發(fā)布時(shí)間：2020-11-03 20:04

　　 目的分析Gankyrin參與肝細(xì)胞炎癥及惡性轉(zhuǎn)化的機(jī)制,探討其在臨床病理學(xué)診斷及治療的意義。 材料和方法共選取2000年1月-2009年12月在我院行手術(shù)切除,福爾馬林固定、石蠟包埋的肝組織404例,具體分組如下：第一組：選取2000年1月-2005年12月在我院行肝細(xì)胞癌手術(shù)切除的病例,進(jìn)行隨訪,共獲得完整隨訪資料194例,分析Gankyrin的表達(dá)與預(yù)后的關(guān)系；第二組：隨機(jī)法選取2006年1月-2008年12月在我院行肝細(xì)胞癌手術(shù)切除的并具有完整臨床病理信息的病例118例,兩組病例共獲得肝細(xì)胞癌312例；第三組：復(fù)習(xí)上述病例的病理切片,找出伴有非典型增生結(jié)節(jié)(區(qū)域)的病例共49例,再?gòu)?004年7月至2009年12月在我院行手術(shù)切除、病理診斷為非典型結(jié)節(jié)性增生的病例中,通過(guò)隨機(jī)數(shù)字法選取58例,共獲得非典型增生病例107例；第四組：隨機(jī)數(shù)字法選取我院2009年行肝海綿狀血管瘤的病例33例作為正常肝組織對(duì)照。上述4組病例均進(jìn)行Gankyrin免疫組化染色,分析其表達(dá)水平與臨床病理學(xué)特征的相關(guān)性。選取手術(shù)切除新鮮肝細(xì)胞癌及對(duì)應(yīng)癌旁組織的標(biāo)本23例,進(jìn)行Westernblot及RT-PCR分析,檢測(cè)組織中Gankyrin的蛋白質(zhì)及mRNA表達(dá)水平。通過(guò)干涉肝癌細(xì)胞系HepG2細(xì)胞的Gankyrin表達(dá),進(jìn)行軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)、平板克隆形成實(shí)驗(yàn)、遷移實(shí)驗(yàn)及生長(zhǎng)曲線的實(shí)驗(yàn)研究,觀察Gankyrin對(duì)肝癌細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化、增殖及遷移能力的影響；在體外細(xì)胞培養(yǎng)中,通過(guò)干涉及過(guò)表達(dá)Gankyrin,檢測(cè)在正常培養(yǎng)或(?)NF-α刺激下,Gankyrin對(duì)NF-KB活性的影響。 結(jié)果1).404例肝組織中Gankyrin的免疫組化結(jié)果以及Westernblot、RT-PCR結(jié)果顯示：Gankyrin高表達(dá)于肝細(xì)胞癌及非典型增生結(jié)節(jié),分布于細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞核；中等表達(dá)于癌旁肝組織,僅分布于細(xì)胞質(zhì)；在無(wú)慢性炎癥的肝海綿狀血管瘤旁的肝組織內(nèi)表達(dá)呈陰性。4組病例間,除肝細(xì)胞癌與非典型增生組無(wú)差異外,均有顯著性差異(p=0.000)；2).癌旁肝組織中Gankyrin的表達(dá)量依有無(wú)慢性肝炎或肝硬化而不同,除慢性肝炎與肝硬化之間無(wú)差異(p=0.094)外,各組間差異均有顯著性意義(p0.01)。3).在肝細(xì)胞癌組中,Gankyrin的細(xì)胞核表達(dá)水平與肝內(nèi)轉(zhuǎn)移(p=0.03745)以及癌旁的炎癥及硬化情況(p=0.0399)呈正相關(guān),細(xì)胞內(nèi)總的Gankyrin表達(dá)量與癌旁肝炎及肝硬化情況(p=0.03489)呈正相關(guān),并與肝細(xì)胞癌的Top-Ⅱα的表達(dá)(p=0.03091)呈正相關(guān),而Gankyrin的細(xì)胞質(zhì)表達(dá)僅與Top-Ⅱα的表達(dá)呈正相關(guān)(p=0.03091)。 4).在細(xì)胞水平試驗(yàn)中,干涉Gankyrin的表達(dá),HepG2細(xì)胞的克隆形成能力及增殖能力下降,但遷移能力不受影響；在正常培養(yǎng)或TNF-α刺激情況下,干涉Gankyrin可使NF-kB的活性增高,而過(guò)表達(dá)Gankyrin則可抑制NF-kB的活性。5).肝癌中Gankyrin的表達(dá)水平與預(yù)后無(wú)相關(guān)性。 結(jié)論1). Gankyrin具有對(duì)肝細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化能力,并能促進(jìn)肝癌細(xì)胞的增殖；2). Gankyrin的促癌作用發(fā)生在惡性轉(zhuǎn)化的早期,而對(duì)腫瘤的進(jìn)展作用不顯著；3). Gankyrin的表達(dá)部位的差異可作為惡性轉(zhuǎn)化的指征,在病理診斷中鑒別增生與非典型增生；4). Gankyrin可能參與炎癥過(guò)程,且與TNF-α/NF-kB信號(hào)通路有關(guān)。
【學(xué)位單位】：中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位年份】：2010
【中圖分類】：R735.7;R575.2
【部分圖文】：

