目的:目前隨著非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)在我國發(fā)病率逐漸升高,尤其是美國等西方國家,成為慢性肝病最常見的原因,在中國上海、廣州、香港等發(fā)達(dá)地區(qū)的患病率也呈上升趨勢(shì)。非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)作為該疾病譜中的關(guān)鍵階段,能夠通過無創(chuàng)性手段在早期診斷出NASH是非常必要的。近年來隨著代謝組學(xué)的發(fā)展,利用代謝組學(xué)及其研究平臺(tái)對(duì)NASH的代謝輪廓進(jìn)行分析成為熱點(diǎn),本研究基于此,運(yùn)用串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù),研究代謝組學(xué)在NASH與非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver,NAFL)血液中的差異,尋找可用于早期診斷的潛在代謝標(biāo)志物。方法:收集NASH及NAFL患者各30例,運(yùn)用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)技術(shù),對(duì)采集的干血濾紙片樣品進(jìn)行檢測(cè),通過主成分分析法(PCA)及正交偏最小二成分析法(OPLS)對(duì)獲取的代謝數(shù)據(jù)進(jìn)行多維統(tǒng)計(jì)分析,并構(gòu)建PCA及OPLS-DA模型。利用OPLS-DA模型所得的變量投影重要性值(variable importance in the projection,VIP)的大小,初步篩選代謝物,結(jié)合獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)及Mann-Whitney U檢驗(yàn)進(jìn)一步篩選潛在代謝標(biāo)志物,同時(shí)通過非參數(shù)檢驗(yàn)分析血代謝組學(xué)的變化。將篩選的代謝物使用二元Logistic回歸后行ROC分析,計(jì)算曲線下面積(AUC)評(píng)估它們對(duì)NASH診斷的價(jià)值。結(jié)果:NASH組和NAFL組血液代謝物比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,兩組之間共計(jì)有30種代謝物有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,p0.05�？梢姳彼帷⑻於０�、天冬氨酸、半胱氨酸、同型半胱氨酸、谷氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、鳥氨酸、羥丁�；鈮A、甲硫氨酸/苯丙氨酸、鳥氨酸/瓜氨酸、丙�；鈮A/乙酰基肉堿、異戊酰基肉堿/乙�；鈮A、羥異戊�；鈮A/辛酰基肉堿、羥異戊酰基肉堿/游離肉堿、辛酰基肉堿/葵�；鈮A水平在NASH患者中升高,而戊二�；鈮A、肉豆蔻二�；鈮A、肉豆蔻烯�；鈮A、精氨酸/鳥氨酸、甲硫氨酸/亮氨酸、苯丙氨酸/絡(luò)氨酸、乙酰基肉堿/游離肉堿、戊二�；鈮A/羥異戊�；鈮A、戊二�；鈮A/棕櫚酰基肉堿、肉豆蔻烯酰基肉堿/棕櫚�；鈮A、丙二�；鈮A、己二�；鈮A、戊二�；鈮A/辛酰基肉堿在NASH組下降。患者血中總共檢測(cè)了58種代謝物,進(jìn)行多維統(tǒng)計(jì)分析,構(gòu)建PCA(R~2X=0.468,Q~2=0.196)及OPLS-DA模型(R~2X=0.653,R~2Y=0.74,Q~2=0.454),根據(jù)VIP1.5值選出了6種在NAFL組與NASH組見有顯著差異特征代謝物,結(jié)合獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)及Mann-Whitney U檢驗(yàn),最終篩選出Leu、Ala、Asp、Glu、Orn這5種差異代謝物,并且其AUC均大于0.6,聯(lián)合診斷后AUC達(dá)0.932,靈敏度為83.3%,特異度為93.3%。結(jié)論:1、運(yùn)用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù),檢測(cè)NAFL組及NASH組各30例患者的血標(biāo)本,進(jìn)行t檢驗(yàn)或非參數(shù)檢驗(yàn),發(fā)現(xiàn)氨基酸、酰基肉堿的代謝狀況在兩組之間存在差異。2、通過構(gòu)建OPLS-DA模型,初步選出了6個(gè)對(duì)比NAFL組差異顯著的代謝物質(zhì),進(jìn)行t檢驗(yàn)或非參數(shù)檢驗(yàn),最終選出Leu、Ala、Asp、Glu、Orn5種潛在代謝標(biāo)志物,其聯(lián)合診斷的AUC為0.932,具有良好診斷價(jià)值。
【學(xué)位單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R575.5
【部分圖文】：

141C圖 1 代謝物的 PCA、OPLS-DA 積分矩陣圖。圖中每一個(gè)點(diǎn)代表 1 個(gè)樣本，a 為 NASH 組，b為 NAFL 組。1A PCA 積分矩陣圖，1B OPLS-DA 積分矩陣圖，1C 置換檢驗(yàn)結(jié)果。3.1 PCA 模型構(gòu)建及數(shù)據(jù)分析根據(jù) NASH 組及 NAFL 組患者代謝物檢測(cè)數(shù)據(jù)，進(jìn)行 PCA 后，可以得到擁有4 個(gè)主成分的 PCA 模型，即 PCA 得分圖（score scatter plot）(圖 1A)，其中每個(gè)點(diǎn)代表一個(gè)原始變量，橫坐標(biāo)值代表該變量與第一主成分（即第一大變量）之間的相關(guān)系數(shù)，縱坐標(biāo)值代表該變量與第二主成分之間的相關(guān)系數(shù)，當(dāng)某一變量越接
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2879936