[研究背景]舌下絡(luò)脈診是中醫(yī)舌診的重要組成部分,因其顯露易見(jiàn)、反應(yīng)靈敏,為臨床觀察人體氣血、津液盈虧和瘀血輕重的重要指征。我們?cè)陂L(zhǎng)期的原發(fā)性肝癌和肝硬化臨床研究中發(fā)現(xiàn),上述患者多伴有舌下絡(luò)脈的擴(kuò)張、迂曲等形態(tài)及青紫、絳紫等顏色變化,這種變化非常靈敏,且多與患者的病情進(jìn)展和治療預(yù)后明顯相關(guān)。 祖國(guó)醫(yī)學(xué)認(rèn)為,肝臟與舌有著密切的聯(lián)系,《靈樞·經(jīng)脈》中提到：“厥陰者肝脈也,……而脈絡(luò)于舌本也”,故肝臟的異�？稍谏嗌铣霈F(xiàn)相應(yīng)的改變。已有的相關(guān)研究提示,異常舌下絡(luò)脈形成可能與上述患者伴有的門靜脈壓力增高有關(guān),如靳士英等通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)舌下絡(luò)脈異�？赡芘c門脈高壓時(shí)引起的舌靜脈壓力升高有關(guān),還有人對(duì)118例門脈高壓患者采用術(shù)中測(cè)壓和觀察舌下絡(luò)脈病理變化相結(jié)合的方法研究發(fā)現(xiàn),門脈高壓癥患者的舌下絡(luò)脈曲張率為100%。我們階段性的研究結(jié)果也顯示,原發(fā)性肝癌患者舌下絡(luò)脈異常與肝門脈血管及其局部血液動(dòng)力學(xué)某些指標(biāo)直接相關(guān)。但門脈高壓與異常舌下絡(luò)脈形成之間的關(guān)聯(lián),尤其是門脈高壓過(guò)程中引起舌下絡(luò)脈產(chǎn)生變化的分子機(jī)制目前尚不清楚。我們認(rèn)為,舌下絡(luò)脈和肝門靜脈作為人體靜脈血管系統(tǒng)的組成部分,二者在病理上必然存在密切的內(nèi)在聯(lián)系。并注意到肝癌和肝硬化過(guò)程中患者異常的舌下絡(luò)脈不僅表現(xiàn)為絡(luò)脈顏色、形狀等的異常,更會(huì)在絡(luò)脈周圍出現(xiàn)瘀點(diǎn)以及周圍瘀血細(xì)絡(luò)增多等特點(diǎn),這很難簡(jiǎn)單地用門靜脈壓力增高引起舌下絡(luò)脈被動(dòng)擴(kuò)張來(lái)完整解釋。這也提示我們,肝硬化門靜脈高壓癥異常舌下絡(luò)脈表現(xiàn)有其更深層次的物質(zhì)基礎(chǔ)。 隨著現(xiàn)代腫瘤學(xué)和分子生物學(xué)研究的不斷深入,逐步揭示了血管形成的分子機(jī)制。在成體中生理性和病理性的血管生成機(jī)制是血管的主要形成方式。許多分子在血管生成中起著正向調(diào)節(jié)作用。在所有已知的血管生成調(diào)控因子中,血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(Vascular Endothelial Growth Factor, VEGF)是最主要的。缺氧反應(yīng)、機(jī)械應(yīng)力等多種機(jī)制參與了VEGF基因的誘導(dǎo)。低氧情況下,缺氧誘導(dǎo)因子-1(Hypoxia-inducible factor 1, HIF-1)通過(guò)刺激VEGF的轉(zhuǎn)錄和增強(qiáng)VEGFmRNA的穩(wěn)定性從而增加VEGF蛋白的表達(dá)。VEGF通過(guò)內(nèi)皮型一氧化氮合酶刺激一氧化氮的合成,介導(dǎo)血管的擴(kuò)張及增加其滲透性。近年來(lái)的研究也已證實(shí),門靜脈高壓癥過(guò)程中肺臟和脾臟中也存在血管生成現(xiàn)象。我們注意到異常舌下絡(luò)脈在形態(tài)上的多樣性、紊亂無(wú)序與不同亞型VEGF誘導(dǎo)的血管生成的表現(xiàn)有相似之處。因此設(shè)想根據(jù)“血管生成”理論,重點(diǎn)從血管生成的角度,探討肝硬化門脈高壓模型異常舌下絡(luò)脈形成可能的分子機(jī)制。 [目的] 本研究擬通過(guò)制備肝硬化門脈高壓犬模型,觀察其舌下絡(luò)脈的變化,并從血管生成的角度,探尋VEGF與異常舌下絡(luò)脈間的關(guān)系。為揭示異常舌下絡(luò)脈形成的分子機(jī)制提供數(shù)據(jù)支持。 [方法] 將Beagle犬隨機(jī)分為正常組和模型組。以二甲基亞硝胺(dimethylnitrosa-mine, DMN)誘導(dǎo)制備肝硬化門脈高壓犬模型,觀察舌下絡(luò)脈形態(tài)、顏色；生物電記錄系統(tǒng)測(cè)定其門脈壓力；硝酸還原酶法測(cè)定犬血清中NO濃度；ELISA法檢測(cè)血清中VEGF, HIF-1α表達(dá)量；免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)犬舌組織血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及低氧誘導(dǎo)因子(hypoxia-inducible factor 1α, HIF-1α)的表達(dá)；Real-Time PCR檢測(cè)VEGFmRNA、HIF-1αmRNA的表達(dá)水平。 [結(jié)果] 模型組Beagle犬舌下血管形態(tài)學(xué)和顏色較正常組出現(xiàn)了明顯改變,表現(xiàn)為下絡(luò)脈出現(xiàn)迂曲增粗,細(xì)絡(luò)增多顏色暗紅,甚至紫暗；模型犬血清NO濃度顯著升高,VEGF、HIF-1α蛋白表達(dá)顯著增高；正常對(duì)照組犬舌下血管VEGF、HIF-1α幾乎無(wú)表達(dá),模型組犬可見(jiàn)VEGF、HIF-1α蛋白表達(dá)顯著增高,VEGFmRNA、HIF-1αmRNA也隨之顯著增高。 [結(jié)論] 門靜脈壓力增高為肝硬化模型犬異常舌下絡(luò)脈形成的重要直接因素,VEGF誘導(dǎo)的血管生成參與了舌下絡(luò)脈的血管重建,HIF-1α/VEGF/NO信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑是VEGF誘導(dǎo)的血管生成參與舌下絡(luò)脈血管重建可能機(jī)制之一
【學(xué)位單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2010
【中圖分類】：R259;R575.2
【部分圖文】：

