第一部分內(nèi)毒素刺激對(duì)TRAF6基因表達(dá)的影響 目的：觀察內(nèi)毒素刺激對(duì)小鼠RAW264.7巨噬細(xì)胞腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6(TNF receptor-associated factor-6, TRAF6)基因表達(dá)的影響,闡明內(nèi)毒素刺激與TRAF6基因表達(dá)的關(guān)系。 方法：RAW264.7細(xì)胞分為L(zhǎng)PS組、地塞米松組、姜黃素組、實(shí)驗(yàn)對(duì)照組和正常對(duì)照組。LPS組以終濃度為100μg/L LPS刺激；地塞米松組以終濃度為0.5 mg/L地塞米松預(yù)處理8 h,姜黃素組以終濃度為20μmol/L姜黃素預(yù)處理8 h；實(shí)驗(yàn)對(duì)照組用含DMSO(濃度0.1%)的DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng),正常對(duì)照組作為實(shí)驗(yàn)對(duì)照不予以任何處理。LPS刺激2 h、4 h、8 h和16 h后,免疫細(xì)胞化學(xué)染色檢測(cè)TRAF6蛋白表達(dá),realtime-PCR檢測(cè)TRAF6 mRNA表達(dá)；LPS刺激8 h時(shí)Western blot檢測(cè)TRAF6蛋白,在mRNA水平和蛋白質(zhì)水平檢測(cè)內(nèi)毒素刺激對(duì)TRAF6基因表達(dá)的影響。 結(jié)果：小鼠RAW264.7細(xì)胞中TRAF6 mRNA的正常表達(dá)量相對(duì)較低,當(dāng)LPS刺激4 h時(shí),TRAF6 mRNA表達(dá)明顯增加；隨著時(shí)間延長(zhǎng)其表達(dá)進(jìn)一步增加,至16 h時(shí),TRAF6 mRNA表達(dá)達(dá)到高峰。用地塞米松和姜黃素干預(yù)后,TRAF6 mRNA表達(dá)量均低于同一時(shí)間LPS組(P0.05),但始終高于正常水平。同一時(shí)間點(diǎn)地塞米松組與姜黃素組比較無(wú)明顯差異(P0.05),實(shí)驗(yàn)對(duì)照組細(xì)胞TRAF6 mRNA表達(dá)水平較正常對(duì)照組無(wú)明顯變化(P0.05)。Western blot檢測(cè)TRAF6蛋白表達(dá),結(jié)果與TRAF6 mRNA結(jié)果相似。 結(jié)論：TRAF6 mRNA及TRAF6蛋白表達(dá)與LPS刺激有明確的時(shí)效關(guān)系。 第二部分TRAF6 siRNA表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建和篩選 實(shí)驗(yàn)一TRAF6 siRNA表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建與鑒定 目的：構(gòu)建針對(duì)小鼠TRAF6基因的短發(fā)夾RNA (short hairpin RNA, shRNA)真核表達(dá)載體,為下一步的細(xì)胞轉(zhuǎn)染奠定基礎(chǔ)。 方法：在NCBI的Nucleotide庫(kù)中檢索小鼠TRAF6 mRNA序列,應(yīng)用Invitrogen公司的在線設(shè)計(jì)軟件BLOCK-iTTM RNAi Designer,針對(duì)小鼠TRAF6 mRNA設(shè)計(jì)篩選4條siRNA序列。體外合成編碼短發(fā)夾RNA序列的DNA寡核苷酸單鏈,經(jīng)退火成互補(bǔ)雙鏈,將相應(yīng)的雙鏈DNA被插入pGCsi-U6/GFP/Hygro質(zhì)粒中,構(gòu)建重組質(zhì)粒pGCsi-TRAF6-shRNA1、2、3、4。將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化進(jìn)E.coli DH5a,最后以PCR法分析鑒定陽(yáng)性重組質(zhì)粒并進(jìn)行DNA測(cè)序。在紫外分光光度計(jì)上OD260和OD280讀取吸光度值,檢測(cè)質(zhì)粒DNA的濃度。 結(jié)果：siRNA寡核苷酸單鏈成功退火,合成雙鏈DNA模板,凝膠電泳可見(jiàn),59 bpMark處呈現(xiàn)清晰條帶。靶向TRAF6 mRNA的4種重組質(zhì)粒載體pGCsi-TRAF6-shRNA,經(jīng)酶切和DNA測(cè)序分析,shRNA編碼序列與設(shè)計(jì)的片段完全一致,證實(shí)重組質(zhì)粒載體構(gòu)建成功。4種重組質(zhì)粒DNA OD260/OD280比值均在1.8～2.0之間,質(zhì)粒DNA質(zhì)量良好,符合實(shí)驗(yàn)要求,為下一步體外、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)奠定了基礎(chǔ)。 結(jié)論：靶向TRAF6基因的重組質(zhì)粒載體pGCsi-TRAF6-shRNA構(gòu)建成功,為研究TRAF6對(duì)內(nèi)毒素炎癥反應(yīng)的調(diào)控作用奠定基礎(chǔ)。 實(shí)驗(yàn)二TRAF6基因沉默優(yōu)化序列的篩選和確認(rèn) 目的：將TRAF6基因特異性重組質(zhì)粒載體pGCsi-TRAF6-shRNA轉(zhuǎn)染RAW 264.7細(xì)胞,檢測(cè)TRAF6基因在mRNA和蛋白質(zhì)水平的表達(dá)情況,體外篩選干擾小鼠RAW264.7細(xì)胞TRAF6基因的最佳重組質(zhì)粒載體pGCsi-TRAF6-shRNA。 