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間充質干細胞的免疫調控在治療肝衰竭中的作用及機制探討

發(fā)布時間:2020-12-05 15:03
  間充質干細胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)是具有自我復制和多向分化潛能的一類多能干細胞。目前成人骨髓是MSCs的主要來源。由于骨髓間充質干細胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BM-MSCs)獲取須行骨髓穿刺術,給供者造成一定的痛苦,且BM-MSCs的增殖和分化潛能隨著供者年齡的增大而下降,因此人們把目光投向了臍帶間充質干細胞(umbilical cord mesenchymal stem cells, UC-MSCs).本文通過對MSCs生物學特征、免疫學特性及其在臨床上的初步應用,爭取為臨床治療慢性肝衰竭找到一條有效的途徑。本文第一部分首先建立從小鼠骨髓和從人臍帶中分離純化MSCs的方法,然后分別研究它們的生物學特征和免疫學特性。結果顯示,兩種來源不同MSCs,形態(tài)相似,小鼠BM-MSCs表達CD44,Sca-1,不表達CD45,CD34, CD11c,CD11b,H-2,I-A,而UC-MSCs表達CD73、CD59、HLA-A,B,C、CD44,不表達CD31、CD34、CD45、CD80、CD83、CD86、... 

【文章來源】:蘇州大學江蘇省

【文章頁數(shù)】:99 頁

【學位級別】:博士

【部分圖文】:

間充質干細胞的免疫調控在治療肝衰竭中的作用及機制探討


C57BL/6骨髓來源的間充質干細胞圖1-1:為普通倒置顯微鏡下觀察結果,放大倍數(shù)均為100×

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圖 1-2:C57BL/6 骨髓來源的間充質干細胞表面標志鑒定圖 1-2 注:其中細線所示為同型對照的熒光強度,粗線所示為表面標志的熒光強度。結果顯示 CD45,CD34, CD11c,CD11b,H-2,I-A 陰性,CD44,Sca-1 陽性3、小鼠 BM-MSCs 的細胞分化結果小鼠 BM-MSCs 經(jīng)誘導第 14~20 天后分別向成脂細胞和成骨細胞分化。在成骨細胞中可見大小不一的紅色顆粒(Alizarin Red S 染色)(圖 1-3 B),提示有礦化基質沉積,而對照組(圖 1-3 A)Alizarin Red S 染色陰性。成脂細胞中(圖 1-3 D)可見胞漿內(nèi)脂滴形成,油紅-O 染色陽性,而而對照組(圖 1-3 C)油紅-O 染色陰性。

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圖 1-3:小鼠骨髓來源的間充質干細胞分化形態(tài)觀察圖 1-3 注:所有圖片為普通倒置顯微鏡下觀察結果,放大倍數(shù)均為 100×。圖中顯示細胞為第五代的小鼠骨髓來源的間充質干細胞. 脂肪分化為 Oil Red O 染色;成骨分化為 Alizarin Red S 染色。A 圖及 B 圖分別為成骨分化的對照組和成骨分化組. 圖及 D 圖分別為脂肪分化的對照組和脂肪分化組.第二節(jié) 人臍帶間充質干細胞的分離、培養(yǎng)及生物學性狀研究一、實驗試劑和耗材1、材料與設備DMEM 高糖培養(yǎng)基 GIBICO 公司胎牛血清 FBS GIBICO 公司氯化鈉 Amresco 公司

【參考文獻】:
期刊論文
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博士論文
[1]骨髓間充質干細胞移植對急性肝衰竭大鼠腸源性內(nèi)毒素血癥的治療作用及機制研究[D]. 郝彥琴.山西醫(yī)科大學 2010



本文編號:2899642

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