圖1實(shí)驗(yàn)犬體重變化Fignre1ChangeofweightofBeagledogsindifferentgrouPs模型犬門脈壓力的變化動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)犬各時(shí)期的門靜脈壓力變化，正常組在整個(gè)造模過(guò)程中壓力穩(wěn)定，未出現(xiàn)明顯波動(dòng)情況。肝硬化模型組實(shí)驗(yàn)犬在DMN誘導(dǎo)2周門靜脈即升高(p<0.01)，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;隨實(shí)驗(yàn)進(jìn)展模型組門靜脈壓力在、6周、8周呈階梯狀上升，且與正常組相比門靜脈壓力有顯著性差異(p<0.0表2，圖2。表2門靜脈壓力

力即升高(p<0.01)，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;隨實(shí)驗(yàn)進(jìn)展模型組門靜脈壓力在4周、6周、8周呈階梯狀上升，且與正常組相比門靜脈壓力有顯著性差異(p<0.01);見(jiàn)表2，圖2。表2門靜脈壓力 Table2PortalveinPressureintwogroups(x士s，nllnHg) DMNinioxitiontimeGrouPn—0、 veekZWeekS4weeks6、veekss、veeksNCCPH 68.43士 0.858.54士 0.618.45士 0.908.48士 0.548.5社0.70 68.6肚 0.7813.3肚1.88”▲14.87士1.99‘’17.9肚1.84’‘18.4妊1.92’‘P<0.01， vsnormaleontrolgrouP;‘P<0.01， vsoweekCPH

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本文編號(hào)：2826195