發(fā)布時間：2020-10-11 18:07

　　 背景急性藥物性肝損傷是臨床上常見的藥物不良反應之一,可導致急性肝衰竭甚至死亡,臨床醫(yī)生需具備早期識別、早期診斷急性藥物性肝損傷的能力。由于缺乏特征性臨床癥狀、體征及血清學標志物,目前,急性藥物性肝損傷診斷主要使用排除法,在出現(xiàn)肝損傷癥狀體征肝生化異常的基礎上,排除病毒性肝炎、膽道梗阻等,方可能診斷急性藥物性肝損傷。國際上已出現(xiàn)多種用于輔助診斷急性藥物性肝損傷的方法,其中,RUCAM(Roussel Uclaf Causality Assessment Method)量化評分系統(tǒng)應用最廣泛,有必要收集藥物相關性肝損傷,采用RUCAM評分,評價可疑用藥與急性肝損傷關聯(lián)強度,增加診斷準確性。導致急性藥物性肝損傷的藥物種類眾多,除常見的抗結核藥物、抗腫瘤藥物等,近幾年,中草藥所致的急性肝損傷也越來越常見,這其中,中藥土三七所致的急性肝損傷-肝竇阻塞綜合征(hepatic sinusoidal obstruction syndrome,HSOS)具有特殊性,臨床上,HSOS多表現(xiàn)為肝大、體重增加、黃疸,其肝臟淤血明顯。病理組織學上可見肝竇明顯淤血擴張。目前,HSOS具體發(fā)病機制仍未完全明確,因此有必要建立HSOS動物模型,探討HSOS相關發(fā)病機制。目的1.調查我院近5年急性藥物性肝損傷住院病例,判斷肝損傷類型,評價可疑藥物與急性肝損傷關聯(lián)強度。計算中草藥占可疑用藥比例,分析其中土三七相關HSOS一般情況及預后,為臨床醫(yī)師提供參考;2.建立大鼠HSOS模型,觀察HSOS動態(tài)組織學變化及超微結構改變,探討基質金屬蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、金屬蛋白酶組織抑制物-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)在HSOS發(fā)病機制中的作用。方法1.回顧性收集我院近5年急性藥物性肝損傷病例,記錄患者一般情況、癥狀體征、可疑用藥及相關實驗室檢查,采用RUCAM評分對肝損傷類型分類,評估可疑用藥與急性肝損傷關聯(lián)強度。對可疑用藥進行分類,計算所占比例。記錄土三七相關HSOS病例的用藥原因及方式,分析預后情況;2.32只SD雄性大鼠隨機分為2組,正常對照組和實驗組。實驗組采用野百合堿(monocrotaline,MCT)單次灌胃制備HSOS模型。于灌胃后第1、2、4天處死大鼠。對照組采用等量二甲基亞砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)單次灌胃,于灌胃后第4天處死,動態(tài)觀察HSOS病理變化和超微結構變化。免疫組織化學方法和real-time PCR檢測大鼠HSOS早期肝組織MMP-9、TIMP-1蛋白和m RNA表達情況。結果1.共收集453例急性藥物性肝損傷病例,其中肝細胞型312例(68.9%),膽汁淤積型59例(13.0%),混合型82例(18.1%);RUCAM評分大于8分(非�？赡�)53例(11.7%),6~8分(很可能)249例(55.0%),3~5分(可能)117例(25.8%),1~2分(不大可能)30例(6.6%),小于1分(無關)4例(0.9%)。在導致急性肝損傷的可疑用藥中,中草藥最多,占49.7%,其中土三七相關HSOS 43例。在這43例HSOS中,因骨關節(jié)病及外傷服用土三七者9例,13例使用土三七泡酒。土三七相關HSOS病人住院轉歸中,治愈或好轉72.1%(31/43),病死率11.6%(5/43),未好轉或惡化16.3%(7/43)。土三七相關HSOS是值得特別關注的藥物性肝病。2.在MCT致HSOS的實驗研究中,與正常對照組比較,MCT灌胃后第1天處死大鼠超微結構出現(xiàn)肝竇內皮線性結構不完整,第2天出現(xiàn)肝竇淤血擴張,中央靜脈內皮損傷等病理變化,第4天,肝竇淤血加重。與正常對照組比較,MCT灌胃后第1天肝臟MMP-9蛋白及m RNA表達增加(P0.05),TIMP-1蛋白及m RNA無明顯變化,第2天MMP-9蛋白及m RNA表達增加(P0.05),TIMP-1蛋白及m RNA表達增加(P0.01)。結論1.我院急性藥物性肝損傷病例中,肝細胞型損傷最多見。RUCAM評分有助于臨床協(xié)助評價可疑藥物與肝損傷的關聯(lián)強度。中草藥致急性肝損傷比例有所增加,其中土三七相關HSOS值得關注。2.MCT可建立HSOS的動物模型,其HSOS以肝竇內皮損傷為最初組織學變化。細胞外基質降解,導致肝竇內皮細胞損傷,肝竇完整性破壞,肝竇淤血擴張進而發(fā)展成為臨床HSOS。MMP-9、TIMP—1參與HSOS中細胞外基質的降解。
【學位單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：R575
【文章目錄】：
中英文縮略詞表
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 急性藥物性肝損傷臨床調研
    1 材料與方法
        1.1 研究對象
        1.2 肝損傷診斷標準及急性藥物性肝損傷評分
        1.3 可疑用藥與急性肝損傷關聯(lián)程度的評價
        1.4 統(tǒng)計學處理
    2 結果
        2.1 病例篩選和臨床資料分析
        2.2 急性藥物性肝損傷的分型和RUCAM量化評分結果
        2.3 急性藥物性肝損傷可疑用藥分類情況
        2.4 急性藥物性肝損傷相關的中草藥種類
        2.5 土三七相關肝竇阻塞綜合征臨床用藥情況
        2.6 43 例土三七相關 HSOS 病人預后情況
    3 討論
第二部分 土三七相關性肝竇阻塞綜合征動物模型建立及其機制研究
    1 材料與法
        1.1 實驗動物
        1.2 主要實驗儀器
        1.3 主要試劑及化學藥物
    2 實驗方法
        2.1 實驗動物分組及模型制備
        2.2 實驗動物標本采集
        2.3 觀測指標及測定方法
            2.3.1 肝臟大體形態(tài)、組織學變化和評分
            2.3.2 肝臟超微結構變化
            2.3.3 免疫組織化學（過氧化物酶標記的鏈酶卵白素檢測法，SP法）檢測肝組織MMP-9、TIMP-1 蛋白表達
            2.3.4 real-time PCR方法檢測肝組織MMP-9、TIMP-1 m RNA表達
        2.4 統(tǒng)計學處理
    3 結果
        3.1 肝臟大體形態(tài)
        3.2 肝臟組織病理學變化及評分
        3.3 肝臟超微結構變化
        3.4 大鼠HSOS病變早期肝組織MMP-9 蛋白及m RNA表達情況
        3.5 大鼠HSOS病變早期肝組織TIMP-1 蛋白和m RNA表達情況
    4 討論
結論
主要參考文獻
附錄
致謝
綜述及主要參考文獻
    主要參考文獻

【參考文獻】

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本文編號：2836936