方法：使用不同比例的DNA質(zhì)粒／脂質(zhì)體復(fù)合物,將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至RAW 264.7細(xì)胞,熒光顯微鏡觀察轉(zhuǎn)染效果。重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞48 h后,應(yīng)用MTT法檢測(cè)轉(zhuǎn)染重組質(zhì)粒pGCsi-TRAF6-shRNA后細(xì)胞活性的變化,realtime-PCR和Western blot檢測(cè)轉(zhuǎn)染細(xì)胞TRAF6基因的mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá),體外篩選出對(duì)TRAF6基因表達(dá)具有最佳抑制效果的重組質(zhì)粒。 結(jié)果：熒光顯微鏡分析轉(zhuǎn)染效率顯示,DNA(g)/Trans Fectin(L)為2：5時(shí)重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染效率最高。MTT檢測(cè)結(jié)果顯示,重組質(zhì)粒pGCsi-TRAF6-shRNA1、2能顯著抑制RAW264.7細(xì)胞的增殖活性,與正常對(duì)照組相比有顯著差異(P0.01)。realtime-PCR結(jié)果顯示,pGCsi-TRAF6-shRNA1、2組細(xì)胞TRAF6 mRNA表達(dá)水平顯著降低。其中,pGCsi-TRAF6-shRNA 1對(duì)RAW264.7細(xì)胞TRAF6基因表達(dá)的抑制作用最為顯著,抑制率為65.25%,與正常對(duì)照組相比具有明顯差異(P0.05)。Western blot檢測(cè)結(jié)果顯示,pGCsi-TRAF6-shRNA1對(duì)靶基因蛋白表達(dá)抑制作用最明顯,TRAF6基因蛋白表達(dá)抑制率為60.07%,與正常對(duì)照組相比差異顯著(P0.05)。 結(jié)論：pGCsi-TRAF6-shRNA1真核表達(dá)載體可在體外高效地抑制TTRAF6基因表達(dá),為進(jìn)一步研究TRAF6基因沉默對(duì)內(nèi)毒素炎癥反應(yīng)的影響奠定基礎(chǔ)。 第三部分TRAF6 siRNA對(duì)RAW264.7細(xì)胞內(nèi)毒素炎癥的影響 目的體外研究TRAF6沉默基因?qū)AW 264.7細(xì)胞內(nèi)毒素炎癥反應(yīng)的影響。 方法實(shí)驗(yàn)分為5組：(A)pTRAF6-shRNA1(即pGCsi-TRAF6-shRNA1)組,質(zhì)粒pTRAF6-shRNA1+LPS; (B)陽(yáng)性對(duì)照組,姜黃素(20μmol/L)+LPS; (C)陰性對(duì)照組,空白質(zhì)�！繪PS；(D)空白對(duì)照組,僅予100μg/L LPS刺激；(E)正常對(duì)照組,正常培養(yǎng)不予任何處理。LPS刺激后0 h、4 h、8 h和16 h,收集細(xì)胞上清,ELISA法測(cè)定上清液中TNF-α、IL-1β、TGF-β1。LPS刺激24 h后,收集細(xì)胞,realtime PCR方法檢測(cè)TRAF6、IL-6、COX-2 mRNA, Western blot檢測(cè)細(xì)胞核內(nèi)NF-κB p65蛋白表達(dá)。 結(jié)果100μg/L LPS刺激各組RAW264.7細(xì)胞后,細(xì)胞上清液中TNF-α、IL-1β、TGF-β1表達(dá)量都明顯增加,與正常對(duì)照組相比差異顯著(P0.01),其中TNF-α、IL-1β在8 h內(nèi)達(dá)高峰,TGF-β1在16 h達(dá)高峰,說(shuō)明LPS刺激可引起細(xì)胞TNF-α、IL-1β、TGF-β1分泌。將pTRAF6-shRNA1轉(zhuǎn)染RAW264.7細(xì)胞后,TNF-α、IL-1β、TGF-β1增長(zhǎng)率均明顯低于陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組(P0.01)。Realtime PCR檢測(cè)結(jié)果顯示,pTRAF6-shRNA1組IL-6、COX-2 mRNA表達(dá)明顯下調(diào),與正常對(duì)照組比較有顯著差異。Western blot結(jié)果表明,pTRAF6-shRNA1組細(xì)胞核內(nèi)NF-κB p65蛋白表達(dá)明顯減少。 結(jié)論重組質(zhì)粒pTRAF6-shRNA可能通過(guò)抑制LPS誘導(dǎo)的NF-κB p65核轉(zhuǎn)位,降低相關(guān)炎癥細(xì)胞因子和介質(zhì)的分泌,抑制RAW264.7細(xì)胞內(nèi)毒素炎癥反應(yīng)。 第四部分TRAF6siRNA對(duì)急性肝衰竭內(nèi)毒素炎癥小鼠的保護(hù)作用 實(shí)驗(yàn)一不同轉(zhuǎn)染方式對(duì)GFP表達(dá)質(zhì)粒在小鼠肝臟的表達(dá)影響 目的：研究經(jīng)流體力學(xué)注射、門(mén)靜脈和腹腔常規(guī)注射3種不同途徑注射GFP表達(dá)質(zhì)粒后,目的基因在小鼠肝臟的表達(dá)情況及其轉(zhuǎn)基因效率。 方法：將裸質(zhì)�；蛑|(zhì)體包裹的質(zhì)粒DNA分別應(yīng)用流體力學(xué)注射、門(mén)靜脈及腹腔常規(guī)注射法注入同種異體小鼠體內(nèi),48 h后分別取血和肝組織,常規(guī)生化方法檢測(cè)血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和總膽紅素(TB),HE染色檢測(cè)肝組織病理變化,新鮮組織冰凍切片觀察3種轉(zhuǎn)染途徑對(duì)質(zhì)粒DNA在小鼠肝臟的表達(dá)影響。 