位居第三‘2’。全球每年約有6.2只105例新發(fā)病例，約6.0又105個(gè)患者死于肝細(xì)胞癌【，’。Hcc的流行病學(xué)特征隨地域而不同，在每年的新發(fā)病例中，發(fā)展中國(guó)家約占85%，僅中國(guó)就占55%‘”(圖1)。在中國(guó)，男性發(fā)病率約為35.2/105，女性為一3.32105。流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，HCC的獨(dú)特之處在于它有明確的慢性肝臟損傷的背景，如慢性乙型(HBV感染)、丙型(HCV感染)肝炎，酒精性肝病，非酒精性脂肪肝，以及少見的遺傳性血色病，al一抗胰蛋白酶缺乏以及自身免疫性肝病等【”。所有導(dǎo)致肝炎及肝硬化的危險(xiǎn)因素都是Hcc的危險(xiǎn)因素【3’，70一90%的HCC患者有肝炎或肝硬化的病史【’

及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)急 (endoplasmieretieulumstress，ER一stress)狀態(tài)，激活與凋亡-增殖相關(guān)的信號(hào)通路，使肝細(xì)胞的增殖與凋亡失衡，肝細(xì)胞過(guò)度增生，并進(jìn)一步呈非典型增生而最終誘發(fā)癌變(圖2)。鄉(xiāng)丁二二二)\乙二二二)獷一/尸孟二二卜只火\蘭矍產(chǎn)一又二塑笙夕—火夔竺夕、一一一一一一一一、尸一一一一一違巫三三)圖2:HCC的發(fā)生機(jī)制(參考文獻(xiàn)l)在慢性肝炎肝硬化誘發(fā)HCC的進(jìn)程中，眾多的信號(hào)通路參與其中，如MAPK/刃呵K、51’ AT-3、PI3K、。一Raf-1尼rkZ及NF一KB通路等，其中最為關(guān)鍵的當(dāng)屬NF一沼通路(圖3)。NF一沼通路被公認(rèn)為炎癥相關(guān)的標(biāo)志性信號(hào)通路，也是聯(lián)系炎癥及腫瘤的紐帶。核轉(zhuǎn)錄因子NF一祀在介導(dǎo)先天性免疫與后天性炎癥反應(yīng)的復(fù)雜的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中起主導(dǎo)作用。最早發(fā)現(xiàn)NF一KB是B細(xì)胞K輕鏈增強(qiáng)子的B位點(diǎn)的特異性核因子，并由此得名。NF一KB是Rel家族成員的異源性二聚體，包括:RelA，RelB，e一Rel

體的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及實(shí)驗(yàn)對(duì)象的病理生理過(guò)程相關(guān)。口口尸..封封l畫到..圖3:近年來(lái)，一種新的NF一沼信號(hào)通路(參考文獻(xiàn)18)HCc密切相關(guān)的癌蛋白Gank州n引起廣泛關(guān)注。
【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 ;Delayed hepatocarcinogenesis through antiangiogenic intervention in the nuclear factor-kappa B activation pathway in rats[J];Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International;2010年02期

2 韋立新;石懷銀;;肝癌前病變與高分化肝癌的病理診斷與鑒別[J];中華病理學(xué)雜志;2006年02期

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本文編號(hào)：2869039