目的：了解免疫耐受期慢性HBV感染者肝臟病理損傷與機體細胞免疫狀況的關系。 方法：分析98例免疫耐受期慢性HBV感染者肝臟病理及臨床特征，其中30例肝臟纖維化分期為S0的感染者同時進行外周血及肝臟免疫組化檢測，外周血檢測包括使用流式細胞儀檢測T淋巴細胞亞群數(shù)量、mDC/pDC數(shù)量及其表面活性物質(zhì)CD86和CD83的表達、CD4~+及CD8~+T淋巴細胞細胞內(nèi)細胞因子INF-γ、IL-4的檢測、血清IL-10及IL-12的檢測；肝臟免疫組化檢測包括CD4~+及CD8~+T淋巴細胞、CD83~+的樹突狀細胞及肝內(nèi)IL-10表達情況。 結(jié)果： 1．94.9％(93/98)的免疫耐受期慢性HBV感染者肝臟存在炎癥反應，分別為G1(65.31％)和G2(29.59％)；42.86％感染者肝臟存在纖維化，其中23.47％為S1，14.29％為S2，5.1％為S3，未發(fā)現(xiàn)有肝硬化者。ALT≤20IU/L的感染者肝臟炎癥程度低于ALT介于20～40IU/L組，但差異無統(tǒng)計學意義(p＞0.05)，ALT介于20～40IU/L的感染者肝臟纖維化分期明顯高于ALT≤20IU/L組，差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.05)。 2．免疫耐受期慢性HBV感染者外周血CD8~+T淋巴細胞數(shù)量高于健康人和免疫清除期，差異有統(tǒng)計學意義(分別p＜0.05，p＜0.01)；耐受期感染者外周血CD4~+/CD8~+比值低于清除期和健康人，差異有統(tǒng)計學意義(分別p＜0.05，p＜0.01)。耐受期感染者外周血mDC百分比低于健康人，但高于清除期，差異有統(tǒng)計學意義(分別p＜0.05，p＜0.01)，其mDC表面CD86表達率高于健康人，但低于清除期，差異無統(tǒng)計學意義(p＞0.05)；耐受期外周血pDC百分比低于健康人，差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.01)，與清除期結(jié)果相近，差異無統(tǒng)計學意義(p＞0.05)，其pDC表面CD86表達率高于健康人和清除期，但差異無統(tǒng)計學意義(p＞0.05)；耐受期感染者mDC和pDC表面CD83表達率極低，與其他各組結(jié)果相近，差異無統(tǒng)計學意義(p＞0.05)。耐受期感染者外周血Th1和Th2高于健康人，但低于清除期，與清除期比較差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.01)；耐受期感染者外周血Tc1和Tc2低于清除期，但差異無統(tǒng)計學意義(p＞0.05)。耐受期感染者血清IL-12水平高于健康人，但低于清除期，與清除期比較差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.05)；耐受期感染者血清IL-10水平高于健康人和清除期感染者，但差異無統(tǒng)計學意義(p＞0.05)。 3．耐受期慢性HBV感染者肝組織CD4~+和CD8~+T淋巴細胞數(shù)量多于健康人，但明顯少于清除期，與清除期比較差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.05)；耐受期感染者肝內(nèi)CD4~+/CD8~+比值高于清除期和健康人，與清除期比較差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.01)；耐受期感染者肝內(nèi)CD83~+成熟DC與健康人結(jié)果相近，但明顯低于清除期，差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.05)；耐受期感染者肝內(nèi)IL-10表達略低于健康人，高于清除期，但差異無統(tǒng)計學意義(p＞0.05)。 結(jié)論： 1、絕大部分免疫耐受期慢性HBV感染者肝臟存在輕度炎癥反應，部分患者已出現(xiàn)纖維化；ALT處于正常范圍內(nèi)相對高水平的患者出現(xiàn)纖維化的可能性增加，ALT似乎并不是判定肝臟損傷的敏感指標，應盡量動員肝穿檢查以準確判定病情，并加強隨訪。 2、耐受期慢性HBV感染者肝內(nèi)CD8~+T淋巴細胞普遍增多，提示其體內(nèi)存在針對HBV的免疫反應，但由于尚不清楚的原因這種反應較弱，不足以清除HBV，但卻可能引起肝臟輕度炎癥反應，導致持續(xù)的肝損傷，使得肝病隱匿進展。 3、耐受期慢性HBV感染者外周血DC亞群數(shù)量減少，在存在高載量HBV刺激的情況下DC表面的共刺激分子并沒有上調(diào)表達，這種數(shù)量和功能的缺陷可能是耐受期患者的發(fā)病機制之一。而造成上述缺陷的可能機制包括骨髓造血干細胞的DC分化誘導障礙、肝臟誘導DC凋亡、HBV感染DC而下調(diào)其表面標志物的表達、DC在機體中再分配到肝臟發(fā)揮效應等。通過肝組織成熟DC的研究發(fā)現(xiàn)，慢性乙肝患者肝臟并不缺乏成熟DC，尤其免疫清除期患者明顯增多，而其外周血DC則是明顯減少的，此結(jié)果更傾向于外周DC的減少是由于重新分布到肝臟的緣故。耐受期患者肝組織內(nèi)成熟DC浸潤與健康人相似，但是明顯少于清除期，因此提示肝內(nèi)缺乏成熟DC可能是耐受期患者針對HBV的CTL反應缺乏或減弱的重要原因，因而僅表現(xiàn)為肝臟輕度炎癥反應，而這種缺乏更多的可能性是在DC遷移過程中缺乏相應的趨化因子及其受體或粘附分子等造成。 4、對外周血Th1/Th2細胞反應的研究顯示，免疫清除期患者Th1型反應較強，而耐受期明顯減弱，血清細胞因子的檢測也顯示清除期患者更傾向于較強的Th1反應，而耐受期患者更傾向于Th2反應。肝臟IL-10檢測結(jié)果顯示耐受期患者與健康人的微環(huán)境更為接近，處于一個相對免疫耐受的狀態(tài)，這種微環(huán)境不利于DC的成熟、不利于激發(fā)較強的細胞免疫反應，因此肝臟表現(xiàn)為輕度炎癥反應；但同時這也可能是機體的自我保護策略，以盡量避免因清除大量HBV而帶來廣泛的肝細胞損傷。 5、通過外周血和肝臟CD4~+和CD8~+T淋巴細胞、樹突狀細胞等的研究顯示耐受期HBV感染者肝臟的確存在炎癥反應，而肝臟內(nèi)成熟DC的缺乏以及微環(huán)境中IL-10水平較高又傾向于抑制炎癥反應的程度，因此表現(xiàn)為耐受期HBV感染者的肝臟大多存在炎癥反應，但多為輕度炎癥。 6、通過比較外周血和肝臟各項免疫指標提示，雖然外周血的相關免疫指標檢測并不能代表肝臟的實際情況，但是部分指標與肝臟情況類似(如IL-10水平)，部分指標(CD8~+T淋巴細胞、mDC、pDC)可以間接的推測肝臟的情況，因此部分外周血的相關檢測在一定程度上可以代表肝臟的情況，具有一定的臨床應用價值。
【學位單位】：中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院
【學位級別】：博士
【學位年份】：2007
【中圖分類】：R512.62
【部分圖文】：