結(jié)果：注射48 h后,腹腔常規(guī)注射組與正常組比較,ALT和TB的升高幅度較小,與流體力學(xué)注射組比較該差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),且各組內(nèi)脂質(zhì)體復(fù)合物組與裸質(zhì)粒組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。常規(guī)石蠟切片HE染色顯示,HI組及PV組小鼠肝細(xì)胞輕度水腫,各組內(nèi)裸質(zhì)粒組和脂質(zhì)體復(fù)合物組之間無(wú)明顯差異。流體力學(xué)注射組及門(mén)靜脈常規(guī)注射組均可見(jiàn)大量綠色熒光蛋白表達(dá),兩組的熒光表達(dá)量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),腹腔注射組小鼠的肝臟僅見(jiàn)少量的綠色熒光表達(dá),但三組內(nèi)脂質(zhì)體／質(zhì)粒DNA復(fù)合物組綠色熒光表達(dá)量均明顯高于裸質(zhì)粒組(P0.05)。 結(jié)論：應(yīng)用流體力學(xué)注射及門(mén)靜脈常規(guī)注射脂質(zhì)體／質(zhì)粒DNA復(fù)合物途徑,目的基因均在小鼠肝臟高效表達(dá),兩種途徑無(wú)明顯差異,流體力學(xué)注射可廣泛用于肝靶向性的活體基因轉(zhuǎn)染。 實(shí)驗(yàn)二TRAF6siRNA對(duì)急性肝衰竭內(nèi)毒素炎癥小鼠的保護(hù)作用 目的：研究TRAF6沉默基因?qū)PS/D-GalN誘導(dǎo)的急性肝衰竭內(nèi)毒素炎癥小鼠的作用及其可能的機(jī)制。 方法：BALB/c小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、急性肝衰竭(ALF)模型組、陽(yáng)性對(duì)照(姜黃素)組、陰性對(duì)照(空白質(zhì)粒)組和RNAi(pTRAF6-shRNA1)組。采用流體力學(xué)注射法將pTRAF6-shRNA1表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染小鼠,24 h后重復(fù)注射一次。第二次注射后24 h,予LPS(20μg/kg)聯(lián)合D-氨基半乳糖(D-GalN,600 mg/kg)制做急性肝衰竭內(nèi)毒素炎癥模型。觀察小鼠存活率,并于造模后16 h,采用常規(guī)生化方法血清ALT、AST,免疫組化染色檢測(cè)iNOS和NF-κB p65在肝細(xì)胞的表達(dá)；Realtime-PCR檢測(cè)TRAF6、IL-6、COX-2及NF-κB p65 mRNA的表達(dá)；Western blot檢測(cè)總蛋白和細(xì)胞核內(nèi)NF-κB p65的表達(dá)；造模后4、8、16 h,ELISA檢測(cè)血清TNF-α、IL-1β及TGF-β1水平變化。 結(jié)果：熒光顯微鏡觀察顯示真核表達(dá)質(zhì)粒pTRAF6-shRNA1成功轉(zhuǎn)染進(jìn)入小鼠肝組織。pTRAF6-shRNA1可明顯抑制小鼠肝組織TRAF6 mRNA和TRAF6蛋白表達(dá)(P0.01),其中TRAF6 mRNA表達(dá)抑制率為60.13%, TRAF6蛋白抑制率為52.08%,與正常小鼠比較均有顯著性差異(P0.01)。LPS/D-GalN腹腔注射16 h后,小鼠血清ALT、AST水平及肝組織病理學(xué)檢測(cè)顯示造模成功。RNAi (pTRAF6-shRNA1)組小鼠72h的存活率為49.3%,高于其它組(姜黃素組為36.2%). pTRAF6-shRNA1可明顯降低小鼠血清ALT和AST水平,與ALF模型組比較有顯著意義(P0.01)。Realtime-PCR結(jié)果顯示RNAi組小鼠IL-6、COX-2及NF-κB p65 mRNA表達(dá)下降,與ALF模型組比較有顯著意義(P0.01)。ELISA檢測(cè)顯示RNAi組小鼠血漿TNF-α、IL-1β及TGF-β1水平上調(diào),但始終明顯低于同時(shí)間點(diǎn)ALF模型組,TNF-α、IL-1p于8 h達(dá)到峰值,TGF-β1于16 h達(dá)到峰值。免疫組化染色顯示RNAi組iNOS蛋白表達(dá)較ALF模型組降低。姜黃素組與RNAi組比較無(wú)顯著差異(P0.05),姜黃素有降低轉(zhuǎn)氨酶,對(duì)阻止TNF-α、IL-1β、IL-6、COX-2及iNOS升高有一定作用。Western blot技術(shù)顯示ALF模型組小鼠肝組織中總蛋白和胞核NF-κB p65表達(dá)均增加；pTRAF6-shRNA1組小鼠肝組織總蛋白NF-κB p65表達(dá)水平顯著高于正常組小鼠總蛋白NF-κB p65水平(P0.01),但較ALF模型組比較無(wú)明顯變化(P0.05),胞核NF-κB p65明顯降低,與ALF模型組比較有顯著性差異(P0.05)。結(jié)果提示TRAF6基因沉默,不僅能降低細(xì)胞NF-κB p65表達(dá)水平,還能明顯抑制NF-κB p65核轉(zhuǎn)位。 結(jié)論：pTRAF6-shRNA1可能通過(guò)下調(diào)NF-κB p65水平,抑制炎癥相關(guān)細(xì)胞因子和炎性介質(zhì)表達(dá)水平,從而減輕內(nèi)毒素／半乳糖誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷。
【學(xué)位單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位年份】：2010
【中圖分類(lèi)】：R575.3
【部分圖文】：

