目的探討不同菌量幽門螺桿菌(H. pylori)對體外感染胃黏膜上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)、B7-H1 mRNA表達(dá)的影響及其誘導(dǎo)TGF-β1表達(dá)的菌體因素,為支持H. pylori通過誘導(dǎo)胃黏膜上皮細(xì)胞表達(dá)TGF-β1及B7-H1,抑制宿主免疫功能,參與H. pylori免疫逃逸提供依據(jù)。 方法①選用1.0×109 CFU/m(l低濃度),4.0×109 CFU/m(l中濃度),8.0×109 CFU/ml (高濃度)H. pylori國際標(biāo)準(zhǔn)毒力菌株NCTC 11637活菌懸液分別感染體外培養(yǎng)胃黏膜上皮細(xì)胞,建立不同共孵育時(shí)間(0h、0.5h、1h、1.5h、2h、4h、8h、12 h)H. pylori體外感染細(xì)胞模型,設(shè)立未加H. pylori的胃黏膜上皮細(xì)胞對照組,以酶鏈免疫吸附法(ELISA)檢測感染及對照細(xì)胞各時(shí)間點(diǎn)培養(yǎng)上清TGF-β1含量,原位雜交法檢測不同濃度感染及對照細(xì)胞共培養(yǎng)12 h B7-H1 mRNA的表達(dá);②同時(shí)用H. pylori中濃度滅活菌懸液與體外培養(yǎng)胃黏膜細(xì)胞共孵育,測定共孵育細(xì)胞2h、12h培養(yǎng)細(xì)胞上清的TGF-β1含量。③用超聲粉碎并經(jīng)離心獲取的H. pylori菌體成分上清、沉淀以及煮沸后上清、沉淀分別作用體外培養(yǎng)胃黏膜細(xì)胞,測定2h、12h培養(yǎng)細(xì)胞上清TGF-β1含量。 結(jié)果①H. pylori活菌懸液三種濃度各時(shí)間組胃黏膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)上清TGF-β1含量均較對照組明顯增高(P0.05),各濃度時(shí)間組TGF-β1表達(dá)量有相似的動態(tài)趨勢,但尤以中濃度組TGF-β1表達(dá)量最高(P0.05);②中濃度H. pylori滅活菌株組與同濃度活菌組細(xì)胞培養(yǎng)上清TGF-β1含量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);③H. pylori菌體成分上清組較對照組和沉淀組細(xì)胞培養(yǎng)上清TGF-β1表達(dá)增高(P0.05);上清煮沸組較未煮沸組明顯降低(P0.05);沉淀煮沸組與未煮沸組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。④高、中、低濃度組感染細(xì)胞12h B7-H1 mRNA的表達(dá)均較對照組增高(P0.05),以中濃度組表達(dá)最高,并與高、中、低濃度組12 h感染細(xì)胞上清TGF-β1含量呈正相關(guān)(rs=0.628, P0.01)。 結(jié)論H. pylori可直接誘導(dǎo)胃黏膜上皮細(xì)胞分泌TGF-β1,其誘導(dǎo)因素為可溶性不耐熱菌體成分;H. pylori同樣可誘導(dǎo)胃黏膜上皮細(xì)胞B7-H1mRNA表達(dá)增高,且B7-H1mRNA表達(dá)與TGF-β1存在正相關(guān)。推測H. pylori通過誘導(dǎo)TGF-β1、B7-H1高表達(dá),抑制宿主免疫反應(yīng),參與H. pylori免疫逃逸。
【學(xué)位單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2009
【中圖分類】：R573
【部分圖文】：

人胃段腆上皮細(xì)胞100x

明性對照原位雜交2加‘

中濃度原位雜交Z加X

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 萬曉華;古強(qiáng);;轉(zhuǎn)化生長因子β_1與結(jié)締組織生長因子在幽門螺桿菌相關(guān)性胃炎中的研究[J];臨床薈萃;2008年09期

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本文編號：2823836