目的:觀察殼寡糖(Chitosan Oligosaccharide,COS)對2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇法誘導(dǎo)的小鼠潰瘍性結(jié)腸炎(Ulcerative Colitis,UC)的治療作用,并探討其治療UC的作用機制。方法:將健康小鼠隨機分為空白對照組和模型組,模型組小鼠接受TNBS/乙醇溶液灌腸處理,誘導(dǎo)腸道炎癥,建立UC小鼠動物模型,將模型組小鼠隨機分為模型對照組和殼寡糖(COS)組。將COS組小鼠隨機分為12h COS組和24h COS組,兩組分別接受COS灌胃處理12h和24h后予以處死。將空白對照組和模型對照組小鼠各隨機分為2組(即12h空白對照組,24h空白對照組,12h模型對照組,24h模型對照組),各組分別接受等量生理鹽水處理12h或24h。對比各組小鼠的一般狀態(tài)、形態(tài)及組織學(xué)(包括肉眼觀察和顯微鏡觀察)差異;應(yīng)用western blot檢測殼寡糖組小鼠于殼寡糖治療前及殼寡糖治療12h和24h后NF-κB的表達狀況。結(jié)果:1.各組小鼠的一般狀態(tài)空白對照組:12h空白對照組、24h空白對照組小鼠均活動敏捷,活動量較多,食欲良好,食量較多,大便成形,不帶黏液及膿血,精神狀態(tài)良好,體重增加。模型組對照組:12h模型對照組、24h模型對照組小鼠均出現(xiàn)活動減少,食欲減退,食量減少,大便不成形,帶黏液、膿血,精神不振,體重減輕。殼寡糖組:12h COS組小鼠較模型對照組小鼠活動量增加,食欲好轉(zhuǎn),食量增加,大便漸成形,大便中所帶黏液、膿血減少,精神狀態(tài)好轉(zhuǎn),體重不再繼續(xù)減輕。24h COS組小鼠上述癥狀均有顯著改善,黏液、膿血便顯著減少,但與空白對照組相比,上述癥狀依然略差。2.肉眼觀察各組小鼠結(jié)腸組織空白對照組:12h空白對照組、24h空白對照組小鼠結(jié)腸黏膜組織結(jié)構(gòu)完好,未見炎性病變。模型對照組:12h模型對照組小鼠結(jié)腸黏膜大面積充血水腫,邊界不清,可見黏膜隆起,結(jié)腸壁厚薄不等,腸腔變窄,可見到多發(fā)糜爛和多個散在潰瘍,潰瘍直徑多1cm,潰瘍周圍黏膜充血水腫。24h模型組對照組小鼠結(jié)腸黏膜可見直徑1cm的多發(fā)潰瘍。殼寡糖組:12h COS組小鼠結(jié)腸黏膜可見多個糜爛面,其周圍黏膜組織見充血水腫,無明顯潰瘍或偶有單個小潰瘍。24h COS組小鼠結(jié)腸黏膜偶見局限糜爛,其周圍黏膜組織見充血水腫,無明顯潰瘍。對比小鼠結(jié)腸黏膜組織損傷肉眼觀積分,12h模型對照組(4.5±0.5)明顯高于12h空白對照組(0.00±0.00),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。24h模型對照組(4.67±0.47)明顯高于24h空白對照組(0.00±0.00),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。12h COS組(2.67±0.47)明顯低于12h模型對照組(4.5±0.5),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。24h COS組(1.83±0.69)明顯低于24h模型對照組(4.67±0.47),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。12h COS組(2.67±0.47)與24h COS組(1.83±0.69)相比,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3.光學(xué)顯微鏡觀察(Tunel染色)各組小鼠結(jié)腸組織空白對照組:小鼠結(jié)腸黏膜上皮結(jié)構(gòu)完好,未見炎性病變。模型組對照組:潰瘍病變初可見上皮細胞壞死,黏膜上皮完整性缺失,隱窩結(jié)構(gòu)破壞,杯狀細胞消失,黏膜層和黏膜下層可見組織缺失和壞死病變,內(nèi)有大量的炎性細胞浸潤。12h COS組:可見黏膜炎癥,可見到炎性細胞,潰瘍處腸黏膜覆蓋不全,潰瘍修復(fù)區(qū)域黏膜較薄,潰瘍修復(fù)區(qū)域可見新生上皮細胞,杯狀細胞較處理前增多,可見到新生成的腺體結(jié)構(gòu)。24h COS組:潰瘍修復(fù)區(qū)域炎性細胞浸潤減少,杯狀細胞數(shù)量顯著恢復(fù),局部區(qū)域黏膜增厚,可見大小不一增生腺體。對比小鼠結(jié)腸黏膜組織病理積分,12h模型對照組(8.00±0.63)明顯高于12h空白對照組(0.00±0.00),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。24h模型對照組(8.17±0.75)明顯高于24h空白對照組(0.00±0.00),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。12h COS組(3.67±0.52)明顯低于12h模型對照組(8.00±0.63),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。24h COS組(3.83±0.41)明顯低于24h模型對照組(8.17±0.75),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。12h COS組(3.67±0.52)與24h COS組(3.83±0.41)相比,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。4.殼寡糖對NF-κB表達的影響western blot檢測結(jié)果顯示殼寡糖組小鼠于殼寡糖處理12h,24h后NF-κB的表達較殼寡糖處理前明顯下降。結(jié)論:1.殼寡糖可有效改善TNBS/乙醇法誘導(dǎo)的UC小鼠的一般狀態(tài)和腸道炎癥反應(yīng)。2.殼寡糖對UC小鼠的改善作用與抑制NF-κB的表達相關(guān)。
【學(xué)位單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R574.62
【部分圖文】：

24h COS 組 6 1.83±0.69b,c圖1 各組小鼠結(jié)腸組織損傷肉眼評分3 光學(xué)顯微鏡觀察(Tunel 染色)各組小鼠結(jié)腸組織各組小鼠結(jié)腸組織顯微鏡下表現(xiàn)，見圖 2。

結(jié)果8圖3 各組小鼠結(jié)腸組織損傷病理評分4 殼寡糖對 NF-κB 表達的影響殼寡糖組小鼠于殼寡糖處理 12h，24h 后 NF-κB 的表達較殼寡糖處理前明顯下降，表明殼寡糖可有效抑制 NF-κB 表達。 見表 3，圖 4。表3 殼寡糖處理對NF-κB表達的影響殼寡糖處理前 殼寡糖處理12h 殼寡糖處理24hNF-κB 745±5 324±2 437±20h 12h 24hNF-κB

殼寡糖處理對小鼠腸黏膜NF-κB的表達影響

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前4條

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本文編號：2832417