間充質干細胞的免疫調控在治療肝衰竭中的作用及機制探討
發(fā)布時間：2020-12-05 15:03
間充質干細胞（Mesenchymal stem cells,MSCs）是具有自我復制和多向分化潛能的一類多能干細胞。目前成人骨髓是MSCs的主要來源。由于骨髓間充質干細胞（bone marrow mesenchymal stem cells, BM-MSCs）獲取須行骨髓穿刺術,給供者造成一定的痛苦,且BM-MSCs的增殖和分化潛能隨著供者年齡的增大而下降,因此人們把目光投向了臍帶間充質干細胞（umbilical cord mesenchymal stem cells, UC-MSCs）.本文通過對MSCs生物學特征、免疫學特性及其在臨床上的初步應用,爭取為臨床治療慢性肝衰竭找到一條有效的途徑。本文第一部分首先建立從小鼠骨髓和從人臍帶中分離純化MSCs的方法,然后分別研究它們的生物學特征和免疫學特性。結果顯示,兩種來源不同MSCs,形態(tài)相似,小鼠BM-MSCs表達CD44,Sca-1,不表達CD45,CD34, CD11c,CD11b,H-2,I-A,而UC-MSCs表達CD73、CD59、HLA-A,B,C、CD44,不表達CD31、CD34、CD45、CD80、CD83、CD86、...
【文章來源】：蘇州大學江蘇省
【文章頁數(shù)】：99 頁
【學位級別】：博士
【部分圖文】：
C57BL/6骨髓來源的間充質干細胞圖1-1：為普通倒置顯微鏡下觀察結果，放大倍數(shù)均為100×
圖 1-2：C57BL/6 骨髓來源的間充質干細胞表面標志鑒定圖 1-2 注：其中細線所示為同型對照的熒光強度，粗線所示為表面標志的熒光強度。結果顯示 CD45，CD34， CD11c，CD11b，H-2，I-A 陰性，CD44，Sca-1 陽性3、小鼠 BM-MSCs 的細胞分化結果小鼠 BM-MSCs 經(jīng)誘導第 14~20 天后分別向成脂細胞和成骨細胞分化。在成骨細胞中可見大小不一的紅色顆粒（Alizarin Red S 染色）（圖 1-3 B），提示有礦化基質沉積，而對照組（圖 1-3 A）Alizarin Red S 染色陰性。成脂細胞中（圖 1-3 D）可見胞漿內(nèi)脂滴形成，油紅-O 染色陽性，而而對照組（圖 1-3 C）油紅-O 染色陰性。
圖 1-3：小鼠骨髓來源的間充質干細胞分化形態(tài)觀察圖 1-3 注：所有圖片為普通倒置顯微鏡下觀察結果，放大倍數(shù)均為 100×。圖中顯示細胞為第五代的小鼠骨髓來源的間充質干細胞. 脂肪分化為 Oil Red O 染色；成骨分化為 Alizarin Red S 染色。A 圖及 B 圖分別為成骨分化的對照組和成骨分化組. 圖及 D 圖分別為脂肪分化的對照組和脂肪分化組.第二節(jié) 人臍帶間充質干細胞的分離、培養(yǎng)及生物學性狀研究一、實驗試劑和耗材1、材料與設備DMEM 高糖培養(yǎng)基 GIBICO 公司胎牛血清 FBS GIBICO 公司氯化鈉 Amresco 公司
【參考文獻】：
期刊論文
[1]慢性肝功能衰竭時骨髓間充質干細胞胞膜CXCR4的表達及影響因素[J]. 黃小平,秦愛蘭,趙衛(wèi)峰,江敏華,羅二平,吳紹宏,甘建和. 中國組織工程研究與臨床康復. 2009(40)
[2]肝衰竭最新研究熱點和展望[J]. 王宇明. 內(nèi)科急危重癥雜志. 2009(03)
[3]自體骨髓干細胞移植治療失代償期肝硬化[J]. 王娟,邵麗春,郭慶,孔欣,朱丹,李曉惠. 中國組織工程研究與臨床康復. 2007(46)
[4]肝衰竭診療指南[J]. 李蘭娟. 中華內(nèi)科雜志. 2006(12)
[5]介入治療兒童先天性心臟病586例[J]. 王震,解啟蓮,張密林,高磊,額爾敦高娃,譚慧蓮,劉凌,朱曉麗. 實用兒科臨床雜志. 2006(19)
[6]臍血間質干細胞的基礎研究和應用進展[J]. 曹勇,宋來君,楊波. 鄭州大學學報(醫(yī)學版). 2006(02)
[7]人MBL糖識別域在大腸桿菌中的表達、純化及鑒定[J]. 盧曉,朱平,張麗蕓,劉瑩,陳政良. 免疫學雜志. 2005(06)
[8]人臍帶血間充質干細胞體外誘導分化為心肌細胞的實驗研究[J]. 湯天軍,楊波,楊漢東,張有順,胡禮儀,李東鋒,張繼紅. 實用醫(yī)學雜志. 2005(21)