圖1LPS/TLR4介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)通路治療急性肝衰竭過(guò)度炎癥反應(yīng)的研究重點(diǎn)。死因子受體相關(guān)因子一6[翎F(tumourneerosisfaetor)一rec即tRAF6』作為介導(dǎo)NF一KB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的一個(gè)關(guān)鍵銜接蛋白，在TL側(cè)中的發(fā)揮重要調(diào)節(jié)作用[8，9]。TRAF6既可激活NF一沼誘導(dǎo)inase，NIK)，同時(shí)，又可激活絲裂素活化蛋白激酶/ERK激酶激proteinkinase/ERKkinasekinasel，MEKKI)，是髓樣分化因子ionracto:58，MyD8s)依賴(lài)性信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑主要蛋白分子(見(jiàn)圖TRAF6缺失小鼠明顯降低LPs誘導(dǎo)的NF一沼和誘生型No合成一1和IL一18信號(hào)傳導(dǎo)障礙，機(jī)體對(duì)LPS低反應(yīng)。他們還發(fā)現(xiàn)TR能完全阻止LPS誘導(dǎo)的JNK活化。Katie等也發(fā)現(xiàn)TRAF6基s誘導(dǎo)的e一Jun氨基末端激酶(c一Junamino一terminalkinase，JNK)

