎耶爾森菌流行株在免疫原性和蛋白質(zhì)組學(xué)中的差異,我們選擇了一株分離自我國(guó)腹瀉病人的致病性小腸結(jié)腸炎耶爾森菌（生物2型/血清O：9型）和日本的致病性菌株（生物1B/血清O：8型）進(jìn)行了比較研究,旨在揭示因二者在免疫相關(guān)抗原成份以及蛋白質(zhì)組學(xué)方面的不同之處而產(chǎn)生致病力強(qiáng)弱的原因。我們選取小腸結(jié)腸炎耶爾森菌的脂多糖、分泌蛋白（Yops）、膜蛋白以及菌體蛋白作為免疫相關(guān)抗原,首先以單向SDS-PAGE為基礎(chǔ),分析我國(guó)和國(guó)外分離株的差別。結(jié)果發(fā)現(xiàn)這兩個(gè)不同的生物血清型菌株的脂多糖具有不同的免疫反應(yīng)性；二者的Yops具有很大不同,這可以部分解釋兩個(gè)菌株產(chǎn)生致病力大小差異的原因。小腸結(jié)腸炎耶爾森菌的脂多糖和膜蛋白是引起宿主免疫反應(yīng)最主要的免疫原成份,免疫印跡結(jié)果顯示分子量為35kDa和10kDa的條帶為主要免... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)疾病預(yù)防控制中心北京市

【文章頁(yè)數(shù)】：82 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

不同溫度培養(yǎng)條件下提取的脂多糖銀染結(jié)果

分布于12KDa一78KDa之間。Ye92010的脂多糖呈現(xiàn)明顯的帶型分布特征(如圖6.A第1泳道所示)，Ye8629和2006018的脂多糖沒(méi)有明顯的帶型產(chǎn)生，表現(xiàn)為彌散性分布(圖6.B第2泳道和圖6.C第3泳道所示)。Ye92010與Ye8629和2006018菌株的脂多糖之間沒(méi)有交叉反應(yīng)，而Ye8629與2006018菌株LPS存在強(qiáng)烈的交叉反應(yīng)，交叉反應(yīng)區(qū)域約在23KDa一45KDa之間(如圖6.B、C所示)。比較Ye92010和Ye8629分別在25oC和37oC培養(yǎng)后提取的脂多糖W已 Stemblot結(jié)果，發(fā)現(xiàn)同一菌株在兩個(gè)溫度下的雜交條帶的分布和形狀幾乎一致。(如圖6.A、D第1泳道，圖6.B、E第2泳道所示)。

習(xí)疾病頂防控制中心碩1川14究生學(xué)位論的條件下分別誘導(dǎo)出Ye92010、Ye8629的上清蛋白。由電泳圖可見(jiàn)，兩個(gè)菌差異極其明顯，其中Ye92O10誘導(dǎo)出的YoPs與文獻(xiàn)上報(bào)到的結(jié)果一致l6]口’]，8629誘導(dǎo)出的YoPs卻只能觀察到三條帶型，如圖7.A所示。同時(shí)我們也分行了25℃缺ca2+環(huán)境下的誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果不能誘導(dǎo)出YopS。我們對(duì)兩個(gè)菌株編碼YoPs的pYV質(zhì)粒上的ya副和virF基因進(jìn)行了PCR，發(fā)現(xiàn)兩個(gè)菌株的yadA基因片段不在同一分子量位置，如圖7.B第1和第道所示，測(cè)序比對(duì)結(jié)果顯示少adA基因共測(cè)出752個(gè)堿基，兩個(gè)菌株有14個(gè)不一致，Ye92O10在241一285位堿基和452一4%位堿基發(fā)生較大部分缺失，8所示。飛)irF基因共測(cè)出475個(gè)堿基，其中有5個(gè)堿基不一致，如圖9所示。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]O∶9血清型小腸結(jié)腸炎耶爾森菌感染病理學(xué)特征研究[J]. 李振軍,邱海燕,王鑫,景懷琦.  中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào). 2008(05)
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本文編號(hào)：2914464