[9]先天性心臟病介入治療的嚴重并發(fā)癥分析及其防治[J]. 蔣世良,黃連軍,徐仲英,趙世華,凌堅,鄭宏,張戈軍,張巖,戴汝平,劉延玲,王云. 中國循環(huán)雜志. 2005(01)
[10]四氯化碳綜合法誘導大鼠肝硬化模型方法的探討[J]. 金峰,袁芳,薛建設,張捷,張志堅,余英豪. 福建醫(yī)藥雜志. 2003(05)
博士論文
[1]骨髓間充質干細胞移植對急性肝衰竭大鼠腸源性內(nèi)毒素血癥的治療作用及機制研究[D]. 郝彥琴.山西醫(yī)科大學 2010
本文編號：2899642
【文章來源】：蘇州大學江蘇省
【文章頁數(shù)】：99 頁
【學位級別】：博士
【部分圖文】：
C57BL/6骨髓來源的間充質干細胞圖1-1：為普通倒置顯微鏡下觀察結果，放大倍數(shù)均為100×
圖 1-2：C57BL/6 骨髓來源的間充質干細胞表面標志鑒定圖 1-2 注：其中細線所示為同型對照的熒光強度，粗線所示為表面標志的熒光強度。結果顯示 CD45，CD34， CD11c，CD11b，H-2，I-A 陰性，CD44，Sca-1 陽性3、小鼠 BM-MSCs 的細胞分化結果小鼠 BM-MSCs 經(jīng)誘導第 14~20 天后分別向成脂細胞和成骨細胞分化。在成骨細胞中可見大小不一的紅色顆粒（Alizarin Red S 染色）（圖 1-3 B），提示有礦化基質沉積，而對照組（圖 1-3 A）Alizarin Red S 染色陰性。成脂細胞中（圖 1-3 D）可見胞漿內(nèi)脂滴形成，油紅-O 染色陽性，而而對照組（圖 1-3 C）油紅-O 染色陰性。
圖 1-3：小鼠骨髓來源的間充質干細胞分化形態(tài)觀察圖 1-3 注：所有圖片為普通倒置顯微鏡下觀察結果，放大倍數(shù)均為 100×。圖中顯示細胞為第五代的小鼠骨髓來源的間充質干細胞. 脂肪分化為 Oil Red O 染色；成骨分化為 Alizarin Red S 染色。A 圖及 B 圖分別為成骨分化的對照組和成骨分化組. 圖及 D 圖分別為脂肪分化的對照組和脂肪分化組.第二節(jié) 人臍帶間充質干細胞的分離、培養(yǎng)及生物學性狀研究一、實驗試劑和耗材1、材料與設備DMEM 高糖培養(yǎng)基 GIBICO 公司胎牛血清 FBS GIBICO 公司氯化鈉 Amresco 公司
【參考文獻】：
期刊論文
[1]慢性肝功能衰竭時骨髓間充質干細胞胞膜CXCR4的表達及影響因素[J]. 黃小平,秦愛蘭,趙衛(wèi)峰,江敏華,羅二平,吳紹宏,甘建和. 中國組織工程研究與臨床康復. 2009(40)
[2]肝衰竭最新研究熱點和展望[J]. 王宇明. 內(nèi)科急危重癥雜志. 2009(03)
[3]自體骨髓干細胞移植治療失代償期肝硬化[J]. 王娟,邵麗春,郭慶,孔欣,朱丹,李曉惠. 中國組織工程研究與臨床康復. 2007(46)
[4]肝衰竭診療指南[J]. 李蘭娟. 中華內(nèi)科雜志. 2006(12)
[5]介入治療兒童先天性心臟病586例[J]. 王震,解啟蓮,張密林,高磊,額爾敦高娃,譚慧蓮,劉凌,朱曉麗. 實用兒科臨床雜志. 2006(19)
[6]臍血間質干細胞的基礎研究和應用進展[J]. 曹勇,宋來君,楊波. 鄭州大學學報(醫(yī)學版). 2006(02)
[7]人MBL糖識別域在大腸桿菌中的表達、純化及鑒定[J]. 盧曉,朱平,張麗蕓,劉瑩,陳政良. 免疫學雜志. 2005(06)
[8]人臍帶血間充質干細胞體外誘導分化為心肌細胞的實驗研究[J]. 湯天軍,楊波,楊漢東,張有順,胡禮儀,李東鋒,張繼紅. 實用醫(yī)學雜志. 2005(21)
[9]先天性心臟病介入治療的嚴重并發(fā)癥分析及其防治[J]. 蔣世良,黃連軍,徐仲英,趙世華,凌堅,鄭宏,張戈軍,張巖,戴汝平,劉延玲,王云. 中國循環(huán)雜志. 2005(01)
[10]四氯化碳綜合法誘導大鼠肝硬化模型方法的探討[J]. 金峰,袁芳,薛建設,張捷,張志堅,余英豪. 福建醫(yī)藥雜志. 2003(05)
博士論文
[1]骨髓間充質干細胞移植對急性肝衰竭大鼠腸源性內(nèi)毒素血癥的治療作用及機制研究[D]. 郝彥琴.山西醫(yī)科大學 2010
本文編號：2899642
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