接種RAW264.7細(xì)胞4h后細(xì)胞貼壁。第3天，倒置顯微鏡下觀察，可見(jiàn)多數(shù)細(xì)胞有明顯“偽足”伸出，大小不一，主要為圓形、橢圓形或梭形，細(xì)胞生長(zhǎng)較快，按l:3傳代第3天匯合率達(dá)90%以上(見(jiàn)圖1一l)。細(xì)胞活力和活性均在90%以上。圖1一1傳代第3天的RAW264.7細(xì)胞 (X200)2各組細(xì)胞活力檢測(cè)結(jié)果LpS刺激后，RAW264.7活化，形態(tài)發(fā)生改變(圖l一3)。LPs刺激后Zh、4h、sh和16h，MTT摻入法檢測(cè)各組細(xì)胞存活率，結(jié)果顯示:LPS組和姜黃素(Cur)組細(xì)胞存活率略有增加，地塞米松(DM)組細(xì)胞存活率略有減少，但比較各組細(xì)胞存活率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(幾0.05)(圖l一2)。 hhhaaa.，‘吸.叻

接種RAW264.7細(xì)胞4h后細(xì)胞貼壁。第3天，倒置顯微鏡下觀察，可見(jiàn)多數(shù)細(xì)胞有明顯“偽足”伸出，大小不一，主要為圓形、橢圓形或梭形，細(xì)胞生長(zhǎng)較快，按l:3傳代第3天匯合率達(dá)90%以上(見(jiàn)圖1一l)。細(xì)胞活力和活性均在90%以上。圖1一1傳代第3天的RAW264.7細(xì)胞 (X200)2各組細(xì)胞活力檢測(cè)結(jié)果LpS刺激后，RAW264.7活化，形態(tài)發(fā)生改變(圖l一3)。LPs刺激后Zh、4h、sh和16h，MTT摻入法檢測(cè)各組細(xì)胞存活率，結(jié)果顯示:LPS組和姜黃素(Cur)組細(xì)胞存活率略有增加，地塞米松(DM)組細(xì)胞存活率略有減少，但比較各組細(xì)胞存活率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(幾0.05)(圖l一2)。 hhhaaa.，‘吸.叻

