目的：研究益生菌對(duì)三硝基苯磺酸（trinitro-benzen-sulfonic acid，TNBS）誘導(dǎo)大鼠結(jié)腸炎腸黏膜上皮細(xì)胞緊密連接蛋白Claudin-1的調(diào)控，進(jìn)一步探討益生菌對(duì)實(shí)驗(yàn)性大鼠結(jié)腸炎腸黏膜屏障的保護(hù)作用。方法：SD大鼠（雄性）28只，分為三組：正常對(duì)照組（A組，n=8）、模型組（B組，n=10）、益生菌治療組（C組，n=10）。TNBS誘導(dǎo)大鼠結(jié)腸炎模型：SD大鼠術(shù)前禁食24h，B組和C組分別用一直徑約2mm、長(zhǎng)約12cm的硅膠管由肛門(mén)輕緩插入深約8cm，以含80mg/kgTNBS的等體積50%乙醇溶液約0.85ml緩慢注入結(jié)腸，使肛門(mén)抬高30度3-5分鐘，A組則以等體積生理鹽水灌腸。動(dòng)物完成造模后，A組和B組第1~7天每只大鼠每天用1ml蒸餾水灌腸1次；C組每只大鼠第1~7天每天用金雙歧2Co/只磨成粉末，用蒸餾水配制成1ml溶液灌腸；各組大鼠正常飼養(yǎng)。每天觀察各組大鼠的活動(dòng)、大便和體重等情況。造模后第8天戊巴比妥鈉麻醉后取內(nèi)眥血測(cè)定血漿D-乳酸、TNF-α和血清IL-8。斷頸處死大鼠后取下整段結(jié)腸并縱向剪開(kāi)，用生理鹽水清潔腸內(nèi)污物后觀察標(biāo)本有無(wú)充血水腫、有無(wú)潰瘍及活動(dòng)性出血等；每只大鼠取相同部位2cm結(jié)腸組織，福爾馬林液固定，用于行HE染色及免疫組織化學(xué)法檢測(cè)Claudin-1蛋白的表達(dá)；余下標(biāo)本用3%戊二醛預(yù)固定用于透射電鏡觀察結(jié)腸組織超微結(jié)構(gòu)改變。 結(jié)果：一般情況：在造模后第1天，B組出現(xiàn)腹瀉伴肉眼血便或糞便隱血試驗(yàn)陽(yáng)性或強(qiáng)陽(yáng)性，大鼠出現(xiàn)精神活動(dòng)差，飲食減少，體重下降。第2~5天腹瀉最重，5~6天后血便逐漸減輕，食量恢復(fù)。C組大鼠于造模后第1天開(kāi)始出現(xiàn)大便稀溏或不成形，出現(xiàn)精神活動(dòng)稍差，飲食減少，大便多表現(xiàn)為隱血陽(yáng)性，4天后腹瀉、隱血便減輕，活動(dòng)增多，食量恢復(fù)。A組造模后1天精神飲食均恢復(fù)正常。疾病活動(dòng)指數(shù)（DAI）： A組、B組和C組分別是0.49±0.43、3.17±0.43和2.08±0.57，各組比較差異均有顯著性意義（P0.05）；組織學(xué)損傷評(píng)分：A組、B組和C組分別是1.0±0.76、3.1±1.20、2.1±1.1，各組比較差異均有顯著性意義（P0.05）；血漿TNF-α水平：A組、B組和C組分別是35.13±18.37、172.72±17.07、57.20±19.66，各組比較差異均有顯著性意義（P0.05）；血漿D-乳酸水平：A組、B組和C組分別是5.267±7.38、12.66±2.68、11.50±7.31，其中B組和C組與A組比較差異有顯著性意義（P0.05）；但是B組和C組比較差異無(wú)顯著性意義（P0.05）。血清IL-8水平：A組、B組和C組分別是3.32±2.28、9.18±2.04、5.84±2.37，各組比較差異均有顯著性意義（P0.05）；③結(jié)腸腸上皮細(xì)胞緊密連接蛋白Claudin-1的表達(dá)：A組、B組和C組免疫組化結(jié)果顯示各組之間差異均有顯著性意義（P0.05）。透射電鏡結(jié)果顯示：A組腸絨毛密集、排列整齊、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)無(wú)擴(kuò)張、線(xiàn)粒體無(wú)腫脹、核糖體結(jié)構(gòu)完整，緊密連接正常；B組腸絨毛稀疏、紊亂、線(xiàn)粒體腫脹、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張、緊密連接增寬；C組與B組比較略有改善，但與A組比較仍有差異。 結(jié)論:益生菌對(duì)TNBS誘導(dǎo)大鼠結(jié)腸炎腸黏膜屏障具有明顯的保護(hù)作用，其作用機(jī)制可能是通過(guò)上調(diào)腸上皮細(xì)胞緊密連接蛋白Claudin-1的表達(dá)，減輕腸黏膜組織的損傷，降低腸黏膜的通透性，從而達(dá)到抗炎作用。
【學(xué)位單位】：川北醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2013
【中圖分類(lèi)】：R574.62
【文章目錄】：
致謝
摘要
Abstract
目錄
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述：益生菌對(duì)腸黏膜屏障緊密連接蛋白保護(hù)作用的研究進(jìn)展
    摘要
    1 緊密連接蛋白組成特點(diǎn)、調(diào)節(jié)途徑及功能
    2 緊密連接蛋白與 IBD
    3 益生菌對(duì)腸黏膜屏障緊密連結(jié)蛋白的保護(hù)作用
    4 結(jié)論與展望
    參考文獻(xiàn)
附錄
個(gè)人簡(jiǎn)歷
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張中偉;秦環(huán)龍;;乳酸菌對(duì)感染腸上皮細(xì)胞通透性及緊密連接蛋白表達(dá)的影響[J];腸外與腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng);2007年04期

