發(fā)布時(shí)間：2020-10-18 06:46

　　 目的：了解免疫耐受期慢性HBV感染者肝臟病理損傷與機(jī)體細(xì)胞免疫狀況的關(guān)系。 方法：分析98例免疫耐受期慢性HBV感染者肝臟病理及臨床特征，其中30例肝臟纖維化分期為S0的感染者同時(shí)進(jìn)行外周血及肝臟免疫組化檢測，外周血檢測包括使用流式細(xì)胞儀檢測T淋巴細(xì)胞亞群數(shù)量、mDC/pDC數(shù)量及其表面活性物質(zhì)CD86和CD83的表達(dá)、CD4~+及CD8~+T淋巴細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子INF-γ、IL-4的檢測、血清IL-10及IL-12的檢測；肝臟免疫組化檢測包括CD4~+及CD8~+T淋巴細(xì)胞、CD83~+的樹突狀細(xì)胞及肝內(nèi)IL-10表達(dá)情況。 結(jié)果： 1．94.9％(93/98)的免疫耐受期慢性HBV感染者肝臟存在炎癥反應(yīng)，分別為G1(65.31％)和G2(29.59％)；42.86％感染者肝臟存在纖維化，其中23.47％為S1，14.29％為S2，5.1％為S3，未發(fā)現(xiàn)有肝硬化者。ALT≤20IU/L的感染者肝臟炎癥程度低于ALT介于20～40IU/L組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)，ALT介于20～40IU/L的感染者肝臟纖維化分期明顯高于ALT≤20IU/L組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。 2．免疫耐受期慢性HBV感染者外周血CD8~+T淋巴細(xì)胞數(shù)量高于健康人和免疫清除期，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(分別p＜0.05，p＜0.01)；耐受期感染者外周血CD4~+/CD8~+比值低于清除期和健康人，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(分別p＜0.05，p＜0.01)。耐受期感染者外周血mDC百分比低于健康人，但高于清除期，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(分別p＜0.05，p＜0.01)，其mDC表面CD86表達(dá)率高于健康人，但低于清除期，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)；耐受期外周血pDC百分比低于健康人，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.01)，與清除期結(jié)果相近，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)，其pDC表面CD86表達(dá)率高于健康人和清除期，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)；耐受期感染者mDC和pDC表面CD83表達(dá)率極低，與其他各組結(jié)果相近，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。耐受期感染者外周血Th1和Th2高于健康人，但低于清除期，與清除期比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.01)；耐受期感染者外周血Tc1和Tc2低于清除期，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。耐受期感染者血清IL-12水平高于健康人，但低于清除期，與清除期比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)；耐受期感染者血清IL-10水平高于健康人和清除期感染者，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。 3．耐受期慢性HBV感染者肝組織CD4~+和CD8~+T淋巴細(xì)胞數(shù)量多于健康人，但明顯少于清除期，與清除期比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)；耐受期感染者肝內(nèi)CD4~+/CD8~+比值高于清除期和健康人，與清除期比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.01)；耐受期感染者肝內(nèi)CD83~+成熟DC與健康人結(jié)果相近，但明顯低于清除期，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)；耐受期感染者肝內(nèi)IL-10表達(dá)略低于健康人，高于清除期，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。 結(jié)論： 1、絕大部分免疫耐受期慢性HBV感染者肝臟存在輕度炎癥反應(yīng)，部分患者已出現(xiàn)纖維化；ALT處于正常范圍內(nèi)相對高水平的患者出現(xiàn)纖維化的可能性增加，ALT似乎并不是判定肝臟損傷的敏感指標(biāo)，應(yīng)盡量動(dòng)員肝穿檢查以準(zhǔn)確判定病情，并加強(qiáng)隨訪。 2、耐受期慢性HBV感染者肝內(nèi)CD8~+T淋巴細(xì)胞普遍增多，提示其體內(nèi)存在針對HBV的免疫反應(yīng)，但由于尚不清楚的原因這種反應(yīng)較弱，不足以清除HBV，但卻可能引起肝臟輕度炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致持續(xù)的肝損傷，使得肝病隱匿進(jìn)展。 3、耐受期慢性HBV感染者外周血DC亞群數(shù)量減少，在存在高載量HBV刺激的情況下DC表面的共刺激分子并沒有上調(diào)表達(dá)，這種數(shù)量和功能的缺陷可能是耐受期患者的發(fā)病機(jī)制之一。而造成上述缺陷的可能機(jī)制包括骨髓造血干細(xì)胞的DC分化誘導(dǎo)障礙、肝臟誘導(dǎo)DC凋亡、HBV感染DC而下調(diào)其表面標(biāo)志物的表達(dá)、DC在機(jī)體中再分配到肝臟發(fā)揮效應(yīng)等。通過肝組織成熟DC的研究發(fā)現(xiàn)，慢性乙肝患者肝臟并不缺乏成熟DC，尤其免疫清除期患者明顯增多，而其外周血DC則是明顯減少的，此結(jié)果更傾向于外周DC的減少是由于重新分布到肝臟的緣故。耐受期患者肝組織內(nèi)成熟DC浸潤與健康人相似，但是明顯少于清除期，因此提示肝內(nèi)缺乏成熟DC可能是耐受期患者針對HBV的CTL反應(yīng)缺乏或減弱的重要原因，因而僅表現(xiàn)為肝臟輕度炎癥反應(yīng)，而這種缺乏更多的可能性是在DC遷移過程中缺乏相應(yīng)的趨化因子及其受體或粘附分子等造成。 4、對外周血Th1/Th2細(xì)胞反應(yīng)的研究顯示，免疫清除期患者Th1型反應(yīng)較強(qiáng)，而耐受期明顯減弱，血清細(xì)胞因子的檢測也顯示清除期患者更傾向于較強(qiáng)的Th1反應(yīng)，而耐受期患者更傾向于Th2反應(yīng)。肝臟IL-10檢測結(jié)果顯示耐受期患者與健康人的微環(huán)境更為接近，處于一個(gè)相對免疫耐受的狀態(tài)，這種微環(huán)境不利于DC的成熟、不利于激發(fā)較強(qiáng)的細(xì)胞免疫反應(yīng)，因此肝臟表現(xiàn)為輕度炎癥反應(yīng)；但同時(shí)這也可能是機(jī)體的自我保護(hù)策略，以盡量避免因清除大量HBV而帶來廣泛的肝細(xì)胞損傷。 5、通過外周血和肝臟CD4~+和CD8~+T淋巴細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞等的研究顯示耐受期HBV感染者肝臟的確存在炎癥反應(yīng)，而肝臟內(nèi)成熟DC的缺乏以及微環(huán)境中IL-10水平較高又傾向于抑制炎癥反應(yīng)的程度，因此表現(xiàn)為耐受期HBV感染者的肝臟大多存在炎癥反應(yīng)，但多為輕度炎癥。 6、通過比較外周血和肝臟各項(xiàng)免疫指標(biāo)提示，雖然外周血的相關(guān)免疫指標(biāo)檢測并不能代表肝臟的實(shí)際情況，但是部分指標(biāo)與肝臟情況類似(如IL-10水平)，部分指標(biāo)(CD8~+T淋巴細(xì)胞、mDC、pDC)可以間接的推測肝臟的情況，因此部分外周血的相關(guān)檢測在一定程度上可以代表肝臟的情況，具有一定的臨床應(yīng)用價(jià)值。
【學(xué)位單位】：中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位年份】：2007
【中圖分類】：R512.62
【部分圖文】：