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5 季愛(ài)民;蘇丹;車(chē)鷗;李文適;孫靚;張忠義;楊彬;;殼聚糖/siRNA納米粒介導(dǎo)的功能性基因沉默研究(英文)[A];2010年中國(guó)藥學(xué)大會(huì)暨第十屆中國(guó)藥師周論文集[C];2010年

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7 霍艷英;王瑩;張開(kāi)泰;王莉;項(xiàng)曉瓊;胡迎春;徐勤枝;李剛;米粲;吳德昌;;Smad7基因沉默對(duì)細(xì)胞增殖的影響[A];中國(guó)藥理學(xué)會(huì)毒理專(zhuān)業(yè)委員會(huì)第十次學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2004年

8 袁誠(chéng);李萃;馬金;韓成貴;于嘉林;Andrew Jackson;李大偉;;大麥條紋花葉病毒誘導(dǎo)的基因沉默載體系統(tǒng)的改造及其應(yīng)用[A];中國(guó)植物病理學(xué)會(huì)2009年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2009年

9 曹雪松;肖奇;周鵬;張曉明;魏春紅;李毅;;水稻矮縮病毒編碼的基因沉默抑制因子及其作用機(jī)制的研究[A];中國(guó)植物病理學(xué)會(huì)2005年學(xué)術(shù)年會(huì)暨植物病理學(xué)報(bào)創(chuàng)刊50周年紀(jì)念會(huì)論文摘要集[C];2005年

10 曹雪松;肖奇;周鵬;張曉明;魏春紅;李毅;;水稻矮縮病毒編碼的基因沉默抑制因子及其作用機(jī)制的研究[A];中國(guó)植物病理學(xué)會(huì)2005年學(xué)術(shù)年會(huì)暨植物病理學(xué)報(bào)創(chuàng)刊50周年紀(jì)念會(huì)論文集[C];2005年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 肖嶸　蘇玉文 湛意;將基因沉默理論用于硬皮病[N];健康報(bào);2007年

2 余志平;siRNA治療研究異彩紛呈(上)[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2007年

3 實(shí)習(xí)生 吳麗華;周雪平：8億農(nóng)民讓我留在國(guó)內(nèi)[N];科技日?qǐng)?bào);2006年

4 本版編輯 顏亮 楚君　任海軍;“沉默”是金[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2006年

5 記者 高博;胚胎干細(xì)胞分化方式被確定[N];科技日?qǐng)?bào);2008年

6 聶翠蓉編譯;RNAi：生物技術(shù)的藍(lán)月亮[N];科技日?qǐng)?bào);2003年

7 肖兵;攻關(guān)鎖定害蟲(chóng)抗藥性、作物抗病性[N];農(nóng)資導(dǎo)報(bào);2007年

8 谷文;百奧邁科與Benitec開(kāi)發(fā)新型小核酸干擾抗乙肝藥物[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2009年

9 貴州移動(dòng)畢節(jié)分公司 余廷貴;如何優(yōu)化GSM網(wǎng)絡(luò)[N];人民郵電;2002年

10 醫(yī)學(xué)博士 科學(xué)松鼠會(huì)成員 致樺;美麗的干擾[N];中國(guó)經(jīng)營(yíng)報(bào);2010年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 陳鋒;TRAF6基因沉默對(duì)內(nèi)毒素炎癥反應(yīng)的抑制效應(yīng)研究[D];華中科技大學(xué);2010年

2 李洪海;應(yīng)用RNAi技術(shù)對(duì)肝癌癌基因p28～(GANK)生物學(xué)功能的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2004年

3 呂典秋;馬鈴薯紡錘塊莖類(lèi)病毒遺傳多樣性及其誘導(dǎo)的基因沉默[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

4 牛勝鳥(niǎo);病毒基因介導(dǎo)的抗性機(jī)制及抗病毒轉(zhuǎn)基因西瓜的研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué);2004年

5 陶小榮;中國(guó)番茄黃化曲葉病毒（TYLCCNV）致病分子機(jī)理及其衛(wèi)星DNA誘導(dǎo)的基因沉默研究[D];浙江大學(xué);2004年

6 徐凱成;利用RNA干擾抑制人肝癌細(xì)胞N-ras表達(dá)的研究[D];吉林大學(xué);2006年

7 張華建;三種激發(fā)子誘導(dǎo)的過(guò)敏性細(xì)胞死亡和氣孔關(guān)閉的分子機(jī)制研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

8 張新民;原沉默子及染色質(zhì)重構(gòu)蛋白對(duì)基因沉默和異染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的作用[D];吉林大學(xué);2011年

9 宋婷;MAVS通過(guò)TRAF3調(diào)控ASC介導(dǎo)的炎癥信號(hào)通路的研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2012年

10 王成勤;Kif2a基因沉默抑制舌鱗狀細(xì)胞癌生長(zhǎng)轉(zhuǎn)移的研究[D];山東大學(xué);2011年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 任s

本文編號(hào)：2819208