2 姜偉煒;張文遠(yuǎn);;緊密連接蛋白與炎癥性腸病[J];國(guó)際消化病雜志;2010年02期

3 鐘燕;益生菌與乳糖不耐受研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(衛(wèi)生學(xué)分冊(cè));2003年02期

4 李文毅;金畢;谷涌泉;汪忠鎬;;D-乳酸、乳酸脫氫酶、血紅蛋白在急性腸缺血早期診斷中的作用[J];華中醫(yī)學(xué)雜志;2005年06期

5 張文遠(yuǎn);姜偉煒;;腸道微生態(tài)對(duì)三硝基苯磺酸誘導(dǎo)大鼠結(jié)腸炎腸黏膜上皮細(xì)胞緊密連接蛋白o(hù)ccludin保護(hù)作用的研究[J];臨床消化病雜志;2010年01期

6 閆明先;李丹萍;;潰瘍性結(jié)腸炎的治療[J];山東醫(yī)藥;2009年01期

7 王峰;趙瑛;;D-乳酸與腸道屏障功能[J];臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2006年04期

8 張文安;李文;王傳強(qiáng);嚴(yán)軍;;肝素保護(hù)腸黏膜屏障的實(shí)驗(yàn)研究[J];泰山醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2009年05期

9 王皓,歐陽(yáng)欽,胡仁偉;三硝基苯磺酸結(jié)腸炎動(dòng)物模型的建立[J];胃腸病學(xué);2001年01期

10 歐陽(yáng)欽;Rakesh Tandon;KL Goh;潘國(guó)宗;KM Fock;Claudio Fiocchi;SK Lam;蕭樹(shù)東;張虎;梁紅亮;王玉芳;;亞太地區(qū)炎癥性腸病處理共識(shí)意見(jiàn)(二)[J];胃腸病學(xué);2006年05期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 董亞珞;腫瘤壞死因子α促進(jìn)大腸桿菌穿過(guò)腸上皮細(xì)胞屏障的機(jī)制研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2008年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 姜偉煒;白頭翁醇提物對(duì)TNBS誘導(dǎo)大鼠結(jié)腸炎腸黏膜上皮細(xì)胞緊密連接蛋白保護(hù)作用的研究[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2010年

本文編號(hào)：2839873