圖1外周血DC亞群的流式點(diǎn)圖注:Rl圈定的是外周血單個(gè)核細(xì)胞，R2圈定的是Linl一HLA一DR+的DC，R3圈定的分別是Linx一甩A一DR+enlxe+的mne和Linl一HLA一oR+eD123+的poe。b幾飛一一，曰a亡弓日·:蕊.幾二.安山。，幼汽.帳令.=.山喻豁。?一。一O一口SQ口日迪1611CDll62C人PC16316悶16316悶l6l淤未。。一l盞。。一CDI62C人PC

除期患者肝內(nèi)CD4+T淋巴細(xì)胞明顯多于其他各組，匯管區(qū)可見大量浸潤，肝小葉內(nèi)壞死灶也見明顯增多，與其它各組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。表2及圖1一4為各組肝臟內(nèi)CD4+T淋巴細(xì)胞浸潤情況，表2慢性HBv感染者肝組織內(nèi)cD4+T淋巴細(xì)胞浸潤情況組別例數(shù)匯管區(qū)(個(gè)數(shù)/匯管區(qū))肝小葉(個(gè)數(shù)/hpf)健康組 55.89士2.94“1.76士0.72”免疫耐受期 309.06士5.32’3.67士2.44’非活動(dòng)復(fù)制期 1010.37士5.67“4.13士2.36’免疫清除期 1027.23士 7.017.76士3.58方差齊性檢驗(yàn):擴(kuò)匯軀 =7.6679，xZ肝小葉 =7.7393，，均p>0.05。各組間均數(shù)比較采用方差分析，F(xiàn)匯，二29.8518，F(xiàn)肝小葉 =8.2021，均p<0.01。“與免疫清除期組比較p<0.01。圖1健康人肝組織內(nèi)CD4+T淋巴細(xì)胞

非活動(dòng)復(fù)制期慢性HBV感染者肝組織內(nèi)CD4十T淋巴細(xì)胞，免疫組化AEC染色(400x)，匯管區(qū)及肝小葉內(nèi)紅色陽性細(xì)胞稍增多
【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 黃亞琴;廣西桂北地區(qū)HBV基因型在HBV相關(guān)性肝癌及HBV感染不同免疫狀態(tài)中的分布[D];桂林醫(yī)學(xué)院;2011年

本文編號(hào)：2845956