圖1外周血DC亞群的流式點圖注:Rl圈定的是外周血單個核細胞，R2圈定的是Linl一HLA一DR+的DC，R3圈定的分別是Linx一甩A一DR+enlxe+的mne和Linl一HLA一oR+eD123+的poe。b幾飛一一，曰a亡弓日·:蕊.幾二.安山。，幼汽.帳令.=.山喻豁。?一。一O一口SQ口日迪1611CDll62C人PC16316悶16316悶l6l淤未。。一l盞。。一CDI62C人PC

除期患者肝內(nèi)CD4+T淋巴細胞明顯多于其他各組，匯管區(qū)可見大量浸潤，肝小葉內(nèi)壞死灶也見明顯增多，與其它各組比較差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05)。表2及圖1一4為各組肝臟內(nèi)CD4+T淋巴細胞浸潤情況，表2慢性HBv感染者肝組織內(nèi)cD4+T淋巴細胞浸潤情況組別例數(shù)匯管區(qū)(個數(shù)/匯管區(qū))肝小葉(個數(shù)/hpf)健康組 55.89士2.94“1.76士0.72”免疫耐受期 309.06士5.32’3.67士2.44’非活動復制期 1010.37士5.67“4.13士2.36’免疫清除期 1027.23士 7.017.76士3.58方差齊性檢驗:擴匯軀 =7.6679，xZ肝小葉 =7.7393，，均p>0.05。各組間均數(shù)比較采用方差分析，F(xiàn)匯，二29.8518，F(xiàn)肝小葉 =8.2021，均p<0.01�！芭c免疫清除期組比較p<0.01。圖1健康人肝組織內(nèi)CD4+T淋巴細胞

非活動復制期慢性HBV感染者肝組織內(nèi)CD4十T淋巴細胞，免疫組化AEC染色(400x)，匯管區(qū)及肝小葉內(nèi)紅色陽性細胞稍增多
【引證文獻】

相關碩士學位論文 前1條

1 黃亞琴;廣西桂北地區(qū)HBV基因型在HBV相關性肝癌及HBV感染不同免疫狀態(tài)中的分布[D];桂林醫(yī)學院;2011年

本文編號：2845956